Շնորհակալություն Nature.com կայք այցելելու համար: Դուք օգտագործում եք սահմանափակ CSS աջակցությամբ դիտարկիչի տարբերակ: Լավագույն փորձի համար խորհուրդ ենք տալիս օգտագործել թարմացված դիտարկիչ (կամ անջատել համատեղելիության ռեժիմը Internet Explorer-ում): Բացի այդ, շարունակական աջակցությունն ապահովելու համար մենք կայքը ցուցադրում ենք առանց ոճերի և JavaScript-ի:
Սահիկներ, որոնք ցուցադրում են յուրաքանչյուր սլայդի երեք հոդված: Օգտագործեք «հետ» և «հաջորդ» կոճակները՝ սլայդների միջև անցնելու համար, կամ սլայդի վերջում գտնվող սլայդի կառավարիչի կոճակները՝ յուրաքանչյուր սլայդում անցնելու համար:
Կադմիումի (Cd) աղտոտումը սպառնալիք է ներկայացնում Յուննան նահանգում Panax notoginseng դեղաբույսի մշակման համար: Արտաքին Cd սթրեսի պայմաններում անցկացվել է դաշտային փորձ՝ կրի կիրառման (0.750, 2250 և 3750 կգ bm-2) և թրթնջուկաթթվի ցողման (0, 0.1 և 0.2 մոլ լ-1) ազդեցությունը Cd կուտակման և հակաօքսիդանտային ազդեցության վրա հասկանալու համար: Panax notoginseng-ի վրա ազդող համակարգային և բուժիչ բաղադրիչները: Արդյունքները ցույց են տվել, որ չհանգած կիրը և թրթնջուկաթթվով տերևային ցողումը կարող են բարձրացնել Ca2+ մակարդակը Panax notoginseng-ում Cd սթրեսի տակ և նվազեցնել Cd2+ թունավորությունը: Կրի և թրթնջուկաթթվի ավելացումը մեծացրել է հակաօքսիդանտ ֆերմենտների ակտիվությունը և փոխել օսմորեգուլյատորների նյութափոխանակությունը: CAT ակտիվությունը ամենանշանակալից աճել է՝ աճելով 2.77 անգամ: SOD-ի ամենաբարձր ակտիվությունը աճել է 1.78 անգամ, երբ այն մշակվել է թրթնջուկաթթվով: MDA-ի պարունակությունը նվազել է 58.38%-ով: Կա շատ նշանակալի կապ լուծվող շաքարի, ազատ ամինաթթվի, պրոլինի և լուծվող սպիտակուցի հետ: Լայմը և թրթնջուկային թթուն կարող են մեծացնել կալցիումի իոնները (Ca2+), նվազեցնել Cd-ն, բարելավել սթրեսի նկատմամբ դիմադրողականությունը Panax notoginseng-ում և մեծացնել սապոնինների և ֆլավոնոիդների ընդհանուր արտադրությունը: Cd-ի պարունակությունը ամենացածրն էր՝ 68.57%-ով ցածր, քան վերահսկիչ խմբում, որը համապատասխանում էր ստանդարտ արժեքին (Cd≤0.5 մգ/կգ, GB/T 19086-2008): SPN-ի համամասնությունը կազմել է 7.73%, որը հասել է յուրաքանչյուր բուժման ամենաբարձր մակարդակին, իսկ ֆլավոնոիդների պարունակությունը զգալիորեն աճել է 21.74%-ով՝ հասնելով դեղամիջոցի ստանդարտ արժեքին և լավագույն արդյունքին:
Կադմիումը (Cd), որպես մշակովի հողի տարածված աղտոտիչ, հեշտությամբ է միգրացվում և ունի զգալի կենսաբանական թունավորություն1: Էլ Շաֆեյը և այլք2 նշել են, որ Cd թունավորությունը ազդում է օգտագործվող բույսերի որակի և արտադրողականության վրա: Վերջին տարիներին Չինաստանի հարավ-արևմուտքում մշակովի հողերի հողում կադմիումի ավելցուկի երևույթը շատ լուրջ է դարձել: Յուննան նահանգը Չինաստանի կենսաբազմազանության թագավորությունն է, որի մեջ բուժիչ բույսերի տեսակները զբաղեցնում են առաջին տեղը երկրում: Այնուամենայնիվ, Յուննան նահանգի հարուստ հանքային պաշարները անխուսափելիորեն հանգեցնում են հողի ծանր մետաղներով աղտոտման հանքարդյունաբերության ընթացքում, ինչը ազդում է տեղական բուժիչ բույսերի արտադրության վրա:
