Javascript-ը ներկայումս անջատված է ձեր զննարկիչում: Այս կայքի որոշ գործառույթներ չեն աշխատի, երբ Javascript-ը անջատված է:
Գրանցվեք ձեր կոնկրետ տվյալներով և ձեզ հետաքրքրող կոնկրետ դեղամիջոցով, և մենք կհամապատասխանեցնենք ձեր տրամադրած տեղեկատվությունը մեր ընդարձակ տվյալների բազայի հոդվածների հետ և անմիջապես կուղարկենք ձեզ PDF տարբերակը էլեկտրոնային փոստով։
Բան-Լան-Գեն գրանուլները մեղմացնում են դեքստրան նատրիումի սուլֆատի առաջացրած քրոնիկ կրկնվող կոլիտը մկների մոտ՝ մոդուլացնելով աղիքային միկրոբիոտան և վերականգնելով աղիքային SCFA-ի ստացած GLP-1 արտադրությունը։
Ջիաո Պենգ,1-3,*Լի Սի,4,*Չժեն Լին,3,5 Դուան Լիֆանգ,1 Գաո Չժենսյան,2,5 Դիեհու,1 Լի Ցզե,6 Լի Սյաոֆենգ,6 Շեն Սյանչուն,5 Սյաո Հայտաո21Պեկինի համալսարանի Շենժեն հիվանդանոցի դեղագիտության ամբիոն, Շենժեն, Չինաստանի Ժողովրդական Հանրապետություն; 2Շենժեն համալսարանի առողջապահական գիտությունների կենտրոն, դեղագիտության դպրոց, Շենժեն, Չինաստանի Ժողովրդական Հանրապետություն; 3Գույչժոուի բժշկական համալսարանի էթնիկ բժշկության և ավանդական չինական բժշկության մշակման և կիրառման ճարտարագիտական ​​տեխնոլոգիաների հետազոտական ​​կենտրոն, Կրթության նախարարություն, Գույչժոուի նահանգային դեղագիտության հիմնական լաբորատորիա, Գույչժոուի բժշկական համալսարան, Գույչժոուի բժշկական համալսարան, Չինաստանի Ժողովրդական Հանրապետություն; 4 Գաստրոէնտերոլոգիայի ամբիոն, Պեկինի համալսարանի Շենժեն հիվանդանոց, Շենժեն, Չինաստանի Ժողովրդական Հանրապետություն; 5 Դեղագիտության դպրոց, Գույչժոուի բժշկական համալսարան, դեղագործական բույսերի ֆունկցիայի և կիրառման պետական ​​հիմնական լաբորատորիա, Գույչժոուի բժշկական համալսարան; 6 Լաբորատոր բժշկության ամբիոն, Պեկինի համալսարանի Շենժենի հիվանդանոց, Շենժեն, Չինաստան [email protected] Շեն Սյանչուն, Դեղագործության դպրոց, Գուիզժոուի բժշկական համալսարան, Գուիզժոու, Չինաստանի Ժողովրդական Հանրապետություն, 550004, էլ. փոստ [email protected] Նպատակ՝ GLP-1-ի վրա հիմնված թերապիան բորբոքային աղիքային հիվանդության բուժման նոր տարբերակ է: Ban-Lan-Gen (BLG) գրանուլները հայտնի հակավիրուսային ավանդական քիմիայի բանաձև են, որը ցուցաբերում է պոտենցիալ հակաբորբոքային ակտիվություն տարբեր բորբոքային վիճակների բուժման մեջ: Այնուամենայնիվ, դրա հակաբորբոքային ազդեցությունը կոլիտի վրա և դրա գործողության մեխանիզմը դեռևս պարզ չեն: ՄԵԹՈԴՆԵՐ՝ Մկների մոտ դեքստրան նատրիումի սուլֆատի (DSS) առաջացրած քրոնիկ կրկնվող կոլիտի որոշում: Հիվանդության ակտիվության ինդեքսները, վնասվածքի հյուսվածաբանական մարկերները և պրոբորբոքային ցիտոկինների մակարդակը կատարվել են BLG-ի պաշտպանիչ ազդեցությունը գնահատելու համար: BLG-ի ազդեցությունը աղիքային միկրոբիոտայի և աղիների վրա բնութագրվել է շիճուկային GLP-1 մակարդակով և հաստ աղիքի Gcg, GPR41 և GRP43 արտահայտությամբ, աղիքային միկրոբիոտայի կազմով, կղանքի մեջ SCFA մակարդակով և GLP-1 արտազատմամբ: Մկան հաստ աղիքի առաջնային էպիթելային բջիջներից՝ SCFA-ից ստացված GLP-1 արտադրությունը: Արդյունքներ՝ BLG բուժումը զգալիորեն նվազեցրել է մարմնի քաշի կորուստը, DAI-ը, հաստ աղիքի կարճացումը, հաստ աղիքի հյուսվածքի վնասումը և TNF-α, IL-1β և IL-6 պրոբորբոքային ցիտոկինների մակարդակը հաստ աղիքի հյուսվածքում: Բացի այդ, BLG բուժումը կարող է զգալիորեն վերականգնել հաստ աղիքի Gcg, GPR41 և GRP43 արտահայտությունը և շիճուկային GLP-1 մակարդակը կոլիտով մկների մոտ՝ ավելացնելով SCFA արտադրող բակտերիաներ, ինչպիսիք են Akkermansia-ն և Prevotellaceae_UCG-001-ը, և նվազեցնելով այնպիսի բակտերիաների առատությունը, ինչպիսիք են Eubacterium_xylanophilum_group-ը, Ruminococcaceae_UCG-014-ը, Intestinimonas-ը և Oscillibacter-ը: Բացի այդ, BLG բուժումը կարող է զգալիորեն բարձրացնել SCFA-ների մակարդակը կոլիտով մկների կղանքում: Միևնույն ժամանակ, in vitro փորձարկումները նաև ցույց են տվել, որ BLG-ով բուժված մկների կղանքի քաղվածքը կարող է մեծապես խթանել մկնիկի հաստ աղիքի առաջնային փոքր էպիթելային բջիջների GLP-1 արտազատումը: Եզրակացություններ. Այս արդյունքները ենթադրում են, որ BLG-ն ունի հակակոլիտային ազդեցություն: BLG-ն ունի ներուժ մշակելու որպես թերապիա, գոնե մասամբ՝ աղիքային միկրոբիոտան մոդուլացնելով և աղիքային SCFA-ից ստացված GLP-1 արտադրությունը վերականգնելով: Խոստումնալից դեղամիջոցներ քրոնիկ կրկնվող կոլիտի համար: Հիմնաբառեր՝ կոլիտ, Ban-Lan-Gen գրանուլներ, աղիքային միկրոբիոտա, կարճ շղթայով ճարպաթթուներ, GLP-1:
