Շնորհակալություն nature.com կայք այցելելու համար: Ձեր օգտագործած դիտարկիչի տարբերակն ունի CSS-ի սահմանափակ աջակցություն: Լավագույն փորձի համար խորհուրդ ենք տալիս օգտագործել դիտարկիչի վերջին տարբերակը (կամ անջատել համատեղելիության ռեժիմը Internet Explorer-ում): Բացի այդ, շարունակական աջակցությունն ապահովելու համար այս կայքը չի ներառի ոճեր կամ JavaScript:
Ջրածնի սուլֆիդը (H2S) ունի բազմաթիվ ֆիզիոլոգիական և պաթոլոգիական ազդեցություններ մարդու մարմնի վրա: Նատրիումի հիդրոսուլֆիդը (NaHS) լայնորեն օգտագործվում է որպես դեղաբանական գործիք՝ կենսաբանական փորձերում H2S-ի ազդեցությունը գնահատելու համար: Չնայած NaHS լուծույթներից H2S-ի կորուստը տևում է ընդամենը մի քանի րոպե, NaHS լուծույթները որոշ կենդանիների վրա կատարված ուսումնասիրություններում օգտագործվել են որպես խմելու ջրի մեջ H2S-ի դոնոր միացություններ: Այս ուսումնասիրությունը ուսումնասիրել է, թե արդյոք առնետի/մկան շշերում պատրաստված 30 մկՄ NaHS կոնցենտրացիայով խմելու ջուրը կարող է կայուն մնալ առնվազն 12-24 ժամ, ինչպես ենթադրում են որոշ հեղինակներ: Պատրաստեք NaHS (30 մկՄ) լուծույթ խմելու ջրի մեջ և անմիջապես լցրեք այն առնետի/մկան ջրային շշերի մեջ: Նմուշները հավաքվել են ջրային շշի ծայրից և ներսից 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12 և 24 ժամվա ընթացքում՝ սուլֆիդի պարունակությունը մեթիլեն կապույտի մեթոդով չափելու համար: Բացի այդ, արու և էգ առնետներին երկու շաբաթվա ընթացքում ներարկվել է NaHS (30 մկՄ), և առաջին շաբաթվա ընթացքում և երկրորդ շաբաթվա վերջում շիճուկային սուլֆիդի կոնցենտրացիաները չափվել են օրը մեջ։ Ջրի շշի ծայրից ստացված նմուշում NaHS լուծույթը անկայուն էր. այն նվազել է համապատասխանաբար 72%-ով և 75%-ով 12 և 24 ժամ հետո։ Ջրի շշերի ներսից ստացված նմուշներում NaHS-ի նվազումը նշանակալի չէր 2 ժամվա ընթացքում. սակայն այն նվազել է համապատասխանաբար 47%-ով և 72%-ով 12 և 24 ժամ հետո։ NaHS ներարկումը չի ազդել արու և էգ առնետների շիճուկային սուլֆիդի մակարդակի վրա։ Եզրակացնելով՝ խմելու ջրից պատրաստված NaHS լուծույթները չպետք է օգտագործվեն H2S-ի դոնորության համար, քանի որ լուծույթը անկայուն է։ Այս ներարկման ուղին կենդանիներին կենթարկի NaHS-ի անկանոն և սպասվածից փոքր քանակությունների ազդեցության։
Ջրածնի սուլֆիդը (H2S) որպես տոքսին օգտագործվել է 1700 թվականից ի վեր, սակայն դրա հնարավոր դերը որպես էնդոգեն կենսաազդանշանային մոլեկուլ նկարագրվել է Աբեի և Կիմուրայի կողմից 1996 թվականին: Վերջին երեք տասնամյակների ընթացքում պարզաբանվել են H2S-ի բազմաթիվ գործառույթները մարդու տարբեր համակարգերում, ինչը հանգեցրել է այն գիտակցմանը, որ H2S դոնոր մոլեկուլները կարող են կլինիկական կիրառություններ ունենալ որոշակի հիվանդությունների բուժման կամ կառավարման մեջ. տե՛ս Չիրինո և այլք՝ վերջին ակնարկի համար:
Նատրիումի հիդրոսուլֆիդը (NaHS) լայնորեն օգտագործվել է որպես դեղաբանական գործիք՝ H2S-ի ազդեցությունը գնահատելու համար բազմաթիվ բջջային կուլտուրաներում և կենդանիների վրա կատարված ուսումնասիրություններում5,6,7,8: Այնուամենայնիվ, NaHS-ը իդեալական H2S դոնոր չէ, քանի որ լուծույթում այն ​​արագորեն վերածվում է H2S/HS-ի, հեշտությամբ աղտոտվում է պոլիսուլֆիդներով և հեշտությամբ օքսիդանում ու գոլորշիանում4,9: Շատ կենսաբանական փորձերում NaHS-ը լուծվում է ջրի մեջ, ինչը հանգեցնում է H2S10,11,12-ի պասիվ գոլորշիացման և կորստի, H2S11,12,13-ի ինքնաբուխ օքսիդացման և ֆոտոլիզի14: Սկզբնական լուծույթում սուլֆիդը շատ արագ կորչում է H2S11-ի գոլորշիացման պատճառով: Բաց տարայի մեջ H2S-ի կիսատրոհման պարբերությունը (t1/2) մոտ 5 րոպե է, և դրա կոնցենտրացիան նվազում է մոտ 13%-ով րոպեում10: Չնայած NaHS լուծույթներից ջրածնի սուլֆիդի կորուստը տևում է ընդամենը մի քանի րոպե, որոշ կենդանիների վրա կատարված ուսումնասիրություններում NaHS լուծույթներն օգտագործվել են որպես խմելու ջրում ջրածնի սուլֆիդի աղբյուր 1-21 շաբաթվա ընթացքում՝ փոխարինելով NaHS պարունակող լուծույթը յուրաքանչյուր 12-24 ժամը մեկ։15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26 Այս պրակտիկան չի համապատասխանում գիտական ​​հետազոտությունների սկզբունքներին, քանի որ դեղերի դեղաչափերը պետք է հիմնված լինեն դրանց այլ տեսակների, մասնավորապես մարդկանց մոտ օգտագործման վրա։27