Պանակս նոտոգինսենգը (Բուրկիլ) Չեն3 շատ արժեքավոր բազմամյա բուսական դեղաբույս ​​է, որը պատկանում է Araliaceae Panax ginseng ցեղին: Պանակս նոտոգինսենգի արմատը խթանում է արյան շրջանառությունը, վերացնում արյան լճացումը և թեթևացնում ցավը: Արտադրության հիմնական վայրը Վենանշան պրեֆեկտուրան է, Յուննան նահանգ: Կադմիումով աղտոտվածությունը առկա էր Պանակս նոտոգինսենգի տնկման տարածքում գտնվող հողի մակերեսի ավելի քան 75%-ում և գերազանցում էր 81-100%-ը տարբեր վայրերում: Կադմիումի թունավոր ազդեցությունը նաև զգալիորեն նվազեցնում է Պանակս նոտոգինսենգի բուժիչ բաղադրիչների, մասնավորապես սապոնինների և ֆլավոնոիդների արտադրությունը: Սապոնինները ագլիկոնների դաս են, որոնց թվում են տրիտերպենոիդները կամ սպիրոստերանները, որոնք շատ չինական բուսական դեղամիջոցների հիմնական ակտիվ բաղադրիչներն են և պարունակում են սապոնիններ: Որոշ սապոնիններ ունեն նաև արժեքավոր կենսաբանական ակտիվություններ, ինչպիսիք են հակաբակտերիալ ակտիվությունը, ջերմիջեցնող, հանգստացնող և հակաքաղցկեղային ակտիվությունը: Ֆլավոնոիդները ընդհանուր առմամբ վերաբերում են մի շարք միացությունների, որոնցում ֆենոլային հիդրօքսիլային խմբերով երկու բենզոլային օղակներ միացված են երեք կենտրոնական ածխածնի ատոմների միջոցով, իսկ հիմնական միջուկը 2-ֆենիլքրոմանոն 8-ն է: Այն ուժեղ հակաօքսիդանտ է, որը կարող է արդյունավետորեն հեռացնել բույսերի թթվածնի ազատ ռադիկալները, կանխել բորբոքային կենսաբանական ֆերմենտների արտազատումը, նպաստել վերքերի լավացմանը և ցավի մեղմացմանը, ինչպես նաև իջեցնել խոլեստերինի մակարդակը: Այն Panax Ginseng-ի հիմնական ակտիվ բաղադրիչներից մեկն է: Panax notoginseng-ի արտադրական տարածքներում կադմիումով հողի աղտոտման խնդրի լուծումը անհրաժեշտ պայման է դրա հիմնական բուժիչ բաղադրիչների արտադրությունն ապահովելու համար:
Կադմիումով հողի աղտոտումը տեղում շտկելու համար օգտագործվող տարածված պասիվացնողներից մեկը կրաքարն է: Այն ազդում է Cd-ի ադսորբցիայի և նստեցման վրա հողում և նվազեցնում է Cd-ի կենսաբանական ակտիվությունը հողում՝ բարձրացնելով pH-ը և փոխելով հողի կատիոնային փոխանակման կարողությունը (CEC), հողի աղային հագեցվածությունը (BS), հողի օքսիդա-վերականգնման պոտենցիալը (Eh)3,11 արդյունավետությունը: Բացի այդ, կրաքարը ապահովում է մեծ քանակությամբ Ca2+, որը իոնային անտագոնիզմ է առաջացնում Cd2+-ի հետ, մրցակցում է արմատների ադսորբցիայի տեղամասերի համար, կանխում է Cd-ի տեղափոխումը դեպի ծիլ և ունի ցածր կենսաբանական թունավորություն: Cd սթրեսի տակ 50 մմոլ լ-1 Ca ավելացնելով՝ քնջութի տերևներում Cd-ի տեղափոխումը կասեցվել է, և Cd-ի կուտակումը նվազել է 80%-ով: Բրնձի (Oryza sativa L.) և այլ մշակաբույսերի վերաբերյալ բազմաթիվ ուսումնասիրություններ են անցկացվել12,13:
Վերջին տարիներին ծանր մետաղների կուտակումը վերահսկելու համար մշակաբույսերի տերևների ցողումը ծանր մետաղների կուտակումը վերահսկելու համար ծանր մետաղների դեմ պայքարի նոր մեթոդ է: Սկզբունքը հիմնականում կապված է բույսերի բջիջներում քելացման ռեակցիայի հետ, որը հանգեցնում է ծանր մետաղների բջջային պատի վրա նստեցմանը և կանխում է բույսերի կողմից ծանր մետաղների կլանումը14,15: Որպես կայուն դիկարբօքսիլաթթվային քելացնող նյութ, թրթնջուկային թթուն կարող է ուղղակիորեն քելացնել ծանր մետաղների իոնները բույսերում, դրանով իսկ նվազեցնելով թունավորությունը: Ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ սոյայի