Խոցային կոլիտը (ԽԿ) հաստ աղիքի և ուղիղ աղիքի երկարատև բորբոքային հիվանդություն է, որը բնութագրվում է կրկնվող լուծով, որովայնի ցավով, քաշի կորստով և լորձաթաղանթային արյունոտ կղանքով։1 Վերջերս ԽԿ-ի տարածվածությունն աճում է նախկինում ցածր հիվանդացության երկրներում, այդ թվում՝ Չինաստանում, արևմտյան կենսակերպի աճող ժողովրդականության շնորհիվ։2 Այս աճը լուրջ խնդիրներ է առաջացնում հանրային առողջության համար և լուրջ հետևանքներ ունի հիվանդների աշխատունակության և կյանքի որակի վրա։ Հատկանշական է, որ ԽԿ-ի ախտածագումը մեծ մասամբ մնում է անհասկանալի, բայց ընդհանուր առմամբ ընդունված է, որ գենետիկան, շրջակա միջավայրի գործոնները, աղիքային միկրոբիոտան և իմունային համակարգը բոլորը նպաստում են ԽԿ-ի զարգացմանը։3 Նույնիսկ այժմ ԽԿ-ի համար բուժում չկա, և բուժման նպատակը կլինիկորեն կլինիկական ախտանիշների վերահսկումն է, ռեմիսիայի առաջացումը և պահպանումը, լորձաթաղանթի վերականգնման խթանումը և կրկնության նվազեցումը։ Դասական բուժումները ներառում են ամինոսալիցիլատներ, կորտիկոստերոիդներ, իմունոսուպրեսիվներ և կենսաբանական դեղամիջոցներ։ Այնուամենայնիվ, այս դեղամիջոցները չեն կարող հասնել ցանկալի ազդեցությանը՝ իրենց տարբեր կողմնակի ազդեցությունների պատճառով։4 Վերջերս բազմաթիվ դեպքերի ուսումնասիրություններ ցույց են տվել, որ ավանդական չինական բժշկությունը (ՉՉԲ) մեծ ներուժ է ցուցաբերել ԽԿ-ի թեթևացման գործում՝ ցածր թունավորությամբ, ինչը ենթադրում է որ նոր ավանդական ավանդական բժշկության թերապիաների մշակումը UC.5-7-ի խոստումնալից բուժման ռազմավարություն է։
Բանլանգենի հատիկները (BLG) ավանդական չինական բժշկության պատրաստուկ է, որը պատրաստվում է Բանլանգենի արմատի ջրային քաղվածքից:8 Բացի հակավիրուսային արդյունավետությունից, BLG-ն ցուցաբերում է պոտենցիալ հակաբորբոքային ակտիվություն տարբեր բորբոքային վիճակների բուժման գործում:9,10 Բացի այդ, Radix isatidis-ի ջրային քաղվածքներից առանձնացվել և նույնականացվել են գլյուկոզինոլատներ (R,S-գոիտրին, պրոգոիտրին, էպիպրորուբին և գլյուկոզիդ) և նուկլեոզիդներ (հիպոքսանտին, ադենոզին, ուրիդին և գուանոզին) և ինդիգո ալկալոիդներ, ինչպիսիք են ինդիգոն և ինդիրուբինը:11,12 Նախորդ ուսումնասիրությունները լավ փաստագրել են, որ ադենոզինը, ուրիդինը և ինդիրուբինը միացություններն ցուցաբերում են հզոր հակակոլիտային ազդեցություն կոլիտի տարբեր կենդանիների մոդելներում:13-17 Այնուամենայնիվ, ապացույցների վրա հիմնված ուսումնասիրություններ չեն իրականացվել կոլիտի դեպքում BLG-ի արդյունավետությունը գնահատելու համար: Ներկայիս ուսումնասիրության մեջ մենք ուսումնասիրել ենք BLG-ի պաշտպանիչ ազդեցությունը դեքստրան նատրիումի սուլֆատի (DSS) առաջացրած քրոնիկ կրկնվող կոլիտի վրա C57BL/6 մկների մոտ և պարզել ենք, որ որ BLG-ի բանավոր ընդունումը զգալիորեն թուլացրել է DSS-ով պայմանավորված քրոնիկ կրկնվող հաստ աղիքի բորբոքումը մկների մոտ, դրա կարգավորող մեխանիզմները կապված են աղիքային միկրոբիոտայի մոդուլյացիայի և աղիքային ծագում ունեցող գլյուկագոնանման պեպտիդ-1-ի (GLP-1) արտադրության վերականգնման հետ։
Դեղատներից գնվել են BLG գրանուլներ (առանց շաքարի, NMPA-ի կողմից հաստատված Z11020357; Beijing Tongrentang Technology Development Co., Ltd., Պեկին, Չինաստան; խմբաքանակի համարը՝ 20110966): DSS-ը (մոլեկուլային քաշը՝ 36,000–50,000 Դալտոն) գնվել է MP Biologicals-ից (Սանտա Անա, ԱՄՆ): Սուլֆասալազինը (SASP) (≥ 98% մաքրություն), հեմատոքսիլինը և էոզինը գնվել են Sigma-Aldrich-ից (Սենթ Լուիս, Միսսուրի, ԱՄՆ): Մկնիկի TNF-α, IL-1β և IL-6 luminex Elisa թեստի հավաքածուները գնվել են R&D systems-ից (Մինեապոլիս, Մինեսոտա, ԱՄՆ): Քացախաթթուն, պրոպիոնաթթուն և յուղաթթուն գնվել են Aladdin Industries-ից (Շանհայ, Չինաստան): 2-էթիլյուղաթթուն գնվել է Merck KGaA-ից (Դարմշտադտ, Գերմանիա):
6-8 շաբաթական C57BL/6 արու մկները (մարմնի քաշը՝ 18-22 գ) ձեռք են բերվել Beijing Wetahe Laboratory Animal Technology Co., Ltd.-ից (Պեկին, Չինաստան) և պահվել են 22 ± 2 °C ջերմաստիճանի միջավայրում՝ 12 ժամյա լույս/մթություն ցիկլով։ Մկներին կերակրել են կրծողների ստանդարտ սննդակարգով՝ մեկ շաբաթ խմելու ջրի ազատ հասանելիությամբ՝ նոր միջավայրին հարմարվելու համար։ Այնուհետև մկները պատահականորեն բաժանվել են չորս խմբի՝ վերահսկիչ խումբ, DSS մոդելային խումբ, SASP-ով բուժված խումբ (200 մգ/կգ, բանավոր) և BLG-ով բուժված խումբ (1 գ/կգ, բանավոր)։ Ինչպես ցույց է տրված նկար 1A-ում, մեր նախորդ ուսումնասիրության համաձայն, մեր նախորդ ուսումնասիրության համաձայն, մկների մոտ փորձարարական քրոնիկ կրկնվող կոլիտ է առաջացել 1.8% DSS-ի երեք ցիկլերով՝ 5 օրվա ընթացքում, որին հաջորդել է թորած ջուրը՝ 7 օրվա ընթացքում։ SASP և BLG բուժված խմբերի 18 մկները բուժվել են համապատասխանաբար SASP-ով և BLG-ով՝ ամեն օր՝ սկսած 0-րդ օրվանից։ Նախնական փորձերի համաձայն, BLG-ի դոզան... սահմանվել է 1 գ/կգ: Միևնույն ժամանակ, SASP-ի դեղաչափը սահմանվել է 200 մգ/կգ՝ համաձայն գրականության:4 Վերահսկիչ և DSS մոդելային խմբերը ողջ փորձի ընթացքում ստացել են նույն ծավալի ջուր:
Նկար 1. BLG-ն մեղմացնում է DSS-ի առաջացրած քրոնիկ կրկնվող կոլիտի վիճակը մկների մոտ։ (A) Քրոնիկ կրկնվող կոլիտի փորձարարական դիզայնը և բուժումը, (B) մարմնի քաշի փոփոխությունը, (C) հիվանդության ակտիվության ինդեքսի (DAI) միավորը, (D) հաստ աղիքի երկարությունը, (E) հաստ աղիքի ներկայացուցչական պատկերը, (F) H&E ներկումը հաստ աղիքում (մեծացում, ×100) և (G) հյուսվածաբանական միավորը։ Տվյալները ներկայացված են որպես միջին ± SEM (n = 6)։ ##p < 0.01 կամ ###p < 0.001՝ համեմատած վերահսկիչ (Con) խմբի հետ. *p < 0.05 կամ **p < 0.01 կամ ***p < 0.001՝ համեմատած DSS խմբի հետ։