Կենսաբժշկության նախակլինիկական հետազոտությունները նպատակ ունեն բարելավել հիվանդների խնամքի կամ բուժման արդյունքների որակը: Այնուամենայնիվ, կենդանիների վրա կատարված ուսումնասիրությունների մեծ մասի արդյունքները դեռևս չեն թարգմանվել մարդկանց վրա28,29,30: Այս թարգմանչական ձախողման պատճառներից մեկը կենդանիների վրա կատարված ուսումնասիրությունների մեթոդաբանական որակին ուշադրության պակասն է30: Հետևաբար, այս ուսումնասիրության նպատակն էր ուսումնասիրել, թե արդյոք առնետի/մկան ջրով շշերի մեջ պատրաստված 30 μM NaHS լուծույթները կարող են կայուն մնալ խմելու ջրում 12-24 ժամ, ինչպես պնդում կամ առաջարկում են որոշ ուսումնասիրություններ:
Այս ուսումնասիրության բոլոր փորձերը կատարվել են Իրանում լաբորատոր կենդանիների խնամքի և օգտագործման վերաբերյալ հրապարակված ուղեցույցներին համապատասխան31: Այս ուսումնասիրության բոլոր փորձարարական զեկույցները նույնպես հետևել են ARRIVE ուղեցույցներին32: Շահիդ Բեհեշթիի բժշկական գիտությունների համալսարանի էնդոկրին գիտությունների ինստիտուտի էթիկայի կոմիտեն հաստատել է այս ուսումնասիրության բոլոր փորձարարական ընթացակարգերը:
Ցինկի ացետատի դիհիդրատը (CAS: 5970-45-6) և անջուր երկաթի քլորիդը (CAS: 7705-08-0) ձեռք են բերվել Biochem, Chemopahrama (Cosne-sur-Loire, France) ընկերությունից: Նատրիումի հիդրոսուլֆիդի հիդրատը (CAS: 207683-19-0) և N,N-դիմեթիլ-p-ֆենիլենդիամինը (DMPD) (CAS: 535-47-0) ձեռք են բերվել Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA) ընկերությունից: Իզոֆլուրանը ձեռք է բերվել Piramal (Bethlehem, PA, USA) ընկերությունից: Աղաթթուն (HCl) ձեռք է բերվել Merck (Darmstadt, Գերմանիա) ընկերությունից:
Պատրաստեք NaHS-ի (30 մկՄ) լուծույթ խմելու ջրում և անմիջապես լցրեք այն առնետի/մկան ջրով լի շշերի մեջ: Այս կոնցենտրացիան ընտրվել է բազմաթիվ հրապարակումների հիման վրա, որոնցում NaHS-ը օգտագործվում է որպես H2S-ի աղբյուր. տե՛ս «Քննարկում» բաժինը: NaHS-ը հիդրատացված մոլեկուլ է, որը կարող է պարունակել հիդրատացիայի ջրի տարբեր քանակություններ (այսինքն՝ NaHS•xH2O). արտադրողի տվյալներով՝ մեր ուսումնասիրության մեջ օգտագործված NaHS-ի տոկոսը կազմել է 70.7% (այսինքն՝ NaHS•1.3 H2O), և մենք այս արժեքը հաշվի ենք առել մեր հաշվարկներում, որտեղ օգտագործել ենք 56.06 գ/մոլ մոլեկուլային քաշ, որը անջուր NaHS-ի մոլեկուլային քաշն է: Հիդրատացիայի ջուրը (նաև կոչվում է բյուրեղացման ջուր) բյուրեղային կառուցվածքը կազմող ջրի մոլեկուլներն են33: Հիդրատներն ունեն տարբեր ֆիզիկական և թերմոդինամիկ հատկություններ՝ համեմատած անհիդրատների հետ34:
Մինչև խմելու ջրին NaHS ավելացնելը, չափեք լուծիչի pH-ը և ջերմաստիճանը: Անմիջապես լցրեք NaHS լուծույթը կենդանիների վանդակում գտնվող առնետի/մկան ջրամանի մեջ: Սուլֆիդի պարունակությունը չափելու համար նմուշները վերցվել են ծայրից և ջրամանի ներսից 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12 և 24 ժամվա ընթացքում: Սուլֆիդի չափումները կատարվել են անմիջապես յուրաքանչյուր նմուշառումից հետո: Մենք նմուշներ ենք վերցրել խողովակի ծայրից, քանի որ որոշ ուսումնասիրություններ ցույց են տվել, որ ջրամանի փոքր ծակոտիները կարող են նվազագույնի հասցնել H2S գոլորշիացումը15,19: Այս խնդիրը, կարծես, վերաբերում է նաև շշի մեջ գտնվող լուծույթին: Սակայն դա այդպես չէր ջրամանի վզիկի լուծույթի համար, որն ուներ ավելի բարձր գոլորշիացման արագություն և ինքնաօքսիդանում էր. ըստ էության, կենդանիները նախ խմեցին այս ջուրը:
Ուսումնասիրության մեջ օգտագործվել են արու և էգ Wistar առնետներ: Առնետները տեղավորվել են պոլիպրոպիլենային վանդակներում (2-3 առնետ մեկ վանդակում) ստանդարտ պայմաններում (ջերմաստիճան 21-26 °C, խոնավություն 32-40%)՝ 12 ժամ լույսով (7:00-ից մինչև 19:00) և 12 ժամ մթությամբ (7:00-ից մինչև 07:00): Առնետներն ազատորեն օգտվել են ծորակի ջրից և կերակրվել են ստանդարտ կերով (Khorak Dam Pars Company, Թեհրան, Իրան): Տարիքային համապատասխան (6 ամիս) էգ (n=10, մարմնի քաշը՝ 190-230 գ) և արու (n=10, մարմնի քաշը՝ 320-370 գ) Wistar առնետները պատահականորեն բաժանվել են վերահսկիչ և NaHS (30 μM) մշակված խմբերի (n=5 մեկ խմբում): Նմուշի չափը որոշելու համար մենք օգտագործել ենք KISS (Keep It Simple, Stupid) մոտեցումը, որը համատեղում է նախորդ փորձը և հզորության վերլուծությունը35: Սկզբում մենք անցկացրեցինք փորձնական ուսումնասիրություն 3 առնետների վրա և որոշեցինք շիճուկի ընդհանուր սուլֆիդի միջին մակարդակը և ստանդարտ շեղումը (8.1 ± 0.81 μM): Այնուհետև, հաշվի առնելով 80% հզորությունը և ենթադրելով երկկողմանի 5% նշանակալիության մակարդակ, մենք որոշեցինք նախնական նմուշի չափը (n = 5՝ հիմնվելով նախորդ գրականության վրա), որը համապատասխանում էր 2.02 ստանդարտացված էֆեկտի չափին՝ Ֆեստինգի կողմից փորձարարական կենդանիների նմուշի չափը հաշվարկելու համար առաջարկված նախապես սահմանված արժեքով35: Այս արժեքը ստանդարտ շեղումով (2.02 × 0.81) բազմապատկելուց հետո, կանխատեսված հայտնաբերելի էֆեկտի չափը (1.6 μM) կազմեց 20%, ինչը ընդունելի է: Սա նշանակում է, որ n = 5/խումբ բավարար է խմբերի միջև 20% միջին փոփոխություն հայտնաբերելու համար: Առնետները պատահականորեն բաժանվեցին վերահսկիչ և NaSH-ով բուժված խմբերի՝ օգտագործելով Excel ծրագրի 36 պատահական ֆունկցիան (Լրացուցիչ նկ. 1): Կուրացումը կատարվեց արդյունքի մակարդակում, և կենսաքիմիական չափումները կատարող հետազոտողները տեղյակ չէին խմբերի բաշխման մասին:
Երկու սեռերի NaHS խմբերը 2 շաբաթ շարունակ մշակվել են խմելու ջրում պատրաստված 30 μM NaHS լուծույթով։ Թարմ լուծույթը տրամադրվել է յուրաքանչյուր 24 ժամը մեկ, որի ընթացքում չափվել է մարմնի քաշը։ Առաջին և երկրորդ շաբաթների վերջում բոլոր առնետների պոչի ծայրերից արյան նմուշներ են հավաքվել իզոֆլուրանային անզգայացման տակ՝ օրը մեջ։ Արյան նմուշները ցենտրիֆուգացվել են 3000 գ-ով 10 րոպե, շիճուկը առանձնացվել և պահվել է -80°C ջերմաստիճանում՝ շիճուկային միզանյութի, կրեատինինի (Cr) և ընդհանուր սուլֆիդի հետագա չափման համար։ Արյան շիճուկային միզանյութը որոշվել է ֆերմենտատիվ միզանյութի մեթոդով, իսկ շիճուկային կրեատինինը որոշվել է ֆոտոմետրիկ Ջաֆեի մեթոդով՝ օգտագործելով առևտրային առումով մատչելի հավաքածուներ (Man Company, Թեհրան, Իրան) և ավտոմատ վերլուծիչ (Selectra E, սերիական համար 0-2124, Նիդեռլանդներ)։ Միզանյութի և Cr-ի ներքին և միջվերլուծական վարիացիայի գործակիցները կազմել են 2.5%-ից պակաս։
Մեթիլեն կապույտի (ՄԲ) մեթոդը կիրառվում է խմելու ջրում և NaHS պարունակող շիճուկում ընդհանուր սուլֆիդի չափման համար։ ՄԲ-ն ամենատարածված մեթոդն է սուլֆիդի չափման համար մեծ քանակությամբ լուծույթներում և կենսաբանական նմուշներում11,37: ՄԲ մեթոդը կարող է օգտագործվել ընդհանուր սուլֆիդային պաշարը գնահատելու38 և անօրգանական սուլֆիդները H2S, HS- և S2 տեսքով չափելու համար ջրային փուլում39: Այս մեթոդում ծծումբը նստեցվում է որպես ցինկի սուլֆիդ (ZnS) ցինկի ացետատի առկայությամբ11,38: Ցինկի ացետատի նստեցումը ամենատարածված մեթոդն է սուլֆիդները այլ քրոմոֆորներից բաժանելու համար11: ZnS-ը վերլուծվել է HCl11-ի միջոցով ուժեղ թթվային պայմաններում: Սուլֆիդը ռեակցիայի մեջ է մտնում DMPD-ի հետ 1:2 ստոիքիոմետրիկ հարաբերակցությամբ՝ երկաթի քլորիդով կատալիզացված ռեակցիայի ժամանակ (Fe3+-ը հանդես է գալիս որպես օքսիդացնող նյութ)՝ առաջացնելով ներկանյութ ՄԲ, որը հայտնաբերվում է սպեկտրոֆոտոմետրիկորեն 670 նմ-ում40,41: ՄԲ մեթոդի հայտնաբերման սահմանը մոտավորապես 1 μM11 է:
Այս ուսումնասիրության մեջ յուրաքանչյուր նմուշից (լուծույթ կամ շիճուկ) 100 մկլ ավելացվել է խողովակի մեջ, այնուհետև ավելացվել են 200 մկլ ցինկի ացետատ (1% w/v թորած ջրում), 100 մկլ DMPD (20 մՄ 7.2 Մ HCl-ում) և 133 մկլ FeCl3 (30 մՄ 1.2 Մ HCl-ում): Խառնուրդը ինկուբացվել է 37°C ջերմաստիճանում մթության մեջ 30 րոպե: Լուծույթը ցենտրիֆուգացվել է 10,000 գ-ով 10 րոպե, և վերին շերտի կլանումը կարդացվել է 670 նմ-ում՝ օգտագործելով միկրոպլանշետի ընթերցիչ (BioTek, MQX2000R2, Winooski, VT, ԱՄՆ): Սուլֆիդների կոնցենտրացիաները որոշվել են NaHS (0–100 մԿ) տրամաչափման կորի միջոցով ddH2O-ում (Լրացուցիչ նկ. 2): Չափումների համար օգտագործված բոլոր լուծույթները թարմ պատրաստված են եղել: Սուլֆիդի չափումների ներքին և միջվերլուծական վարիացիայի գործակիցները համապատասխանաբար կազմել են 2.8% և 3.4%: Մենք նաև որոշել ենք նատրիումի թիոսուլֆատ պարունակող խմելու ջրից և շիճուկի նմուշներից վերականգնված ընդհանուր սուլֆիդը՝ օգտագործելով հարստացված նմուշի մեթոդը42: Նատրիումի թիոսուլֆատ պարունակող խմելու ջրի և շիճուկի նմուշների վերականգնումները համապատասխանաբար կազմել են 91 ± 1.1% (n = 6) և 93 ± 2.4% (n = 6):
Վիճակագրական վերլուծությունը կատարվել է GraphPad Prism ծրագրային ապահովման 8.0.2 տարբերակի միջոցով Windows-ի համար (GraphPad Software, Սան Դիեգո, Կալիֆոռնիա, ԱՄՆ, www.graphpad.com): Խմելու ջրի ջերմաստիճանը և pH-ը NaHS-ի ավելացումից առաջ և հետո համեմատելու համար օգտագործվել է զույգ t-թեստ: NaHS պարունակող լուծույթում H2S-ի կորուստը հաշվարկվել է որպես բազային կլանման համեմատ տոկոսային նվազում, և գնահատելու համար, թե արդյոք կորուստը վիճակագրորեն նշանակալի էր, մենք իրականացրել ենք միակողմանի կրկնվող չափումների ANOVA, որին հաջորդել է Դաննեթի բազմակի համեմատական ​​թեստը: Մարմնի քաշը, շիճուկային միզանյութը, շիճուկային կրեատինինը և շիճուկային ընդհանուր սուլֆիդը ժամանակի ընթացքում համեմատվել են տարբեր սեռերի վերահսկիչ և NaHS-ով բուժված առնետների միջև՝ օգտագործելով երկկողմանի խառը (միջանկյալ-ներսի) ANOVA, որին հաջորդել է Բոնֆերոնիի հետհոկ թեստը: Երկկողմանի P արժեքները < 0.05 համարվել են վիճակագրորեն նշանակալի:
Խմելու ջրի pH-ը NaHS-ի ավելացումից առաջ կազմել է 7.60 ± 0.01 և NaHS-ի ավելացումից հետո՝ 7.71 ± 0.03 (n = 13, p = 0.0029): Խմելու ջրի ջերմաստիճանը կազմել է 26.5 ± 0.2 և NaHS-ի ավելացումից հետո նվազել է մինչև 26.2 ± 0.2 (n = 13, p = 0.0128): Պատրաստեք 30 μM NaHS լուծույթ խմելու ջրում և պահեք այն ջրային շշի մեջ: NaHS լուծույթը անկայուն է, և դրա կոնցենտրացիան ժամանակի ընթացքում նվազում է: Ջրային շշի վզիկից նմուշառելիս առաջին ժամվա ընթացքում նկատվել է զգալի նվազում (68.0%), և լուծույթում NaHS-ի պարունակությունը նվազել է համապատասխանաբար 72%-ով և 75%-ով 12 և 24 ժամ անց: Ջրային շշերից ստացված նմուշներում NaHS-ի նվազումը նշանակալի չի եղել մինչև 2 ժամ, բայց 12 և 24 ժամ անց այն նվազել է համապատասխանաբար 47%-ով և 72%-ով: Այս տվյալները ցույց են տալիս, որ խմելու ջրում պատրաստված 30 μM լուծույթում NaHS-ի տոկոսը 24 ժամ անց նվազել է մինչև սկզբնական արժեքի մոտավորապես մեկ քառորդը, անկախ նմուշառման վայրից (Նկար 1):
NaHS լուծույթի (30 մկՄ) կայունությունը խմելու ջրում՝ առնետի/մկան շշերի մեջ։ Լուծույթի պատրաստումից հետո նմուշներ են վերցվել ջրային շշի ծայրից և ներսից։ Տվյալները ներկայացված են որպես միջին ± ստանդարտ շեղում (n = 6/խումբ)։ * և #, P < 0.05՝ համեմատած 0 ժամանակի հետ։ Ջրային շշի լուսանկարում երևում են ծայրը (բացվածքով) և շշի կորպուսը։ Ծայրի ծավալը մոտավորապես 740 մկլ է։
Թարմ պատրաստված 30 մկՄ լուծույթում NaHS-ի կոնցենտրացիան կազմել է 30.3 ± 0.4 մկՄ (տատանում՝ 28.7–31.9 մկՄ, n = 12): Այնուամենայնիվ, 24 ժամ անց NaHS-ի կոնցենտրացիան նվազել է մինչև ավելի ցածր արժեք (միջինը՝ 3.0 ± 0.6 մկՄ): Ինչպես ցույց է տրված նկար 2-ում, ուսումնասիրության ընթացքում առնետների կողմից ենթարկված NaHS-ի կոնցենտրացիաները հաստատուն չեն եղել:
Էգ առնետների մարմնի քաշը ժամանակի ընթացքում զգալիորեն աճել է (205.2 ± 5.2 գ-ից մինչև 213.8 ± 7.0 գ վերահսկիչ խմբում և 204.0 ± 8.6 գ-ից մինչև 211.8 ± 7.5 գ NaHS-ով բուժված խմբում). սակայն NaHS-ով բուժումը ազդեցություն չի ունեցել մարմնի քաշի վրա (Նկար 3): Արու առնետների մարմնի քաշը ժամանակի ընթացքում զգալիորեն աճել է (338.6 ± 8.3 գ-ից մինչև 352.4 ± 6.0 գ վերահսկիչ խմբում և 352.4 ± 5.9 գ-ից մինչև 363.2 ± 4.3 գ NaHS-ով բուժված խմբում). սակայն NaHS-ով բուժումը ազդեցություն չի ունեցել մարմնի քաշի վրա (Նկար 3):
Մարմնի քաշի փոփոխությունները էգ և արու առնետների մոտ NaHS (30 μM) կիրառումից հետո: Տվյալները ներկայացված են որպես միջին ± SEM և համեմատվել են Բոնֆերոնիի հետհոկ թեստի միջոցով վարիացիայի երկկողմանի խառը (միջանկյալ) վերլուծության միջոցով: Յուրաքանչյուր խմբում յուրաքանչյուր սեռի n = 5 ներկայացուցիչ:
Հետազոտության ընթացքում շիճուկային միզանյութի և կրեատին ֆոսֆատի կոնցենտրացիաները համեմատելի էին վերահսկիչ և NaSH-ով բուժված առնետների մոտ։ Ավելին, NaSH-ով բուժումը չի ազդել շիճուկային միզանյութի և կրեատինոքրոմի կոնցենտրացիաների վրա (աղյուսակ 1):
Արական (8.1 ± 0.5 μM vs. 9.3 ± 0.2 μM) և իգական (9.1 ± 1.0 μM vs. 6.1 ± 1.1 μM) առնետների շիճուկային ընդհանուր սուլֆիդի բազային կոնցենտրացիաները համեմատելի էին վերահսկիչ խմբի և NaHS-ով բուժված արական (8.1 ± 0.5 μM vs. 9.3 ± 0.2 μM) և իգական (9.1 ± 1.0 μM vs. 6.1 ± 1.1 μM) առնետների մոտ: NaHS-ի 14 օրվա ընդունումը ազդեցություն չի ունեցել ո՛չ արական, ո՛չ էլ իգական առնետների շիճուկային ընդհանուր սուլֆիդի մակարդակի վրա (Նկար 4):
Արու և էգ առնետների շիճուկային ընդհանուր սուլֆիդի կոնցենտրացիաների փոփոխությունները NaHS (30 μM) ներարկումից հետո: Տվյալները ներկայացված են որպես միջին ± SEM և համեմատվել են Բոնֆերոնիի հետհոկ թեստով փոփոխականության երկկողմանի խառը (ներսի-ներսի) վերլուծության միջոցով: Յուրաքանչյուր սեռ, n = 5/խմբ:
Այս ուսումնասիրության հիմնական եզրակացությունն այն է, որ NaHS պարունակող խմելու ջուրը անկայուն է. առնետների/մկների ջրային շշերի ծայրից և ներսից նմուշառումից 24 ժամ անց կարող է հայտնաբերվել սկզբնական ընդհանուր սուլֆիդի պարունակության միայն մոտ մեկ քառորդը: Ավելին, առնետները ենթարկվել են NaHS լուծույթում H2S կորստի պատճառով անկայուն NaHS կոնցենտրացիաների, և NaHS-ի խմելու ջրին ավելացումը չի ազդել մարմնի քաշի, շիճուկային միզանյութի և քրոմի, կամ շիճուկային ընդհանուր սուլֆիդի վրա:
Այս ուսումնասիրության մեջ խմելու ջրում պատրաստված 30 μM NaHS լուծույթներից H2S կորստի արագությունը կազմել է մոտավորապես 3% ժամում: Բուֆերային լուծույթում (100 μM նատրիումի սուլֆիդ 10 մՄ PBS-ում, pH 7.4) սուլֆիդի կոնցենտրացիան, ըստ հաղորդումների, նվազել է 7%-ով՝ 8 ժամվա ընթացքում11: Մենք նախկինում պաշտպանել ենք NaHS-ի ներորովայնային ներարկումը՝ նշելով, որ խմելու ջրում 54 μM NaHS լուծույթից սուլֆիդի կորստի արագությունը կազմել է մոտավորապես 2.3% ժամում (4%/ժամ՝ առաջին 12 ժամվա ընթացքում և 1.4%/ժամ՝ պատրաստումից հետո վերջին 12 ժամվա ընթացքում)8: Ավելի վաղ կատարված ուսումնասիրությունները43 հայտնաբերել են H2S-ի մշտական ​​կորուստ NaHS լուծույթներից, հիմնականում գոլորշիացման և օքսիդացման պատճառով: Նույնիսկ առանց փուչիկների ավելացման, հիմնական լուծույթում սուլֆիդը արագորեն կորչում է H2S գոլորշիացման պատճառով11: Ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ նոսրացման գործընթացում, որը տևում է մոտ 30-60 վայրկյան, H2S-ի մոտ 5-10%-ը կորչում է գոլորշիացման պատճառով6: H2S-ի գոլորշիացումը լուծույթից կանխելու համար հետազոտողները ձեռնարկել են մի շարք միջոցառումներ, այդ թվում՝ լուծույթի մեղմ խառնումը12, հիմնական լուծույթը պլաստիկ թաղանթով ծածկելը6 և լուծույթի օդի հետ շփումը նվազագույնի հասցնելը, քանի որ H2S-ի գոլորշիացման արագությունը կախված է օդ-հեղուկ միջերեսից։13 H2S-ի ինքնաբուխ օքսիդացումը հիմնականում տեղի է ունենում անցումային մետաղների իոնների, մասնավորապես՝ երկաթի, պատճառով, որոնք ջրի մեջ խառնուրդներ են։13 H2S-ի օքսիդացումը հանգեցնում է պոլիսուլֆիդների (կովալենտ կապերով կապված ծծմբի ատոմներ) առաջացմանը11: Դրա օքսիդացումը կանխելու համար H2S պարունակող լուծույթները պատրաստվում են թթվածնազրկված լուծիչներում44,45, ապա մաքրվում են արգոնով կամ ազոտով 20-30 րոպե՝ թթվածնի կորուստն ապահովելու համար։11,12,37,44,45,46 Դիէթիլենտրիամինպենտաքացախաթթուն (DTPA) մետաղական քելատոր է (10-4 Մ), որը կանխում է HS- ինքնաօքսիդացումը աէրոբ լուծույթներում։ DTPA-ի բացակայության դեպքում HS-ի ինքնաօքսիդացման արագությունը կազմում է մոտավորապես 50%՝ մոտավորապես 3 ժամվա ընթացքում 25°C37,47 ջերմաստիճանում: Ավելին, քանի որ 1e-սուլֆիդի օքսիդացումը կատալիզացվում է ուլտրամանուշակագույն լույսով, լուծույթը պետք է պահել սառույցի վրա և պաշտպանել լույսից11:
Ինչպես ցույց է տրված նկար 5-ում, NaHS-ը դիսոցվում է Na+ և HS-6-ի, երբ լուծվում է ջրում։ Այս դիսոցացիան որոշվում է ռեակցիայի pK1-ով, որը կախված է ջերմաստիճանից՝ pK1 = 3.122 + 1132/T, որտեղ T-ն տատանվում է 5-ից մինչև 30°C և չափվում է Կելվին աստիճաններով (K), K = °C + 273.1548։ HS-ն ունի բարձր pK2 (pK2 = 19), ուստի pH < 96.49-ի դեպքում S2-ը չի առաջանում կամ առաջանում է շատ փոքր քանակությամբ։ Ի տարբերություն դրա, HS-ը գործում է որպես հիմք և ընդունում է H+ H2O մոլեկուլից, իսկ H2O-ն գործում է որպես թթու և վերածվում է H2S-ի և OH-ի։
NaHS լուծույթում լուծված H2S գազի առաջացում (30 µM): ջրային լուծույթ, գ՝ գազ, 1 լ՝ հեղուկ: Բոլոր հաշվարկները ենթադրում են, որ ջրի pH = 7.0 և ջրի ջերմաստիճանը = 20 °C: Ստեղծվել է BioRender.com-ի միջոցով:
Չնայած NaHS լուծույթների անկայունության ապացույցներին, կենդանիների վրա կատարված մի շարք ուսումնասիրություններում խմելու ջրում NaHS լուծույթներն օգտագործվել են որպես H2S դոնոր միացություն15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26՝ միջամտության տևողությամբ 1-ից 21 շաբաթ (աղյուսակ 2): Այս ուսումնասիրությունների ընթացքում NaHS լուծույթը թարմացվել է յուրաքանչյուր 12 ժամը, 15, 17, 18, 24, 25 ժամը կամ 24 ժամը, 19, 20, 21, 22, 23 ժամը մեկ: Մեր արդյունքները ցույց տվեցին, որ առնետները ենթարկվել են դեղամիջոցի անկայուն կոնցենտրացիաների՝ NaHS լուծույթից H2S կորստի պատճառով, և առնետների խմելու ջրում NaHS պարունակությունը զգալիորեն տատանվել է 12 կամ 24 ժամվա ընթացքում (տե՛ս նկար 2): Այս ուսումնասիրություններից երկուսը հայտնել են, որ ջրում H2S մակարդակը մնացել է կայուն 24 ժամվա ընթացքում22 կամ որ 12 ժամվա ընթացքում15-ի ընթացքում դիտվել է H2S-ի միայն 2-3% կորուստ, սակայն դրանք չեն տրամադրել հիմնավորող տվյալներ կամ չափման մանրամասներ: Երկու ուսումնասիրություններ ցույց են տվել, որ ջրային շշերի փոքր տրամագիծը կարող է նվազագույնի հասցնել H2S-ի գոլորշիացումը15,19: Այնուամենայնիվ, մեր արդյունքները ցույց են տվել, որ սա կարող է ջրային շշից H2S-ի կորուստը հետաձգել միայն 2 ժամով՝ 12-24 ժամվա փոխարեն: Երկու ուսումնասիրություններն էլ նշում են, որ մենք ենթադրում ենք, որ խմելու ջրում NaHS մակարդակը չի փոխվել, քանի որ մենք ջրի գույնի փոփոխություն չենք նկատել. հետևաբար, H2S-ի օքսիդացումը օդով նշանակալի չէր19,20: Հետաքրքիր է, որ այս սուբյեկտիվ մեթոդը գնահատում է NaHS-ի կայունությունը ջրում, այլ ոչ թե չափում է դրա կոնցենտրացիայի փոփոխությունը ժամանակի ընթացքում:
NaHS լուծույթում H2S-ի կորուստը կապված է pH-ի և ջերմաստիճանի հետ: Ինչպես նշվել է մեր ուսումնասիրության մեջ, NaHS-ի ջրում լուծվելը հանգեցնում է ալկալային լուծույթի առաջացմանը50: Երբ NaHS-ը լուծվում է ջրում, լուծված H2S գազի առաջացումը կախված է pH-ի արժեքից6: Որքան ցածր է լուծույթի pH-ը, այնքան մեծ է NaHS-ի մասնաբաժինը որպես H2S գազային մոլեկուլներ, և այնքան ավելի շատ սուլֆիդ է կորչում ջրային լուծույթից11: Այս ուսումնասիրություններից ոչ մեկը չի ներկայացրել NaHS-ի համար որպես լուծիչ օգտագործվող խմելու ջրի pH-ը: ԱՀԿ-ի առաջարկությունների համաձայն, որոնք ընդունվել են երկրների մեծ մասի կողմից, խմելու ջրի pH-ը պետք է լինի 6.5–8.551 միջակայքում: Այս pH միջակայքում H2S-ի ինքնաբուխ օքսիդացման արագությունը մեծանում է մոտավորապես տասն անգամ13: Այս pH միջակայքում ջրում NaHS-ի լուծվելը կհանգեցնի լուծված H2S գազի կոնցենտրացիայի 1-ից 22.5 μM, ինչը ընդգծում է ջրի pH-ի մոնիթորինգի կարևորությունը NaHS-ը լուծարելուց առաջ: Բացի այդ, վերոնշյալ ուսումնասիրության մեջ նշված ջերմաստիճանային միջակայքը (18–26 °C) կհանգեցնի լուծույթում լուծված H2S գազի կոնցենտրացիայի մոտավորապես 10%-ի փոփոխության, քանի որ ջերմաստիճանի փոփոխությունները փոխում են pK1-ը, և pK1-ի փոքր փոփոխությունները կարող են էական ազդեցություն ունենալ լուծված H2S գազի կոնցենտրացիայի վրա48: Բացի այդ, որոշ ուսումնասիրությունների երկար տևողությունը (5 ամիս)22, որի ընթացքում սպասվում է ջերմաստիճանի մեծ տատանումներ, նույնպես սրում է այս խնդիրը:
Բոլոր ուսումնասիրություններում, բացի մեկից21, օգտագործվել է 30 մկՄ NaHS լուծույթ խմելու ջրում: Օգտագործված դեղաչափը (այսինքն՝ 30 մկՄ) բացատրելու համար որոշ հեղինակներ նշել են, որ NaHS-ը ջրային փուլում առաջացնում է H2S գազի ճիշտ նույն կոնցենտրացիան, և որ H2S-ի ֆիզիոլոգիական միջակայքը 10-ից 100 մկՄ է, ուստի այս դեղաչափը գտնվում է ֆիզիոլոգիական միջակայքում15,16: Մյուսները բացատրեցին, որ 30 մկՄ NaHS-ը կարող է պահպանել պլազմայում H2S մակարդակը ֆիզիոլոգիական միջակայքում, այսինքն՝ 5–300 մկՄ19,20: Մենք դիտարկում ենք NaHS-ի 30 մկՄ կոնցենտրացիան ջրում (pH = 7.0, T = 20 °C), որն օգտագործվել է որոշ ուսումնասիրություններում՝ H2S-ի ազդեցությունն ուսումնասիրելու համար: Մենք կարող ենք հաշվարկել, որ լուծված H2S գազի կոնցենտրացիան կազմում է 14.7 մկՄ, որը կազմում է NaHS-ի սկզբնական կոնցենտրացիայի մոտ 50%-ը: Այս արժեքը նման է այլ հեղինակների կողմից նույն պայմաններում հաշվարկված արժեքին13,48:
Մեր ուսումնասիրության մեջ NaSH-ի կիրառումը չի փոխել մարմնի քաշը։ Այս արդյունքը համապատասխանում է արու մկների22,23 և արու առնետների18 վրա կատարված այլ ուսումնասիրությունների արդյունքներին։ Այնուամենայնիվ, երկու ուսումնասիրություններում նշվել է, որ NaSH-ը վերականգնել է նեֆրէկտոմիզացված առնետների մարմնի քաշի նվազումը24,26, մինչդեռ այլ ուսումնասիրություններում չի նշվել NaSH-ի կիրառման ազդեցությունը մարմնի քաշի վրա15,16,17,19,20,21,25։ Ավելին, մեր ուսումնասիրության մեջ NaSH-ի կիրառումը չի ազդել շիճուկային միզանյութի և կրեատին-քրոմի մակարդակի վրա, ինչը համապատասխանում է մեկ այլ զեկույցի արդյունքներին25։
Ուսումնասիրությունը պարզել է, որ NaHS-ի 2 շաբաթ խմելու ջրին ավելացումը չի ազդել արու և էգ առնետների շիճուկային սուլֆիդի ընդհանուր կոնցենտրացիաների վրա: Այս արդյունքը համապատասխանում է Սենի և այլոց (16) արդյունքներին. խմելու ջրում 30 μM NaHS-ով 8 շաբաթյա բուժումը չի ազդել վերահսկիչ խմբի առնետների պլազմային սուլֆիդի մակարդակի վրա. սակայն նրանք հայտնել են, որ այս միջամտությունը վերականգնել է նեֆրէկտոմիզացված մկների պլազմայում H2S մակարդակի նվազումը: Լի և այլք (22) նաև հայտնել են, որ խմելու ջրում 30 μM NaHS-ով 5 ամիսյա բուժումը տարեց մկների մոտ մոտ 26%-ով մեծացրել է պլազմայում ազատ սուլֆիդի մակարդակը: Այլ ուսումնասիրություններում NaHS-ի խմելու ջրին ավելացումից հետո շրջանառվող սուլֆիդի փոփոխություններ չեն հայտնաբերվել:
Յոթ ուսումնասիրություններում օգտագործվել է Sigma NaHS15,16,19,20,21,22,23, սակայն չեն տրամադրվել լրացուցիչ մանրամասներ հիդրատացիայի ջրի վերաբերյալ, իսկ հինգ ուսումնասիրություններում չի նշվել իրենց պատրաստման մեթոդներում օգտագործված NaHS-ի աղբյուրը17,18,24,25,26: NaHS-ը հիդրատացված մոլեկուլ է, և դրա հիդրատացիայի ջրի պարունակությունը կարող է տարբեր լինել, ինչը ազդում է տրված մոլային զանգվածի լուծույթ պատրաստելու համար անհրաժեշտ NaHS-ի քանակի վրա: Օրինակ, մեր ուսումնասիրության մեջ NaHS-ի պարունակությունը կազմել է NaHS•1.3 H2O: Այսպիսով, այս ուսումնասիրություններում NaHS-ի իրական կոնցենտրացիաները կարող են ավելի ցածր լինել, քան հաղորդվածները:
«Ինչպե՞ս կարող է նման կարճատև միացությունը ունենալ նման երկարատև ազդեցություն»։ Պոզգայը և այլք21 այս հարցը տվել են մկների մոտ NaHS-ի ազդեցությունը կոլիտի վրա գնահատելիս։ Նրանք հույս ունեն, որ ապագա ուսումնասիրությունները կկարողանան պատասխանել այս հարցին և ենթադրում են, որ NaHS լուծույթները կարող են պարունակել ավելի կայուն պոլիսուլֆիդներ՝ բացի H2S-ից և դիսուլֆիդներից, որոնք միջնորդում են NaHS21-ի ազդեցությունը։ Մեկ այլ հնարավորություն է, որ լուծույթում մնացած NaHS-ի շատ ցածր կոնցենտրացիաները նույնպես կարող են դրական ազդեցություն ունենալ։ Փաստորեն, Օլսոնը և այլք ապացույցներ են ներկայացրել, որ արյան մեջ H2S-ի միկրոմոլային մակարդակները ֆիզիոլոգիական չեն և պետք է լինեն նանոմոլային միջակայքում կամ ընդհանրապես բացակայեն13։ H2S-ը կարող է գործել սպիտակուցի սուլֆացիայի միջոցով, որը հետդարձելի հետտրանսլյացիոն փոփոխություն է, որը ազդում է շատ սպիտակուցների ֆունկցիայի, կայունության և տեղայնացման վրա52,53,54։ Փաստորեն, ֆիզիոլոգիական պայմաններում լյարդի շատ սպիտակուցների մոտավորապես 10%-ից 25%-ը սուլֆիլացված է53։ Երկու ուսումնասիրություններն էլ ընդունում են NaHS19-ի արագ քայքայումը,23 բայց զարմանալիորեն նշում են, որ «մենք վերահսկել ենք NaHS-ի կոնցենտրացիան խմելու ջրում՝ այն ամեն օր փոխարինելով»։23 Մի ուսումնասիրություն պատահաբար նշել է, որ «NaHS-ը H2S-ի ստանդարտ դոնոր է և սովորաբար օգտագործվում է կլինիկական պրակտիկայում՝ H2S-ը փոխարինելու համար»։18
Վերոնշյալ քննարկումը ցույց է տալիս, որ NaHS-ը կորչում է լուծույթից գոլորշիացման, օքսիդացման և ֆոտոլիզի միջոցով, ուստի որոշ առաջարկություններ են արվում լուծույթից H2S-ի կորուստը նվազեցնելու համար: Նախ, H2S-ի գոլորշիացումը կախված է գազ-հեղուկ միջերեսից13 և լուծույթի pH-ից11. հետևաբար, գոլորշիացման կորուստը նվազագույնի հասցնելու համար ջրային շշի վզիկը կարելի է հնարավորինս փոքրացնել, ինչպես նկարագրվել է նախկինում15,19, և ջրի pH-ը կարելի է կարգավորել մինչև ընդունելի վերին սահման (այսինքն՝ 6.5–8.551)՝ գոլորշիացման կորուստը նվազագույնի հասցնելու համար11: Երկրորդ, H2S-ի ինքնաբուխ օքսիդացումը տեղի է ունենում թթվածնի ազդեցության և խմելու ջրում անցումային մետաղի իոնների առկայության պատճառով13, ուստի խմելու ջրի թթվածնի օքսիդացումը արգոնով կամ ազոտով44,45 և մետաղական քելատորների օգտագործումը37,47 կարող են նվազեցնել սուլֆիդների օքսիդացումը: Երրորդ, H2S-ի լուսաքայքայումը կանխելու համար ջրային շշերը կարելի է փաթաթել ալյումինե փայլաթիթեղով. Այս պրակտիկան վերաբերում է նաև լուսազգայուն նյութերին, ինչպիսիք են ստրեպտոզոտոցինը55: Վերջապես, անօրգանական սուլֆիդային աղերը (NaHS, Na2S և CaS) կարող են ներարկվել սննդային խողովակի միջոցով, այլ ոչ թե խմելու ջրում լուծված, ինչպես նախկինում հաղորդվել է56,57,58։ Ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ առնետներին սննդային խողովակի միջոցով ներարկված ռադիոակտիվ նատրիումի սուլֆիդը լավ է ներծծվում և տարածվում գրեթե բոլոր հյուսվածքներում59։ Մինչ օրս ուսումնասիրությունների մեծ մասը անօրգանական սուլֆիդային աղեր ներարկել է որովայնամզի միջոցով, սակայն այս ուղին հազվադեպ է օգտագործվում կլինիկական պայմաններում60։ Մյուս կողմից, բերանացի ընդունման ուղին մարդկանց մոտ ներարկման ամենատարածված և նախընտրելի ուղին է61։ Հետևաբար, մենք խորհուրդ ենք տալիս գնահատել H2S դոնորների ազդեցությունը կրծողների վրա բերանացի խողովակի միջոցով։
Սահմանափակումն այն է, որ մենք չափել ենք սուլֆիդը ջրային լուծույթում և շիճուկում՝ օգտագործելով MB մեթոդը: Սուլֆիդի չափման մեթոդներն են՝ յոդի տիտրումը, սպեկտրոֆոտոմետրիան, էլեկտրաքիմիական մեթոդը (պոտենցիոմետրիա, ամպերոմետրիա, կուլոմետրիկ մեթոդ և ամպերոմետրիկ մեթոդ) և քրոմատոգրաֆիան (գազային քրոմատոգրաֆիա և բարձր արդյունավետությամբ հեղուկ քրոմատոգրաֆիա), որոնցից ամենատարածված մեթոդը MB սպեկտրոֆոտոմետրիկ մեթոդն է62: Կենսաբանական նմուշներում H2S-ի չափման MB մեթոդի սահմանափակումն այն է, որ այն չափում է բոլոր ծծումբ պարունակող միացությունները և ոչ թե ազատ H2S63-ը, քանի որ այն իրականացվում է թթվային պայմաններում, ինչը հանգեցնում է ծծմբի արդյունահանմանը կենսաբանական աղբյուրից64: Այնուամենայնիվ, ըստ Ամերիկյան հանրային