մեջ պարունակվող թրթնջուկային թթուն կարող է քելացնել Cd2+ և արտազատել Cd պարունակող բյուրեղներ տրիխոմային գագաթային բջիջների միջոցով, նվազեցնելով մարմնի Cd2+ մակարդակը16: Թրթնջուկային թթուն կարող է կարգավորել հողի pH-ը, բարձրացնել սուպերօքսիդ դիսմուտազի (SOD), պերօքսիդազի (POD) և կատալազի (CAT) ակտիվությունը, ինչպես նաև կարգավորել լուծելի շաքարի, լուծելի սպիտակուցի, ազատ ամինաթթուների և պրոլինի ներթափանցումը: Նյութափոխանակության մոդուլյատորներ17,18: Օքսալատային բույսերում թթվային նյութերը և Ca2+-ի ավելցուկը սաղմնային սպիտակուցների ազդեցության տակ առաջացնում են կալցիումի օքսալատի նստվածքներ: Բույսերում Ca2+ կոնցենտրացիայի կարգավորումը կարող է արդյունավետորեն կարգավորել լուծված թրթնջուկային թթուն և Ca2+-ը բույսերում և կանխել թրթնջուկային թթվի և Ca2+19,20-ի չափազանց կուտակումը։
Կիրառվող կրի քանակը վերականգնման ազդեցության վրա ազդող հիմնական գործոններից մեկն է: Սահմանվել է, որ կրի սպառումը տատանվում է 750-ից մինչև 6000 կգ·ժ·մ−2: 5.0-5.5 pH ունեցող թթվային հողերի համար 3000-6000 կգ·ժ·մ−2 դեղաչափով կրի կիրառման ազդեցությունը զգալիորեն ավելի բարձր էր, քան 750 կգ·ժ·մ−2 դեղաչափի դեպքում: Այնուամենայնիվ, կրի չափից շատ կիրառումը որոշակի բացասական ազդեցություն կունենա հողի վրա, ինչպիսիք են հողի pH-ի և հողի խտացման մեծ փոփոխությունները22: Հետևաբար, մենք CaO մշակման մակարդակները սահմանել ենք 0, 750, 2250 և 3750 կգ·ժ·մ−2: Երբ թրթնջուկային թթու կիրառվեց Arabidopsis-ի վրա, Ca2+-ը զգալիորեն նվազեց 10 մՄ L-1-ի դեպքում, և Ca2+ ազդանշանային ուղին ազդող CRT գեների ընտանիքը խիստ զգայուն էր20: Նախորդ որոշ ուսումնասիրությունների կուտակումը թույլ տվեց մեզ որոշել այս փորձի կոնցենտրացիան և շարունակել ուսումնասիրել էկզոգեն հավելումների փոխազդեցությունը Ca2+ և Cd2+23,24,25-ի վրա: Այսպիսով, այս ուսումնասիրության նպատակն է ուսումնասիրել տեղային կրի կիրառման և թրթնջուկային թթվի տերևային ցողման ազդեցության կարգավորող մեխանիզմը Panax notoginseng-ի կադմիումի պարունակության և սթրեսի նկատմամբ դիմադրողականության վրա կադմիումով աղտոտված հողերում, ինչպես նաև հետագայում ուսումնասիրել բուժական որակի երաշխիքի լավագույն եղանակներն ու միջոցները: Այն արժեքավոր տեղեկատվություն է տրամադրում կադմիումով աղտոտված հողերում խոտաբույսերի մշակության ընդլայնման և դեղերի շուկայի պահանջարկը բավարարելու համար բարձրորակ, կայուն արտադրության ապահովման համար:
Որպես նյութ օգտագործելով տեղական Վենշան նոտոգինսենգ տեսակը, դաշտային փորձ է անցկացվել Լաննիժայում (24°11′Հյուսիսային լայնություն, 104°3′Արևելյան երկայնություն, բարձրություն 1446մ), Ցյուբեյ շրջան, Վենշան պրեֆեկտուրա, Յուննան նահանգ: Տարեկան միջին ջերմաստիճանը 17°C է, իսկ տարեկան տեղումների միջին քանակը՝ 1250 մմ: Ուսումնասիրված հողի ֆոնային արժեքները՝ TN 0.57 գ կգ-1, TP 1.64 գ կգ-1, TC 16.31 գ կգ-1, RH 31.86 գ կգ-1, ալկալային հիդրոլիզացված N 88.82 մգ կգ-1, արդյունավետ P 18.55 մգ կգ-1, մատչելի K 100.37 մգ կգ-1, ընդհանուր Cd 0.3 մգ կգ-1 և pH 5.4:
Դեկտեմբերի 10-ին, 2017 թվականին, յուրաքանչյուր հողամասում կիրառվել և բերրի հողի հետ խառնվել է 6 մգ/կգ Cd2+ (CdCl2 2.5H2O) և կիր (0.750, 2250 և 3750 կգ հ մ-2): Յուրաքանչյուր մշակումը կրկնվել է 3 անգամ: Փորձարարական հողամասերը տեղակայվել են պատահականորեն, յուրաքանչյուր հողամասի մակերեսը կազմել է 3 քմ: Մեկ տարեկան Panax notoginseng սածիլները փոխպատվաստվել են հողում 15 օր մշակվելուց հետո: Ստվերող ցանցեր օգտագործելիս Panax notoginseng-ի լույսի ինտենսիվությունը ստվերող սաղարթում կազմում է բնական լույսի նորմալ ինտենսիվության մոտ 18%-ը: Աճեցրեք տեղական ավանդական աճեցման մեթոդներով: 2019 թվականին Panax notoginseng-ի հասունացման փուլում թրթնջուկային թթուն կցողվի նատրիումի օքսալատի տեսքով: Թրթնջուկային թթվի կոնցենտրացիան համապատասխանաբար կազմել է 0, 0.1 և 0.2 մոլ/լ, իսկ pH-ը կարգավորվել է մինչև 5.16 NaOH-ով՝ մնացորդների ֆիլտրատի միջին pH-ը նմանակելու համար: Տերևների վերին և ստորին մակերեսները ցողել շաբաթը մեկ անգամ՝ առավոտյան ժամը 8-ին: 4 անգամ ցողելուց հետո, 3 տարեկան Panax notoginseng բույսերը հավաքվել են 5-րդ շաբաթում:
2019 թվականի նոյեմբերին դաշտում հավաքվեցին թրթնջկաթթվով մշակված երեք տարեկան Panax notoginseng բույսեր: Ֆիզիոլոգիական նյութափոխանակության և ֆերմենտային ակտիվության ստուգման համար նախատեսված 3 տարեկան Panax notoginseng բույսերի որոշ նմուշներ տեղադրվեցին սառնարանային խողովակների մեջ, արագ սառեցվեցին հեղուկ ազոտի մեջ, ապա տեղափոխվեցին սառնարան -80°C ջերմաստիճանում: Արմատային նմուշներում պետք է որոշվի հասուն փուլի մասը Cd-ի և ակտիվ բաղադրիչի պարունակության համար: Ջրով լվանալուց հետո չորացրեք 105°C ջերմաստիճանում 30 րոպե, զանգվածը պահեք 75°C ջերմաստիճանում և նմուշները մանրացրեք հավանգի մեջ:
Էրլենմայերի սրվակի մեջ կշռեք 0.2 գ չորացրած բույսերի նմուշներ, ավելացրեք 8 մլ HNO3 և 2 մլ HClO4 և ամբողջ գիշեր փակեք կափարիչով։ Հաջորդ օրը կոր վզիկով ձագարը տեղադրվում է եռանկյունաձև սրվակի մեջ՝ էլեկտրաջերմային քայքայման համար, մինչև սպիտակ ծուխ հայտնվի, և քայքայման լուծույթը դառնա թափանցիկ։ Սենյակային ջերմաստիճանում սառեցնելուց հետո խառնուրդը տեղափոխվում է 10 մլ ծավալային սրվակի մեջ։ Cd-ի պարունակությունը որոշվել է ատոմային կլանման սպեկտրոմետրով (Thermo ICE™ 3300 AAS, ԱՄՆ): (GB/T 23739-2009):
50 մլ պլաստիկե շշի մեջ կշռեք 0.2 գ չորացրած բույսերի նմուշներ, ավելացրեք 10 մլ 1 մոլ l-1 HCL, փակեք և թափահարեք 15 ժամ, ապա զտեք: Պիպետի միջոցով հավաքեք անհրաժեշտ քանակությամբ զտիչ՝ համապատասխան նոսրացման համար, և ավելացրեք SrCl2 լուծույթը՝ Sr2+ կոնցենտրացիան 1 գ L-1 հասցնելու համար: Ca պարունակությունը որոշվել է ատոմային կլանման սպեկտրոմետրով (Thermo ICE™ 3300 AAS, ԱՄՆ):
Մալոնդիալդեհիդի (MDA), սուպերօքսիդ դիսմուտազի (SOD), պերօքսիդազի (POD) և կատալազի (CAT) հղման հավաքածուի մեթոդ (DNM-9602, Beijing Pulang New Technology Co., Ltd., ապրանքի գրանցման համար), օգտագործեք համապատասխան չափման հավաքածուի համարը՝ Jingyaodianji (քվազի) բառ 2013 № 2400147):
Կշռեք Panax notoginseng նմուշի 0.05 գ և ավելացրեք անտրոն-ծծմբական թթվի ռեակտիվը խողովակի եզրերին: Թափահարեք խողովակը 2-3 վայրկյան՝ հեղուկը լավ խառնելու համար: Տեղադրեք խողովակը փորձանոթի դարակի վրա 15 րոպե: Լուծվող շաքարների պարունակությունը որոշվել է ուլտրամանուշակագույն-տեսանելի սպեկտրոֆոտոմետրիայի միջոցով (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., Չինաստան)՝ 620 նմ ալիքի երկարությամբ:
Կշռեք Panax notoginseng-ի 0.5 գ թարմ նմուշ, մանրացրեք այն մինչև հոմոգենատ 5 մլ թորած ջրով և ցենտրիֆուգացրեք 10,000 գ-ի վրա 10 րոպե: Նոսրացրեք վերին շերտը մինչև ֆիքսված ծավալ: Օգտագործվել է Coomassie Brilliant Blue մեթոդը: Լուծվող սպիտակուցի պարունակությունը որոշվել է սպեկտրոֆոտոմետրիայի միջոցով սպեկտրի ուլտրամանուշակագույն և տեսանելի շրջաններում (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., Չինաստան) 595 նմ ալիքի երկարությամբ և հաշվարկվել է խոշոր եղջերավոր անասունների շիճուկային ալբումինի ստանդարտ կորից:
Կշռեք 0.5 գ թարմ նմուշ, ավելացրեք 5 մլ 10% քացախաթթու՝ մանրացնելու և համասեռացնելու համար, զտեք և նոսրացրեք մինչև հաստատուն ծավալ: Քրոմոգեն մեթոդ՝ նինհիդրինի լուծույթով: Ազատ ամինաթթուների պարունակությունը որոշվել է ուլտրամանուշակագույն-տեսանելի սպեկտրոֆոտոմետրիայի միջոցով (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., Չինաստան) 570 նմ ալիքի երկարությամբ և հաշվարկվել է ստանդարտ լեյցինի կորից:
Կշռեք 0.5 գ թարմ նմուշ, ավելացրեք 5 մլ սուլֆոսալիցիլաթթվի 3% լուծույթ, տաքացրեք ջրային լոգարանում և թափահարեք 10 րոպե: Սառեցնելուց հետո լուծույթը զտեք և նոսրացրեք մինչև հաստատուն ծավալ: Օգտագործվեց թթվային նինհիդրինի քրոմոգեն մեթոդը: Պրոլինի պարունակությունը որոշվեց ուլտրամանուշակագույն-տեսանելի սպեկտրոֆոտոմետրիայի միջոցով (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., Չինաստան) 520 նմ ալիքի երկարությամբ և հաշվարկվեց պրոլինի ստանդարտ կորից:
Սապոնինների պարունակությունը որոշվել է բարձր արդյունավետությամբ հեղուկ քրոմատոգրաֆիայի (HPLC) միջոցով՝ համաձայն Չինաստանի Ժողովրդական Հանրապետության դեղագիտության (հրատարակություն 2015): HPLC-ի հիմնական սկզբունքն է օգտագործել բարձր ճնշման հեղուկը որպես շարժական փուլ և կիրառել բարձր արդյունավետությամբ բաժանման տեխնոլոգիա ստացիոնար փուլային սյունակի վրա՝ գերմանր մասնիկների համար: Գործողության հմտությունները հետևյալն են.
HPLC պայմանները և համակարգի պիտանիության թեստը (աղյուսակ 1): Գրադիենտային էլյուցիան իրականացվել է հետևյալ աղյուսակի համաձայն՝ օգտագործելով օկտադեցիլսիլանի հետ կապված սիլիցիումային գել որպես լցանյութ, ացետոնիտրիլ որպես շարժական փուլ A, ջուր որպես շարժական փուլ B, և հայտնաբերման ալիքի երկարությունը 203 նմ էր: Panax notoginseng սապոնինների R1 գագաթնակետից հաշվարկված տեսական բաժակների քանակը պետք է լինի առնվազն 4000:
Ստանդարտ լուծույթի պատրաստում. Ճշգրիտ կշռեք գինսենոզիդներ Rg1-ը, գինսենոզիդներ Rb1-ը և նոտոգինսենոզիդներ R1-ը, ավելացրեք մեթանոլ՝ ստանալու համար 0.4 մգ գինսենոզիդ Rg1-ի, 0.4 մգ գինսենոզիդ Rb1-ի և 0.1 մգ նոտոգինսենոզիդ R1-ի խառը լուծույթ մեկ մլ-ում:
Փորձարկման լուծույթի պատրաստում. Կշռեք 0.6 գ Սանսին փոշի և ավելացրեք 50 մլ մեթանոլ: Խառնուրդը կշռվեց (W1) և թողնվեց գիշերը: Այնուհետև խառը լուծույթը թեթևակի եռացվեց ջրային բաղնիքում 80°C ջերմաստիճանում 2 ժամ: Սառեցնելուց հետո կշռեք խառը լուծույթը և ստացված մեթանոլը ավելացրեք W1-ի առաջին զանգվածին: Այնուհետև լավ թափահարեք և զտեք: Զտիչը թողնվեց որոշման համար:
Սապոնինի պարունակությունը ճշգրտորեն կլանվել է ստանդարտ լուծույթի 10 մկլ-ի և ֆիլտրատի 10 մկլ-ի կողմից և ներարկվել է HPLC (Thermo HPLC-ultimate 3000, Seymour Fisher Technology Co., Ltd.)24 մեջ։