Մարմնի քաշը, կղանքի կոնսիստենցիան և ուղիղ աղիքի արյունահոսությունը գրանցվում էին ամեն օր: Հիվանդության ակտիվության ինդեքսը (ՀԱԻ) որոշվել է մարմնի քաշի, կղանքի կոնսիստենցիայի և ուղիղ աղիքի արյունահոսության միավորները համատեղելով, ինչպես նկարագրվել է նախկինում:19 Փորձի ավարտին բոլոր մկները էվթանազիայի են ենթարկվել, և արյունը, կղանքը և հաստ աղիքը հավաքվել են հետագա փորձերի համար:
Հաստ աղիքի հյուսվածքը ֆիքսվեց ֆորմալինով և ներդրվեց պարաֆինի մեջ։ Կատարվեցին 5 միկրոնանոց հատվածներ, որոնք ներկվեցին հեմատոքսիլին-էոզինով (H&E), այնուհետև կույրացվեցին և գնահատվեցին նախկինում նկարագրվածի պես։19
Հաստ աղիքի հյուսվածքի ընդհանուր ՌՆԹ-ն արդյունահանվել է Trizol ռեակտիվով (Invitrogen, Carlsbad, CA), որին հաջորդել է կԴՆԹ-ի արդյունահանումը հակադարձ տրանսկրիպտազով (TaKaRa, Kusatsu, Shiga, Japan): Քանակական ՊՇՌ-ն իրականացվել է իրական ժամանակի ՊՇՌ համակարգի միջոցով՝ օգտագործելով SYBR Green Master (Roche, Basel, Switzerland): Նպատակային գեների տրանսկրիպտները նորմալացվել են β-ակտինի նկատմամբ, և տվյալները վերլուծվել են 2-ΔΔCT մեթոդով: Գեների պրայմերների հաջորդականությունները ներկայացված են աղյուսակ 1-ում:
Մկան հաստ աղիքի էպիթելային բջիջների առաջնային մեկուսացումը և կուլտուրան իրականացվել են նախկինում նկարագրված եղանակով։20 Հակիրճ ասած, 6-8 շաբաթական մկների հաստ աղիները նախ հեռացվել են արգանդի վզիկի տեղաշարժով զոհաբերելուց հետո, այնուհետև երկայնականորեն բացվել, մշակվել են Հենքսի հավասարակշռված աղի լուծույթով (HBSS, առանց կալցիումի և մագնեզիումի) և կտրվել 0.5-1 մմ փոքր կտորների։ Հետագայում հյուսվածքները մարսվել են 0.4 մգ/մլ կոլագենազ XI-ով (Sigma, Poole, Մեծ Բրիտանիա) ազատ DMEM միջավայրում և ցենտրիֆուգացվել 300 xg-ով 5 րոպե սենյակային ջերմաստիճանում։ Վերստին լուծարել գնդիկը DMEM միջավայրում (լրացված 10% պտղի խոշոր եղջերավոր անասունի շիճուկով, 100 միավոր/մլ պենիցիլինով և 100 մկգ/մլ ստրեպտոմիցինով) 37°C ջերմաստիճանում և անցկացնել նեյլոնե ցանցի միջով (ծակոտիների չափը՝ ~250 մկմ)։ Հաստ աղիքի էպիթելային բջիջների ալիքվոտները տեղադրվել են ապակե հատակով ամանների մեջ և ինկուբացվել քացախաթթվի, պրոպիոնաթթվի, յուղաթթվի և մկան կղանքի քաղվածքներ 2 ժամ 37°C ջերմաստիճանում, 5% CO2:
Հաստ աղիքի հյուսվածքը հոմոգենացվել է PBS-ով, և հաստ աղիքի հյուսվածքում IL-6, TNF-α և IL-1β ցիտոկինների մակարդակները հայտնաբերվել են luminex ELISA assay հավաքածուների միջոցով (R&D systems, Մինեապոլիս, Մինեսոտա, ԱՄՆ): Նմանապես, մկների առաջնային հաստ աղիքի էպիթելային բջիջների շիճուկում և կուլտուրայի միջավայրում GLP-1 մակարդակները որոշվել են ELISA հավաքածուի միջոցով (Bioswamp, Ուհան, Չինաստան)՝ համաձայն արտադրողի հրահանգների:
Կղանքից ընդհանուր ԴՆԹ-ն արդյունահանվել է ԴՆԹ արդյունահանման հավաքածուի միջոցով (Tiangen, Չինաստան): ԴՆԹ-ի որակը և քանակը չափվել են համապատասխանաբար 260 նմ/280 նմ և 260 նմ/230 նմ հարաբերակցությամբ: Հետագայում, յուրաքանչյուր արդյունահանված ԴՆԹ-ն որպես ձևանմուշ օգտագործելով, 338F (ACTCCTACGGGAGGCAGCAG) և 806R (GGACTACHVGGTWTCTAAT) հատուկ պրայմերներն օգտագործվել են 16S rRNA գենի V3-V4 շրջանները տարբեր շրջաններում ուժեղացնելու համար: ՊՇՌ արգասիքները մաքրվել են QIAquick Gel Extraction Kit-ի միջոցով (QIAGEN, Գերմանիա), քանակականացվել են իրական ժամանակի ՊՇՌ-ի միջոցով և հաջորդականացվել են IlluminaMiseq PE300 հաջորդականության հարթակի միջոցով (Illumina Inc., CA, ԱՄՆ): Կենսաինֆորմատիկական վերլուծության համար տվյալների մշակումը կատարվել է նախկինում հրապարակված արձանագրությունների համաձայն:21,22 Ամփոփելով՝ օգտագործեք Cutadapt (V1.9.1)՝ հում էքսպրես ֆայլերը զտելու համար: OTU-ները կլաստերացվել են: Օգտագործելով UPARSE-ը (տարբերակ 7.0.1001)՝ 97% նմանության սահմանային արժեքով, իսկ UCHIME-ը՝ քիմերային հաջորդականությունները հեռացնելու համար։ Համայնքի կազմի վերլուծությունը և դասակարգումը կատարվել են RDP դասակարգչի (http://rdp.cme.msu.edu/) միջոցով, որը հիմնված է SILVA ռիբոսոմային ՌՆԹ գեների տվյալների բազայի վրա։
Կարճ շղթայով ճարպաթթուների (քացախաթթու, պրոպիոնաթթու և յուղաթթու) մակարդակները չափվել են Տաոյի և այլոց կողմից նախկինում նկարագրվածի համաձայն՝ որոշ փոփոխություններով։23 Հակիրճ ասած, 100 մգ կղանքը նախ լուծվել է 0.4 մլ ապաիոնացված ջրի մեջ, որին հաջորդել է 0.1 մլ 50% ծծմբական թթվի և 0.5 մլ 2-էթիլբուտիրաթթուի (ներքին ստանդարտ) ավելացումը, այնուհետև հոմոգենացվել և տաքացվել է 4°C ջերմաստիճանում։ Ցենտրիֆուգացրեք 12,000 պտ/րոպե արագությամբ 15 րոպե C ջերմաստիճանում: Վերին շերտը արդյունահանվել է 0.5 մլ եթերով և ներարկվել գազային քրոմատոգրաֆիայի մեջ՝ վերլուծության համար: Գազային քրոմատոգրաֆիայի (ԳՔ) վերլուծության համար նմուշները վերլուծվել են GC-2010 Plus գազային քրոմատոգրաֆով (Shimadzu, Inc.), որը հագեցած է բոցի իոնացման դետեկտորով (FID): Բաժանումը իրականացվել է ZKAT-624 սյան միջոցով, 30 մ × 0.53 մմ × 0.3 մկմ (Lanzhou Zhongke Antai Analytical Technology Co., Ltd., Չինաստան): Տվյալները ստացվել են ԳՔ լուծույթի ծրագրաշարի միջոցով (Shimadzu, Inc.): Բաժանման հարաբերակցությունը կազմել է 10:1, կրող գազը՝ ազոտ, իսկ հոսքի արագությունը՝ 6 մլ/րոպե: Ներարկման ծավալը կազմել է 1 մկլ: Ներարկիչի և դետեկտորի ջերմաստիճանը կազմել է 300°C: Ջեռոցի ջերմաստիճանը պահպանվել է 140°C-ում 13.5 րոպե, ապա բարձրացվել է մինչև 250°C արագությամբ: 120°C/րոպե; ջերմաստիճանը պահպանվում է 5 րոպե։