առողջապահության ասոցիացիայի, MB-ն ջրում սուլֆիդի չափման ստանդարտ մեթոդն է65: Հետևաբար, այս սահմանափակումը չի ազդում NaHS պարունակող լուծույթների անկայունության վերաբերյալ մեր հիմնական արդյունքների վրա: Ավելին, մեր ուսումնասիրության մեջ NaHS պարունակող ջրի և շիճուկի նմուշներում սուլֆիդի չափումների վերականգնումը համապատասխանաբար կազմել է 91% և 93%: Այս արժեքները համապատասխանում են նախկինում հաղորդված միջակայքերին (77–92)66, ինչը ցույց է տալիս ընդունելի վերլուծական ճշգրտություն42: Հարկ է նշել, որ մենք օգտագործել ենք և՛ արու, և՛ էգ առնետներ՝ համաձայն Առողջապահության ազգային ինստիտուտների (NIH) ուղեցույցների՝ նախակլինիկական հետազոտություններում միայն արու կենդանիների վրա կատարված ուսումնասիրությունների վրա չափազանց մեծ վստահությունից խուսափելու համար67 և հնարավորության դեպքում ներառելու և՛ արու, և՛ էգ առնետներ68: Այս կետը շեշտվել է այլոց կողմից69,70,71:
Ամփոփելով՝ այս ուսումնասիրության արդյունքները ցույց են տալիս, որ խմելու ջրից պատրաստված NaHS լուծույթները չեն կարող օգտագործվել H2S ստանալու համար՝ իրենց անկայունության պատճառով: Այս եղանակով ընդունման դեպքում կենդանիները կենթարկվեն NaHS-ի անկայուն և սպասվածից ցածր մակարդակների ազդեցության, հետևաբար, արդյունքները կարող են կիրառելի չլինել մարդկանց համար:
Ընթացիկ ուսումնասիրության ընթացքում օգտագործված և/կամ վերլուծված տվյալների հավաքածուները հասանելի են համապատասխան հեղինակից՝ ողջամիտ պահանջի դեպքում։
Սաբո, Կ. Ջրածնի սուլֆիդի (H2S) հետազոտության ժամանակագրությունը. շրջակա միջավայրի տոքսինից մինչև կենսաբանական միջնորդ։ Կենսաքիմիա և դեղաբանություն 149, 5–19. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2017.09.010 (2018)։
Աբե, Կ. և Կիմուրա, Հ. Ջրածնի սուլֆիդի հնարավոր դերը որպես էնդոգեն նեյրոմոդուլյատոր։ Նյարդաբանության հանդես, 16, 1066–1071։ https://doi.org/10.1523/JNEUROSCI.16-03-01066.1996 (1996)։
Չիրինո, Գ., Սաբո, Կ. և Պապապետրոպուլոս, Ա. Ջրածնի սուլֆիդի ֆիզիոլոգիական դերը կաթնասունների բջիջներում, հյուսվածքներում և օրգաններում: Ֆիզիոլոգիայի և մոլեկուլային կենսաբանության ակնարկներ 103, 31–276: https://doi.org/10.1152/physrev.00028.2021 (2023):
Դիլոն, Կ.Մ., Կարազոնե, Ռ.Ջ., Մաթսոն, Ջ.Բ. և Քաշֆի, Կ. Ազոտի օքսիդի և ջրածնի սուլֆիդի բջջային առաքման համակարգերի զարգացող հեռանկարը. անհատականացված բժշկության նոր դարաշրջան: Կենսաքիմիա և դեղաբանություն 176, 113931. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2020.113931 (2020):
Սան, Շ. և այլք։ Դանդաղ արտազատվող ջրածնի սուլֆիդային դոնորի երկարատև կիրառումը կարող է կանխել միոկարդի իշեմիան/ռեպերֆուզիոն վնասվածքը։ Գիտական ​​զեկույցներ 7, 3541։ https://doi.org/10.1038/s41598-017-03941-0 (2017)։
Սիտդիկովա, Գ.Ֆ., Ֆուքս, Ռ., Կայնց, Վ., Վայգեր, Թ.Մ. և Հերման, Ա. BK անցուղու ֆոսֆորիլացումը կարգավորում է ջրածնի սուլֆիդի (H2S) նկատմամբ զգայունությունը: Frontiers in Physiology 5, 431. https://doi.org/10.3389/fphys.2014.00431 (2014):
Սիտդիկովա, Գ.Ֆ., Վայգեր, Թ.Մ. և Հերման, Ա. Ջրածնի սուլֆիդը ուժեղացնում է կալցիումով ակտիվացված կալիումական (BK) անցուղիների ակտիվությունը առնետի հիպոֆիզի ուռուցքային բջիջներում: Archit. Pfluegers. 459, 389–397. https://doi.org/10.1007/s00424-009-0737-0 (2010):
Ջեդդի, Ս. և այլք։ Ջրածնի սուլֆիդը ուժեղացնում է նիտրիտի պաշտպանիչ ազդեցությունը միոկարդի իշեմիա-ռեպերֆուզիոն վնասվածքի դեմ 2-րդ տիպի շաքարախտով առնետների մոտ։ Նիտրիկ օքսիդ 124, 15–23. https://doi.org/10.1016/j.niox.2022.04.004 (2022)։
Կորվինո, Ա., և այլք։ H2S դոնորների քիմիայի միտումները և դրանց ազդեցությունը սրտանոթային հիվանդությունների վրա։ Հակաօքսիդանտներ 10, 429։ https://doi.org/10.3390/antiox10030429 (2021)։
ԴեԼեոն, Է.Ռ., Սթոյ, Գ.Ֆ. և Օլսոն, Կ.Ռ. (2012): Ջրածնի սուլֆիդի պասիվ կորուստները կենսաբանական փորձերում: Անալիտիկ կենսաքիմիա 421, 203–207. https://doi.org/10.1016/j.ab.2011.10.016 (2012):
Նագի, Պ. և այլք։ Ֆիզիոլոգիական նմուշներում ջրածնի սուլֆիդի չափումների քիմիական ասպեկտները։ Biochimica et Biophysical Acta 1840, 876–891. https://doi.org/10.1016/j.bbagen.2013.05.037 (2014)։
Քլայն, ԼԼ.Դ. Սպեկտրոֆոտոմետրիկ որոշում բնական ջրերում: Լիմնոլ: Օկեանոգր. 14, 454–458. https://doi.org/10.4319/lo.1969.14.3.0454 (1969):
Օլսոն, Կ.Ռ. (2012): Գործնական պարապմունքներ ջրածնի սուլֆիդի քիմիայի և կենսաբանության մեջ: «Հակաօքսիդանտներ»: Ռեդոքս ազդանշանային համակարգ: 17, 32–44: https://doi.org/10.1089/ars.2011.4401 (2012):