Ստանդարտ կոր. Rg1, Rb1, R1 խառը ստանդարտ լուծույթի որոշում, քրոմատոգրաֆիայի պայմանները նույնն են, ինչ վերևում: Հաշվարկեք ստանդարտ կորը՝ չափված գագաթնակետի մակերեսը y-առանցքի վրա և ստանդարտ լուծույթում սապոնինի կոնցենտրացիան աբսցիսի վրա: Նմուշի չափված գագաթնակետի մակերեսը տեղադրեք ստանդարտ կորի մեջ՝ սապոնինի կոնցենտրացիան հաշվարկելու համար:
Կշռեք P. notogensings-ի 0.1 գ նմուշ և ավելացրեք 50 մլ 70% CH3OH լուծույթ: Ուլտրաձայնային եղանակով մշակեք 2 ժամ, ապա ցենտրիֆուգացրեք 4000 պտ/րոպե արագությամբ 10 րոպե: Վերցրեք 1 մլ վերին շերտից և նոսրացրեք այն 12 անգամ: Ֆլավոնոիդների պարունակությունը որոշվել է ուլտրամանուշակագույն-տեսանելի սպեկտրոֆոտոմետրիայի միջոցով (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., Չինաստան) 249 նմ ալիքի երկարությամբ: Քվերցետինը ստանդարտ առատ նյութ է8:
Տվյալները կազմակերպվել են Excel 2010 ծրագրով։ Տվյալների դիսպերսիայի վերլուծությունը գնահատվել է SPSS Statistics 20 ծրագրով։ Նկարը նկարվել է origin Pro 9.1-ով։ Հաշվարկված վիճակագրությունը ներառում է միջին ± ստանդարտ շեղում։ Վիճակագրական նշանակալիության վերաբերյալ հայտարարությունները հիմնված են P<0.05-ի վրա։
Նույն կոնցենտրացիայով թրթնջուկային թթվի տերևային ցողման դեպքում Panax notoginseng-ի արմատներում Ca-ի պարունակությունը զգալիորեն աճել է կրի կիրառման ավելացման հետ մեկտեղ (աղյուսակ 2): Կրի չկիրառման համեմատ, Ca-ի պարունակությունը աճել է 212%-ով՝ 3750 կգ ppm կրի դեպքում՝ առանց թրթնջուկային թթվի ցողման: Նույն չափաբաժնի դեպքում, կալցիումի պարունակությունը փոքր-ինչ աճել է ցողված թրթնջուկային թթվի կոնցենտրացիայի ավելացման հետ մեկտեղ:
Արմատներում կադմի պարունակությունը տատանվում էր 0.22-ից մինչև 0.70 մգ/կգ: Թրթնջուկային թթվի նույն ցողման կոնցենտրացիայի դեպքում 2250 կգ hm-2 Cd-ի պարունակությունը զգալիորեն նվազել է կրի կիրառման արագության աճին զուգընթաց: Վերահսկիչ խմբի համեմատ, արմատները 2250 կգ գմ-2 կիրով և 0.1 մոլ լ-1 թրթնջուկային թթվով ցողելիս, կադմի պարունակությունը նվազել է 68.57%-ով: Առանց կրի և 750 կգ hm-2 կիրով ցողելիս, Panax notoginseng-ի արմատներում կադմի պարունակությունը զգալիորեն նվազել է թրթնջուկային թթվի ցողման կոնցենտրացիայի աճին զուգընթաց: 2250 կգ կիր գմ-2-ի և 3750 կգ կիր գմ-2-ի ներմուծման դեպքում արմատում կադմի պարունակությունը նախ նվազել է, ապա աճել՝ թրթնջուկային թթվի կոնցենտրացիայի աճին զուգընթաց: Բացի այդ, երկչափ վերլուծությունը ցույց տվեց, որ Panax notoginseng արմատում Ca պարունակության վրա զգալիորեն ազդել է կիրը (F = 82.84**), Panax notoginseng արմատում Cd պարունակության վրա զգալիորեն ազդել են կիրը (F = 74.99**) և թրթնջկաթթվը (F = 74.99**): F = 7.72*):
Կրի կիրառման արագության և թրթնջուկային թթվով ցողման կոնցենտրացիայի ավելացման հետ մեկտեղ, MDA-ի պարունակությունը զգալիորեն նվազել է: Կրով մշակված Panax notoginseng արմատների և 3750 կգ գ/մ2 կրի միջև MDA-ի պարունակության մեջ էական տարբերություն չի հայտնաբերվել: 750 կգ hm-2 և 2250 կգ hm-2 կրի կիրառման արագությունների դեպքում, 0.2 մոլ լ-1 թրթնջուկային թթվում MDA-ի պարունակությունը ցողելիս համապատասխանաբար 58.38%-ով և 40.21%-ով ցածր էր, քան չցողված թրթնջուկային թթվում: MDA-ի պարունակությունը (7.57 նմոլ գ-1) ամենացածրն էր, երբ ավելացվել էր 750 կգ hm-2 կիր և 0.2 մոլ լ-1 թրթնջուկային թթու (Նկար 1):