Տվյալները ներկայացված են որպես միջինի միջին ± ստանդարտ սխալ (SEM): Տվյալների նշանակալիությունը գնահատվել է միակողմանի ANOVA-ի միջոցով, որին հաջորդել է Դունկանի բազմակի տիրույթի թեստը: Բոլոր հաշվարկների համար օգտագործվել է GraphPad Prism 5.0 ծրագիրը (GraphPad Software Inc., Սան Դիեգո, Կալիֆոռնիա, ԱՄՆ), և p < 0.05-ը համարվել է վիճակագրորեն նշանակալի:
Հայտնի է, որ խոցային կոլիտը քրոնիկ կրկնվող կոլիտային հիվանդություն է, որն ուղեկցվում է որովայնի ուժեղ ցավով, լուծով և արյունահոսությամբ: Հետևաբար, մկների մոտ DSS-ի առաջացրած քրոնիկ կրկնվող կոլիտը սահմանվել է BLG-ի հակակոլիտային արդյունավետությունը գնահատելու համար (Նկար 1Ա): Համեմատած վերահսկիչ խմբի հետ, DSS մոդելային խմբի մկները զգալիորեն նվազեցրել են մարմնի քաշը և ավելի բարձր DAI, և այդ փոփոխությունները զգալիորեն վերացել են BLG բուժումից 24 օր հետո (Նկար 1Բ և Գ): Հաստ աղիքի կրճատումը խոցային կոլիտի կարևոր առանձնահատկություն է: Ինչպես ցույց է տրված նկարներ 1Դ և Ե-ում, DSS ստացած մկների հաստ աղիքի երկարությունը զգալիորեն կրճատվել է, բայց BLG բուժումը թեթևացրել է դրանք: Հետագայում, հաստ աղիքի բորբոքումը գնահատելու համար կատարվել է հյուսվածաբանական վերլուծություն: H&E ներկված պատկերները և պաթոլոգիական միավորները ցույց են տվել, որ DSS-ի կիրառումը զգալիորեն խաթարել է հաստ աղիքի կառուցվածքը և հանգեցրել կրիպտների քայքայման, մինչդեռ BLG բուժումը զգալիորեն նվազեցրել է կրիպտների քայքայումը և պաթոլոգիական միավորները (Նկար 1Ֆ և Գ): Հատկանշական է, որ BLG-ի պաշտպանիչ ազդեցությունը 1 գ/կգ դեղաչափով համեմատելի էր SASP-ի պաշտպանիչ ազդեցության հետ՝ 200 մգ/կգ: Ամփոփելով՝ այս արդյունքները ենթադրում են, որ BLG-ն արդյունավետ է մկների մոտ DSS-ի առաջացրած քրոնիկ կրկնվող կոլիտի ծանրությունը նվազեցնելու համար:
TNF-α-ն, IL-1β-ն և IL-6-ը հաստ աղիքի բորբոքման կարևոր բորբոքային մարկերներ են: Ինչպես ցույց է տրված նկար 2A-ում, DSS-ն առաջացրել է TNF-α-ի, IL-1β-ի և IL-6-ի գեների արտահայտման զգալի աճ հաստ աղիքում՝ համեմատած վերահսկիչ խմբի հետ: BLG-ի կիրառումը կարող է զգալիորեն վերացնել այս DSS-միջնորդավորված փոփոխությունները: Հաջորդը, մենք օգտագործել ենք ELISA՝ հաստ աղիքի հյուսվածքում TNF-α, IL-1β և IL-6 բորբոքային ցիտոկինների մակարդակը որոշելու համար: Արդյունքները նաև ցույց են տվել, որ TNF-α-ի, IL-1β-ի և IL-6-ի հաստ աղիքի մակարդակները զգալիորեն բարձրացել են DSS-ով բուժված մկների մոտ, մինչդեռ BLG բուժումը մեղմացրել է այդ աճերը (Նկար 2B):
Նկար 2. BLG-ն արգելակում է բորբոքային ցիտոկինների՝ TNF-α, IL-1β և IL-6 գեների արտահայտությունը և արտադրությունը DSS-ով բուժված մկների հաստ աղիքում։ (A) TNF-α, IL-1β և IL-6-ի հաստ աղիքի գեների արտահայտությունը։ (B) TNF-α, IL-1β և IL-6-ի հաստ աղիքի սպիտակուցի մակարդակները։ Տվյալները ներկայացված են որպես միջին ± SEM (n = 4–6)։ #p < 0.05 կամ ##p < 0.01 կամ ###p < 0.001՝ վերահսկիչ (Con) խմբի համեմատ։ *p < 0.05 կամ **p < 0.01՝ DSS խմբի համեմատ։
Աղիքային դիսբիոզը կարևոր դեր է խաղում աղիքային խոցային համախտանիշի (UC) ախտածագման մեջ:24 Որպեսզի հետազոտվի, թե արդյոք BLG-ն մոդուլացնում է DSS-ով բուժված մկների աղիքային միկրոբիոտան, կատարվել է 16S rRNA հաջորդականացում՝ աղիքային պարունակության բակտերիալ համայնքը վերլուծելու համար: Վեննի դիագրամը ցույց է տալիս, որ երեք խմբերն ունեն 385 ընդհանուր OTU: Միևնույն ժամանակ, յուրաքանչյուր խումբ ուներ եզակի OTU (Նկար 3Ա): Ավելին, նկար 3Բ և Գ-ում ներկայացված Chao1 ինդեքսը և Շենոնի ինդեքսը ցույց են տվել, որ աղիքային միկրոբիոտայի համայնքային բազմազանությունը նվազել է BLG-ով բուժված մկների մոտ, քանի որ Շենոնի ինդեքսը զգալիորեն նվազել է BLG-ով բուժված խմբում: Երեք խմբերի միջև կլաստերային օրինաչափությունները որոշելու համար օգտագործվել են գլխավոր բաղադրիչների վերլուծությունը (PCA) և գլխավոր կոորդինատների վերլուծությունը (PCoA) և ցույց են տվել, որ DSS-ով բուժված մկների համայնքային կառուցվածքը հստակորեն առանձնացվել է BLG բուժումից հետո (Նկար 3Դ և Ե): Այս տվյալները ենթադրում են, որ BLG բուժումը զգալիորեն ազդել է DSS-ի առաջացրած կոլիտով մկների համայնքային կառուցվածքի վրա:
Նկար 3. BLG-ն փոխում է աղիքային միկրոբիոտայի բազմազանությունը DSS-ի հետևանքով առաջացած կոլիտով մկների մոտ։ (A) OTU-ի Վեննի դիագրամ, (B) Chao1 ինդեքս, (C) Շենոնի հարստության ինդեքս, (D) OTU-ի գլխավոր բաղադրիչների վերլուծության (PCA) գնահատման գրաֆիկ, (E) OTU գլխավոր կոորդինատների վերլուծության (PCoA) գնահատական ​​Նկար։ Տվյալները ներկայացված են որպես միջին ± SEM (n = 6)։**p < 0.01՝ DSS խմբի համեմատ։
Կղանքի միկրոբիոտայի կոնկրետ փոփոխությունները գնահատելու համար մենք վերլուծել ենք աղիքային միկրոբիոտայի կազմը բոլոր տաքսոնոմիկ մակարդակներում: Ինչպես ցույց է տրված նկար 4A-ում, բոլոր խմբերի հիմնական տեսակներն էին Firmicutes-ը և Bacteroidetes-ը, որին հաջորդում էին Verrucomicrobia-ն: Firmicutes-ի և Firmicutes/Bacteroidetes-ի հարաբերական առատությունները զգալիորեն աճել էին DSS-ով բուժված մկների կղանքի միկրոբային համայնքներում՝ համեմատած վերահսկիչ մկների հետ, և այդ փոփոխությունները զգալիորեն վերացել էին BLG բուժումից հետո: Մասնավորապես, BLG բուժումը զգալիորեն մեծացրել է Verrucobacterium-ի հարաբերական առատությունը DSS-ի առաջացրած կոլիտով մկների կղանքում: Տնային տնտեսությունների մակարդակում կղանքի միկրոբային համայնքները զբաղեցված էին Lachnospiriaceae, Muribaculaceae, Akkermansiaceae, Ruminococcaceae և Prevotellaceae-ներով (Նկար 4B): DSS խմբի համեմատ, BLG-ի նվազումը մեծացրել է Akkermansiaceae-ի առատությունը, բայց նվազեցրել է Lachnospiraceae և Ruminococcaceae-ի առատությունը: Հատկանշական է, որ սեռի մակարդակում կղանքի... Միկրոբիոտան զբաղեցված էր Lachnospira_NK4A136_group, Akkermansia և Prevotellaceae_UCG-001-ով (Նկար 4C): Այս հայտնագործությունը նաև ցույց տվեց, որ BLG բուժումը արդյունավետորեն վերացրեց միկրոբիոտայի անհավասարակշռությունը՝ ի պատասխան DSS մարտահրավերի, որը բնութագրվում է Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas և Oscillibacter ցուցանիշների նվազմամբ և Akkermansia և Prevotellaceae_UCG-001 ցուցանիշների աճով:
Նկար 4. BLG-ն փոխում է աղիքային միկրոբիոտայի առատությունը DSS-ի առաջացրած կոլիտով մկների մոտ։ (A) Աղիքային միկրոբիոտայի առատությունը տիպի մակարդակում։ (B) Աղիքային միկրոբիոտայի առատությունը ընտանիքի մակարդակում։ (C) Աղիքային միկրոբիոտայի առատությունը սեռի մակարդակում։ Տվյալները ներկայացված են որպես միջին ± SEM (n = 6)։ #p < 0.05 կամ ###p < 0.001՝ համեմատած վերահսկիչ (Con) խմբի հետ։ *p < 0.05 կամ **p < 0.01 կամ ***p < 0.001՝ համեմատած DSS խմբի հետ։
Հաշվի առնելով, որ կարճ շղթայով ճարպաթթուները (SCFAs) Akkermansia-ի և Prevotellaceae_UCG-001-ի հիմնական մետաբոլիտներն են, մինչդեռ ացետատը, պրոպիոնատը և բուտիրատը աղիքային լուսանցքում ամենատարածված SCFA-ներն են,25-27 մենք դեռևս մեր ուսումնասիրության մեջ ենք։ Ինչպես ցույց է տրված նկար 5-ում, DSS-ով բուժված խմբում կղանքի մեջ ացետատի, պրոպիոնատի և բուտիրատի կոնցենտրացիաները զգալիորեն նվազել են, մինչդեռ BLG բուժումը կարողացել է մեծապես ճնշել այս նվազումը։
Նկար 5. BLG-ն մեծացնում է SCFA-ների մակարդակը DSS-ի առաջացրած կոլիտով մկների կղանքում։ (A) Քացախաթթվի պարունակությունը կղանքում։ (B) պրոպիոնաթթվի պարունակությունը կղանքում։ (C) կարագաթթվի պարունակությունը կղանքում։ Տվյալները ներկայացված են որպես միջին ± SEM (n = 6)։#p < 0.05 կամ ##p < 0.01՝ համեմատած վերահսկիչ (Con) խմբի հետ։ *p < 0.05 կամ **p < 0.01՝ համեմատած DSS խմբի հետ։
Մենք նաև հաշվարկեցինք Պիրսոնի կոռելյացիայի գործակիցը սեռային մակարդակի դիֆերենցիալ SCFA-ի և կղանքի միկրոբիոտայի միջև: Ինչպես ցույց է տրված նկար 6-ում, Akkermansia-ն դրականորեն կապված էր պրոպիոնաթթվի (Pearson = 0.4866) և յուղաթթվի (Pearson = 0.6192) արտադրության հետ: Ի տարբերություն դրա, և՛ Enteromonas-ը, և՛ Oscillobacter-ը բացասականորեն կապված էին ացետատի արտադրության հետ՝ համապատասխանաբար 0.4709 և 0.5104 Պիրսոնի գործակիցներով: Նմանապես, Ruminococcaceae_UCG-014-ը բացասականորեն կապված էր պրոպիոնաթթվի (Pearson = 0.4508) և յուղաթթվի (Pearson = 0.5842) արտադրության հետ:
Նկար 6. Պիրսոնի կոռելյացիոն վերլուծությունը դիֆերենցիալ SCFA-ների և հաստ աղիքի մանրէների միջև։ (A) Էնտերոմոնաս քացախաթթվով։ (B) Կոնտուզիա բացիլուս քացախաթթվով։ (C) Ակկերմանսիա ընդդեմ պրոպիոնաթթվի։ (D) Ռումինոկոկ_UCG-014 պրոպիոնաթթվով։ (E) Ակկերմանսիա կարագաթթվով։ (F)) Ռումինոկոկ _UCG-014 կարագաթթվով։
Գլյուկագոնանման պեպտիդ-1-ը (GLP-1) պրոգլյուկագոնի (Gcg) բջջային տիպի հետտրանսլյացիոն արգասիք է՝ հակաբորբոքային հատկություններով։28 Ինչպես ցույց է տրված նկար 7-ում, DSS-ը առաջացրել է Gcg mRNA արտահայտման զգալի նվազում։ Հաստ աղիքի և BLG-ի բուժումը կարող է զգալիորեն հակադարձել DSS-ի առաջացրած Gcg-ի նվազումը՝ համեմատած վերահսկիչ խմբի հետ (Նկար 7Ա): Միևնույն ժամանակ, շիճուկում GLP-1-ի մակարդակը զգալիորեն նվազել է DSS-ով բուժված խմբում, և BLG բուժումը կարող է մեծապես կանխել այս նվազումը (Նկար 7Բ): Քանի որ կարճ շղթայով ճարպաթթուները կարող են խթանել GLP-1-ի սեկրեցիան G-սպիտակուցին միացված ընկալիչ 43-ի (GRP43) և G-սպիտակուցին միացված ընկալիչ 41-ի (GRP41) ակտիվացման միջոցով, մենք նաև ուսումնասիրել ենք GPR41-ը և GRP43-ը կոլիտով մկների հաստ աղիքում և պարզել, որ GRP43-ի և GPR41-ի հաստ աղիքի mRNA արտահայտումը զգալիորեն նվազել է DSS-ի ազդեցությունից հետո, և BLG բուժումը կարող է արդյունավետորեն փրկել այդ նվազումները (Նկար 7Գ և Դ).
Նկար 7։ BLG-ն մեծացնում է շիճուկային GLP-1 մակարդակը և հաստ աղիքի Gcg, GPR41 և GRP43 mRNA արտահայտությունը DSS-ով բուժված մկների մոտ։ (A) Gcg mRNA արտահայտությունը հաստ աղիքի հյուսվածքում։ (B) GLP-1 մակարդակը շիճուկում։ (C) GPR41 mRNA արտահայտությունը հաստ աղիքի հյուսվածքում։ (D) GPR43 mRNA արտահայտությունը հաստ աղիքի հյուսվածքում։ Տվյալները ներկայացված են որպես միջին ± SEM (n = 5–6)։ #p < 0.05 կամ ##p < 0.01՝ համեմատած վերահսկիչ (Con) խմբի հետ։ *p < 0.05՝ համեմատած DSS խմբի հետ։
Քանի որ BLG բուժումը կարող էր բարձրացնել շիճուկային GLP-1 մակարդակը, հաստ աղիքի Gcg mRNA-ի արտահայտությունը և կղանքի SCFA մակարդակը DSS-ով բուժված մկների մոտ, մենք հետագայում ուսումնասիրեցինք ացետատը, պրոպիոնատը և բուտիրատը, ինչպես նաև վերահսկիչ (F-Con), DSS կոլիտի (F-Con) -DSS) և BLG-ով բուժված կոլիտի (F-BLG) մկների մոտ GLP-1-ի արտազատման վերաբերյալ մկների առաջնային հաստ աղիքի էպիթելային բջիջներից: Ինչպես ցույց է տրված նկար 8A-ում, համապատասխանաբար 2 մՄ քացախաթթվով, պրոպիոնաթթվով և յուղաթթվով բուժված մկների առաջնային հաստ աղիքի էպիթելային բջիջները զգալիորեն խթանել են GLP-1-ի արտազատումը, ինչը համապատասխանում է նախորդ ուսումնասիրություններին:29,30 Նմանապես, բոլոր F-Con, F-DSS և F-BLG (համարժեք է 0.25 գ կղանքի) մեծապես խթանել են GLP-1-ի արտազատումը մկների առաջնային հաստ աղիքի էպիթելային բջիջներից: Հատկանշական է, որ F-DSS-ով բուժված մկների առաջնային հաստ աղիքի էպիթելային բջիջների կողմից արտազատված GLP-1-ի քանակը շատ ավելի ցածր էր, քան F-Con և F-BLG-ով մշակված մկան հաստ աղիքի էպիթելային առաջնային բջիջներ (Նկար 8Բ): Այս տվյալները ենթադրում են, որ BLG բուժումը զգալիորեն վերականգնել է աղիքային SCFA-ից ստացված GLP-1 արտադրությունը:
Նկար 8. BLG-ից ստացված SCFA-ն խթանում է GLP-1-ի արտազատումը մկների հաստ աղիքի էպիթելային առաջնային բջիջներից։ (A) Քացախաթթուն, պրոպիոնաթթուն և յուղաթթուն խթանել են GLP-1-ի արտազատումը մկների հաստ աղիքի էպիթելային առաջնային բջիջներից։ (B) F-Con, F-DSS և F-BLG կղանքի քաղվածքները խթանել են մկների հաստ աղիքի էպիթելային առաջնային բջիջները։ Արտազատված GLP-1-ի քանակը։ Հաստ աղիքի էպիթելային բջիջների ալիքվոտները տեղադրվել են ապակե հատակով Պետրիի ամանների մեջ և մշակվել են համապատասխանաբար 2 մՄ քացախաթթվով, պրոպիոնաթթվով, յուղաթթվով և F-Con, F-DSS և F-BLG կղանքի քաղվածքներով (համարժեք է 0.25 գ կղանքի)։ 2 ժամ 37°C ջերմաստիճանում, համապատասխանաբար 5% CO2: Մկների հաստ աղիքի առաջնային էպիթելային բջիջներից արտազատված GLP-1-ի քանակը հայտնաբերվել է ELISA մեթոդով: Տվյալները ներկայացված են որպես միջին ± SEM (n = 3):#p < 0.05 կամ ##p < 0.01՝ համեմատած դատարկ կամ F-Con նմուշի հետ; *p ​​< 0.05՝ համեմատած F-DSS-ի հետ:
Կրճատումներ՝ Ace՝ քացախաթթու; Pro՝ պրոպիոնաթթու; սակայն՝ կարագաթթու; F-Con՝ վերահսկիչ մկների կղանքի քաղվածք; F-DSS՝ կոլիտով մկների կղանքի քաղվածք; F-BLG՝ BLG-ով բուժված հաստ աղիքից։ Բորբոքային մկների կղանքի քաղվածքներ։
Առողջապահության համաշխարհային կազմակերպության կողմից որպես դժվար բուժվող հիվանդություն դասակարգված՝ խոցային կոլիտով համախտանիշը դառնում է համաշխարհային վտանգ։ սակայն հիվանդության կանխատեսման, կանխարգելման և բուժման արդյունավետ մեթոդները դեռևս սահմանափակ են։ Հետևաբար, անհրաժեշտ է ուսումնասիրել և մշակել խոցային կոլիտի (ՈւԿ) նոր, անվտանգ և արդյունավետ թերապևտիկ ռազմավարություններ։ Չինական ավանդական բժշկության պատրաստուկները խոստումնալից տարբերակ են, քանի որ դարերի ընթացքում չինական ավանդական բժշկության շատ պատրաստուկներ արդյունավետ են եղել չինացի բնակչության մոտ ՈւԿ-ի բուժման համար, և դրանք բոլորը կենսաբանական օրգանական նյութեր և բնական նյութեր են, որոնք հիմնականում անվնաս են մարդկանց և կենդանիների համար։31,32 Այս ուսումնասիրության նպատակն էր գտնել ՈւԿ-ի բուժման համար անվտանգ և արդյունավետ ավանդական չինական բժշկության պատրաստուկ և ուսումնասիրել դրա գործողության մեխանիզմը։ BLG-ն հայտնի չինական բուսական բանաձև է, որն օգտագործվում է գրիպի բուժման համար։8,33 Մեր և այլ լաբորատորիաներում աշխատանքը ցույց է տվել, որ ինդիգոն՝ BLG-ի նույն հումքից ստացված մշակված ավանդական չինական բժշկության արտադրանք, զգալի արդյունավետություն է ցուցաբերում մարդկանց և կենդանիների մոտ ՈւԿ-ի բուժման գործում։4,34 Այնուամենայնիվ, BLG-ի հակակոլիտային ազդեցությունը և դրա մեխանիզմը պարզ չեն։ Ներկայիս ուսումնասիրության մեջ մեր արդյունքները ցույց են տալիս, որ BLG-ն արդյունավետորեն մեղմացնում է DSS-ի առաջացրած հաստ աղիքի բորբոքումը, որը կապված է աղիքային միկրոբիոտայի մոդուլյացիայի հետ։ և աղիքային GLP-1 արտադրության վերականգնում։
Հայտնի է, որ խոցային կոլիտը բնութագրվում է կրկնվող շրջաններով՝ բնորոշ կլինիկական առանձնահատկություններով, ինչպիսիք են քաշի կորուստը, լուծը, ուղիղ աղիքի արյունահոսությունը և հաստ աղիքի լորձաթաղանթի լայնածավալ վնասումը:35 Այսպիսով, քրոնիկ կրկնվող կոլիտի դեպքում կիրառվել է 1.8% DSS-ի երեք ցիկլ՝ հինգ օրվա ընթացքում, որին հաջորդել է յոթօրյա խմելու ջուր: Ինչպես ցույց է տրված նկար 1B-ում, քաշի կորստի և DAI միավորների տատանումները ցույց են տվել քրոնիկ կրկնվող կոլիտի հաջող ինդուկցիա: BLG-ով բուժված խմբի մկները ցույց են տվել 8-րդ օրվանից սկսած վերականգնում, որը զգալիորեն տարբերվում էր 24-րդ օրվանից: Նույն փոփոխությունները նկատվել են նաև DAI միավորում, ինչը ենթադրում է կոլիտի կլինիկական բարելավման բարելավում: Հաստ աղիքի վնասվածքի և բորբոքային վիճակի առումով, հաստ աղիքի երկարությունը, հաստ աղիքի հյուսվածքի վնասումը, ինչպես նաև TNF-α, IL-1β և IL-6 պրոբորբոքային ցիտոկինների գեների արտահայտությունը և արտադրությունը հաստ աղիքի հյուսվածքում նույնպես զգալիորեն բարելավվել են BLG բուժումից հետո: Ընդհանուր առմամբ, այս արդյունքները հստակ ցույց են տալիս, որ BLG-ն արդյունավետ է մկների մոտ քրոնիկ կրկնվող կոլիտի բուժման գործում:
Ինչպե՞ս է BLG-ն ցուցաբերում իր դեղաբանական ազդեցությունը։ Նախկինում բազմաթիվ ուսումնասիրություններ ցույց են տվել, որ աղիքային միկրոբիոտան կարևոր դեր է խաղում աղիքային խոցերի ախտածագման մեջ, և միկրոբիոմի վրա հիմնված և միկրոբիոմին ուղղված թերապիաները դարձել են աղիքային խոցերի բուժման շատ գրավիչ ռազմավարություն։ Այս ուսումնասիրության մեջ մենք ցույց տվեցինք, որ BLG բուժումը հանգեցրել է աղիքային միկրոբիոտայի կազմի զգալի փոփոխությունների, ինչը ենթադրում է, որ BLG-ի պաշտպանիչ ազդեցությունը DSS-ի առաջացրած կոլիտի դեմ կապված է աղիքային միկրոբիոտայի մոդուլյացիայի հետ։ Այս դիտարկումը համահունչ է այն գաղափարին, որ աղիքային միկրոբիոտայի հոմեոստազի վերածրագրավորումը կարևոր մոտեցում է ավանդական քիմիկատների պատրաստուկների արդյունավետությունը հասկանալու համար։36,37 Հատկանշական է, որ Akkermansia-ն գրամ-բացասական և խիստ անաէրոբ մանրէ է, որը բնակվում է աղիքային լորձային շերտում, որը քայքայում է մուցինները, արտադրում պրոպիոնաթթու, խթանում է գավաթային բջիջների դիֆերենցիացիան և պահպանում է լորձաթաղանթի պատնեշի ամբողջականության գործառույթը։26 Բազմաթիվ կլինիկական և կենդանիների տվյալներ ենթադրում են, որ Akkermansia-ն խիստ կապված է առողջ լորձաթաղանթի,38 և Akkermansia spp.-ի բանավոր ընդունման հետ։ կարող է զգալիորեն բարելավել լորձաթաղանթի բորբոքումը։39 Մեր ներկայիս տվյալները ցույց են տալիս, որ Akkermansia-ի հարաբերական առատությունը զգալիորեն մեծանում է BLG բուժումից հետո։ Բացի այդ, Prevotellaceae_UCG-001-ը SCFA արտադրող մանրէ է։27 Բազմաթիվ ուսումնասիրություններ ցույց են տվել, որ Prevotellaceae_UCG-001-ը հայտնաբերվել է կոլիտով կենդանիների կղանքում ցածր հարաբերական առատությամբ։40,41 Մեր ներկայիս տվյալները նաև ցույց են տալիս, որ BLG բուժումը կարող է զգալիորեն մեծացնել Prevotellaceae_UCG-001-ի հարաբերական առատությունը DSS-ով բուժված մկների հաստ աղիքում։ Ի տարբերություն դրա, Oscillibacter-ը մեզոֆիլային, խիստ անաէրոբ մանրէ է։42 հաղորդվել է, որ Oscillibacter-ի հարաբերական առատությունը զգալիորեն մեծացել է UC մկների մոտ և զգալիորեն դրականորեն կապված է եղել IL-6 և IL-1β մակարդակների և պաթոլոգիական միավորների հետ։43,44 Հատկանշական է, որ BLG բուժումը զգալիորեն նվազեցրել է Oscillibacter-ի հարաբերական առատությունը DSS-ով բուժված մկների կղանքում։ Հատկանշական է, որ այս BLG-փոփոխված մանրէները ամենաշատ SCFA արտադրող մանրէներն էին։ Նախորդ բազմաթիվ ուսումնասիրություններ ցույց են տվել դրա պոտենցիալ օգտակար ազդեցությունները։ SCFA-ները հաստ աղիքի բորբոքման և աղիքային էպիթելի ամբողջականության պաշտպանության վրա։45,46 Մեր ներկայիս տվյալները նաև ցույց են տվել, որ SCFA ացետատի, պրոպիոնատի և բուտիրատի կոնցենտրացիաները DSS-ով բուժված կղանքում զգալիորեն բարձրացել են BLG-ով բուժված մկների մոտ։ Ամփոփելով՝ այս արդյունքները հստակ ցույց են տալիս, որ BLG բուժումը կարող է արդյունավետորեն ուժեղացնել DSS-ի առաջացրած SCFA արտադրող բակտերիաները քրոնիկ կրկնվող կոլիտով մկների մոտ։
GLP-1-ը ինկրետին է, որը հիմնականում արտադրվում է իլեումում և հաստ աղիքում և կարևոր դեր է խաղում ստամոքսի դատարկման հետաձգման և ուտելուց հետո արյան մեջ գլյուկոզի մակարդակի իջեցման գործում։47 Ապացույցները ցույց են տալիս, որ դիպեպտիդիլ պեպտիդազ (DPP)-4-ը, որը GLP-1 ընկալիչի ագոնիստ է և GLP-1 նանոբժշկական միջոց, կարող են արդյունավետորեն մեղմել աղիքային բորբոքումը մկների մոտ։48-51 Ինչպես նշվել է նախորդ ուսումնասիրություններում, SCFA-ների բարձր կոնցենտրացիաները կապված էին պլազմայում GLP-1 մակարդակի հետ մարդկանց և մկների մոտ։52 Մեր ներկայիս տվյալները ցույց են տալիս, որ BLG բուժումից հետո շիճուկային GLP-1 մակարդակը և Gcg mRNA-ի արտահայտությունը զգալիորեն աճել են։ Նմանապես, GLP-1 սեկրեցիան զգալիորեն աճել է հաստ աղիքի կուլտուրաներում BLG-ով բուժված կոլիտով մկների կղանքի քաղվածքներով խթանումից հետո՝ համեմատած DSS-ով բուժված կոլիտով մկների կղանքի քաղվածքներով խթանման հետ։ Ինչպե՞ս են SCFA-ները ազդում GLP-1-ի արտազատման վրա։ Գվեն Թոլհերստ և այլք։ Հաղորդվել է, որ SCFA-ն կարող է խթանել GLP-1-ի սեկրեցիան GRP43-ի և GPR41-ի միջոցով։29 Մեր ներկայիս տվյալները նաև ցույց են տալիս, որ BLG բուժումը զգալիորեն մեծացնում է GRP43-ի և GPR41-ի mRNA արտահայտությունը DSS-ով բուժված մկների հաստ աղիքում։ Այս տվյալները ենթադրում են, որ BLG բուժումը կարող է վերականգնել SCFA-ի կողմից խթանված GLP-1 արտադրությունը՝ ակտիվացնելով GRP43-ը և GPR41-ը։
Չինաստանում BLG-ն երկարատև, առանց դեղատոմսի (OTC) վաճառվող դեղամիջոց է: Կունմին մկների մոտ BLG-ի առավելագույն հանդուրժելի դոզան 80 գ/կգ է, և սուր թունավորություն չի նկատվել:53 Ներկայումս մարդկանց մոտ BLG-ի (առանց շաքարի) խորհուրդ տրվող դոզան 9-15 գ/օր է (օրական 3 անգամ): Մեր ուսումնասիրությունը ցույց տվեց, որ BLG-ն 1 գ/կգ չափաբաժնով մեղմացրել է DSS-ի առաջացրած քրոնիկ կրկնվող կոլիտը մկների մոտ: Այս չափաբաժինը մոտ է կլինիկորեն օգտագործվող BLG չափաբաժնին: Մեր ուսումնասիրությունը նաև պարզել է, որ դրա գործողության մեխանիզմը, գոնե մասամբ, միջնորդվում է աղիքային միկրոբիոտայի փոփոխություններով, մասնավորապես՝ SCFA արտադրող բակտերիաներով, ինչպիսիք են Akkermansia-ն և Prevotellaceae_UCG-001-ը, որոնք վերականգնում են աղիքային GLP-1 արտադրությունը: Այս արդյունքները ենթադրում են, որ BLG-ն արժանի է հետագա քննարկման որպես կլինիկական կոլիտի բուժման պոտենցիալ թերապևտիկ միջոց: Այնուամենայնիվ, այն ճշգրիտ մեխանիզմը, որով այն մոդուլացնում է աղիքային միկրոբիոտան, դեռևս պետք է հաստատվի միկրոբիոտայի պակաս ունեցող մկների և կղանքի մանրէների փոխպատվաստման միջոցով:
Ace, քացախաթթու; բուտ, բուտիրաթթու; BLG, պանդան; DSS, դեքստրան նատրիումի սուլֆատ; DAI, հիվանդության ակտիվության ինդեքս; DPP, դիպեպտիդիլ պեպտիդազ; FID, բոցի իոնացման դետեկտոր; F-Con, վերահսկիչ։ Մկների կղանքի քաղվածքներ; F-DSS, DSS կոլիտով մկների կղանքի քաղվածքներ; F-BLG, BLG-ով բուժված կոլիտով մկների կղանքի քաղվածքներ; GLP-1, գլյուկագոնանման պեպտիդ-1; Gcg, գլյուկագոն; գազային քրոմատոգրաֆիա, գազային քրոմատոգրաֆիա; GRP43, G սպիտակուցին միացված ընկալիչ 43; GRP41, G սպիտակուցին միացված ընկալիչ 41; H&E, հեմատոքսիլին-էոզին; HBSS, Հենքսի հավասարակշռված աղի լուծույթ; OTC, OTC; PCA, գլխավոր բաղադրիչների վերլուծություն; PCoA, գլխավոր կոորդինատների վերլուծություն; Pro, պրոպիոնաթթու; SASP, սուլֆասալազին; SCFA, կարճ շղթայով ճարպաթթուներ; չինական բժշկություն, ավանդական չինական բժշկություն; UC, խոցային կոլիտ:
Բոլոր փորձարարական արձանագրությունները հաստատվել են Պեկինի համալսարանի Շենժեն-Հոնկոնգի գիտության և տեխնոլոգիայի համալսարանի բժշկական կենտրոնի (Շենժեն, Չինաստան) կենդանիների էթիկայի կոմիտեի կողմից՝ համաձայն ինստիտուցիոնալ ուղեցույցների և կենդանիների կանոնակարգերի (էթիկայի համար՝ A2020157):
Բոլոր հեղինակները նշանակալի ներդրում են ունեցել մտահղացման և նախագծման, տվյալների ձեռքբերման կամ տվյալների վերլուծության և մեկնաբանման գործում, մասնակցել են հոդվածի նախագծի մշակմանը կամ կարևոր մտավոր բովանդակության քննադատական ​​վերանայմանը, համաձայնել են ձեռագիրը ներկայացնել ներկայիս ամսագրին, վերջնականապես հաստատել են տարբերակը հրապարակման համար, պատասխանատու են եղել աշխատանքի բոլոր ասպեկտների համար։
Այս աշխատանքը ֆինանսավորվել է Չինաստանի Բնական Գիտությունների Ազգային Հիմնադրամի (81560676 և 81660479), Շենժենի համալսարանի առաջին կարգի նախագծի (86000000210), Շենժենի Գիտության և Տեխնոլոգիայի Նորարարության Կոմիտեի Հիմնադրամի (JCYJ20210324093810026) և Գուանդուն նահանգի Բժշկական Գիտության և Տեխնոլոգիայի Հետազոտությունների Հիմնադրամի (A2020157 և A2020272) կողմից, Գուիզժոուի Բժշկական Համալսարանի Դեղատան կողմից, որը ֆինանսավորվել է Key Laboratory-ի կողմից (YWZJ2020-01) և Պեկինի Համալսարանի Շենժենի Հիվանդանոցի (JCYJ2018009) կողմից։
1. Թանգ Բ, Չժու Ջ, Չժան Բ և այլք։ Տրիպտոլիդի թերապևտիկ ներուժը որպես հակաբորբոքային միջոց մկների մոտ դեքստրան նատրիումի սուլֆատով առաջացած փորձարարական կոլիտի դեպքում։ pre-immune.2020;11:592084.doi: 10.3389/fimmu.2020.592084
2. Կապլան Գ.Գ.։ IBD-ի գլոբալ բեռը. 2015-ից մինչև 2025 թվականը։ Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 2015;12:720–727. doi: 10.1038/nrgastro.2015.150
3. Պենգ Ջ., Չժենգ Տ.Տ., Լի Շյուե և այլք։ Բույսերից ստացված ալկալոիդներ. խոստումնալից հիվանդության մոդիֆիկատորներ բորբոքային աղիքային հիվանդության դեպքում։ Նախաֆարմակոլոգիա։ 2019;10:351.doi:10.3389/fphar.2019.00351
4. Սյաո Հայտենգ, Պենգ Ջիե, Վեն Բ և այլք: Indigo Naturalis-ը արգելակում է հաստ աղիքի օքսիդատիվ սթրեսը և Th1/Th17 արձագանքները մկների մոտ DSS-ի առաջացրած կոլիտի դեպքում: Oxid Med Cell Longev.2019;2019:9480945.doi: 10.1155/2019/9480945
5. Չեն Մ., Դինգ Յ., Տոնգ Զ. Սոֆորա ֆլավեսցենսի (Sophora flavescens) չինական բուսական դեղամիջոցի արդյունավետությունն ու անվտանգությունը խոցային կոլիտի բուժման մեջ. կլինիկական ապացույցներ և հնարավոր մեխանիզմներ: Նախածննդաբանություն.2020;11:603476.doi:10.3389/fphar.2020.603476
6. Ցաո Ֆան, Լյու Ջիե, Շա Բենսինգ, Պան Հ.Ֆ. Բնական արտադրանքներ. փորձարարականորեն արդյունավետ դեղամիջոցներ բորբոքային աղիքային հիվանդության բուժման համար: Curr Pharmaceuticals.2019;25:4893–4913.doi: 10.2174/1381612825666191216154224
7. Չժան Չ, Ջիանգ Մ, Լու Ա. Մտորումներ խոցային կոլիտի ավանդական չինական բժշկությամբ օժանդակ բուժման վերաբերյալ: Clinical Rev Allergy Immunization.2013;44:274–283.doi: 10.1007/s12016-012-8328-9
8. Լի Չժոնգտենգ, Լի Լի, Չեն ՏՏ և այլք։ Banlangen գրանուլների արդյունավետությունն ու անվտանգությունը սեզոնային գրիպի բուժման մեջ. պատահականացված վերահսկվող փորձարկման ուսումնասիրության արձանագրություն։ trial.2015;16:126.doi: 10.1186/s13063-015-0645-x