Թթվային թթվով տերևների ցողման ազդեցությունը Panax notoginseng արմատներում կադմիումային սթրեսի դեպքում մալոնդիալդեհիդի պարունակության վրա [J]: P<0.05): Նույնը ստորև։
Բացառությամբ 3750 կգ հմ-2 կրի կիրառման, Panax notoginseng արմատային համակարգի SOD ակտիվության մեջ էական տարբերություն չի նկատվել: 0, 750 և 2250 կգ հմ-2 կրի օգտագործման դեպքում SOD-ի ակտիվությունը 0.2 մոլ լ-1 թրթնջուկային թթու ցողելիս զգալիորեն ավելի բարձր էր, քան թրթնջուկային թթվով մշակման բացակայության դեպքում, որը համապատասխանաբար աճել է 177.89%-ով, 61.62%-ով և 45.08%-ով: Արմատներում SOD ակտիվությունը (598.18 միավոր գ-1) ամենաբարձրն էր առանց կրի մշակվելիս և 0.2 մոլ լ-1 թրթնջուկային թթվով ցողելիս: Նույն կոնցենտրացիայի դեպքում առանց թրթնջուկային թթվի կամ 0.1 մոլ լ-1 թրթնջուկային թթվով ցողելիս SOD ակտիվությունը մեծանում էր կրի կիրառման քանակի ավելացմանը զուգընթաց: SOD ակտիվությունը զգալիորեն նվազում էր 0.2 մոլ լ-1 թրթնջուկային թթվով ցողելուց հետո (Նկար 2):
Թթվային թթվով տերևների ցողման ազդեցությունը Panax notoginseng արմատներում սուպերօքսիդ դիսմուտազի, պերօքսիդազի և կատալազի ակտիվության վրա կադմիումային սթրեսի տակ [J]:
Արմատներում SOD ակտիվության նման, արմատներում POD ակտիվությունը (63.33 մկմոլ գ-1) ամենաբարձրն էր առանց կրի և 0.2 մոլ L-1 թրթնջուկային թթվի ցողման ժամանակ, որը 148.35%-ով ավելի բարձր էր, քան վերահսկիչ խմբինը (25.50 մկմոլ գ-1): POD ակտիվությունը սկզբում աճել է, ապա նվազել թրթնջուկային թթվի ցողման կոնցենտրացիայի և 3750 կգ հմ −2 կրի մշակման հետ մեկտեղ: 0.1 մոլ l-1 թրթնջուկային թթվով մշակման համեմատ, POD ակտիվությունը նվազել է 36.31%-ով, երբ մշակվել է 0.2 մոլ l-1 թրթնջուկային թթվով (Նկար 2):
Բացառությամբ 0.2 մոլ l-1 թրթնջուկային թթու ցողելու և 2250 կգ hm-2 կամ 3750 կգ hm-2 կիր կիրառելու, CAT ակտիվությունը զգալիորեն ավելի բարձր էր, քան վերահսկիչ խմբի դեպքում: 0.1 մոլ l-1 թրթնջուկային թթվով մշակման և 0.2250 կգ ժ մ-2 կամ 3750 կգ ժ մ-2 կիրով մշակման CAT ակտիվությունը աճել է համապատասխանաբար 276.08%-ով, 276.69%-ով և 33.05%-ով՝ համեմատած թրթնջուկային թթվով չմշակման հետ: 0.2 մոլ l-1 թրթնջուկային թթվով մշակված արմատների (803.52 մկմոլ գ-1) CAT ակտիվությունը ամենաբարձրն էր: CAT ակտիվությունը (172.88 մկմոլ գ-1) ամենացածրն էր 3750 կգ hm-2 կիրի և 0.2 մոլ l-1 թրթնջուկային թթվի մշակման դեպքում (Նկար 2):
Երկփոփոխական վերլուծությունը ցույց տվեց, որ Panax notoginseng-ի CAT ակտիվությունը և MDA-ն զգալիորեն համընկնում էին թրթնջուկային թթվի կամ կրի ցողման քանակի և երկու մշակումների հետ (տե՛ս աղյուսակ 3): Արմատներում SOD ակտիվությունը բարձրապես համընկնում էր կրի և թրթնջուկային թթվի մշակման կամ թրթնջուկային թթվի ցողման կոնցենտրացիայի հետ: Արմատի POD ակտիվությունը զգալիորեն համընկնում էր կիրառվող կրի քանակի կամ կրի և թրթնջուկային թթվի միաժամանակյա կիրառման հետ:
Արմատային մշակաբույսերում լուծվող շաքարների պարունակությունը նվազել է կրի կիրառման արագության և թրթնջուկային թթվով ցողման կոնցենտրացիայի ավելացման հետ մեկտեղ: Panax notoginseng-ի արմատներում լուծվող շաքարների պարունակության մեջ էական տարբերություն չի եղել առանց կրի կիրառման և 750 կգ·հ·մ−2 կիր կիրառելու դեպքում: 2250 կգ հմ−2 կիր կիրառելիս լուծվող շաքարի պարունակությունը 0.2 մոլ լ-1 թրթնջուկային թթվով մշակվելիս զգալիորեն ավելի բարձր էր, քան ոչ թրթնջուկային թթվով ցողելիս, որը աճել է 22.81%-ով: 3750 կգ·հ·մ−2 քանակությամբ կիր կիրառելիս լուծվող շաքարների պարունակությունը զգալիորեն նվազել է թրթնջուկային թթվով ցողման կոնցենտրացիայի ավելացման հետ մեկտեղ: 0.2 մոլ L-1 թրթնջուկային թթվով ցողման դեպքում լուծվող շաքարի պարունակությունը 38.77%-ով ցածր էր, քան առանց թրթնջուկային թթվով մշակման դեպքում: Բացի այդ, 0.2 մոլ լ-1 թրթնջկաթթվով ցողիչ մշակումն ունեցել է լուծվող շաքարի ամենացածր պարունակությունը՝ 205.80 մգ գ-1 (Նկ. 3):
Թթվային թթվով տերևների ցողման ազդեցությունը Panax notoginseng-ի արմատներում կադմիումային սթրեսի դեպքում լուծվող ընդհանուր շաքարի և լուծվող սպիտակուցի պարունակության վրա [J]:
Արմատներում լուծվող սպիտակուցի պարունակությունը նվազել է կրի և թրթնջուկային թթվի կիրառման արագության ավելացման հետ մեկտեղ: Կրի բացակայության դեպքում 0.2 մոլ լ/լ թրթնջուկային թթվով ցողման դեպքում լուծվող սպիտակուցի պարունակությունը զգալիորեն ցածր էր, քան վերահսկիչ խմբում՝ 16.20%-ով: 750 կգ հմ-2 կիր կիրառելիս Panax notoginseng-ի արմատներում լուծվող սպիտակուցի պարունակության մեջ էական տարբերություն չի նկատվել: 2250 կգ/ժ մ-2 կրի կիրառման արագության դեպքում 0.2 մոլ լ/1 թրթնջուկային թթվով ցողման դեպքում լուծվող սպիտակուցի պարունակությունը զգալիորեն ավելի բարձր էր, քան ոչ թրթնջուկային թթվով ցողման դեպքում (35.11%): Երբ կիրը կիրառվել է 3750 կգ/ժ մ-2-ով, լուծվող սպիտակուցի պարունակությունը զգալիորեն նվազել է թրթնջուկային թթվի ցողման կոնցենտրացիայի ավելացման հետ մեկտեղ, և լուծվող սպիտակուցի պարունակությունը (269.84 մկգ գ-1) ամենացածրն էր 0.2 մոլ լ/1-ով մշակվելիս: 1 թրթնջկաթթվով ցողում (Նկ. 3):
Panax notoginseng-ի արմատներում ազատ ամինաթթուների պարունակության մեջ կրի բացակայության դեպքում էական տարբերություն չի հայտնաբերվել: Թրթնջուկային թթվով ցողման կոնցենտրացիայի ավելացման և 750 կգ հմ-2 կրի կիրառման արագության դեպքում ազատ ամինաթթուների պարունակությունը նախ նվազել է, ապա ավելացել: 2250 կգ հմ-2 կրով և 0.2 մոլ լ-1 թրթնջուկային թթվով մշակման կիրառման դեպքում ազատ ամինաթթուների պարունակությունը զգալիորեն աճել է 33.58%-ով՝ համեմատած թրթնջուկային թթվով մշակման բացակայության հետ: Թրթնջուկային թթվով ցողման կոնցենտրացիայի ավելացման և 3750 կգ·հմ-2 կրի ներմուծման դեպքում ազատ ամինաթթուների պարունակությունը զգալիորեն նվազել է: 0.2 մոլ L-1 թրթնջուկային թթվով ցողման մեջ ազատ ամինաթթուների պարունակությունը 49.76%-ով ցածր էր, քան առանց թրթնջուկային թթվով մշակման դեպքում: Ազատ ամինաթթվի պարունակությունը առավելագույնն էր, երբ մշակվում էր առանց թրթնջուկային թթվով մշակման և կազմում էր 2.09 մգ/գ: Ազատ ամինաթթուների պարունակությունը (1.05 մգ գ-1) ամենացածրն էր, երբ ցողվեց 0.2 մոլ լ-1 թրթնջկաթթվով (Նկ. 4):
Թթվային թթվով տերևների ցողման ազդեցությունը Panax notoginseng-ի արմատներում ազատ ամինաթթուների և պրոլինի պարունակության վրա կադմիումային սթրեսի պայմաններում [J]:
Արմատներում պրոլինի պարունակությունը նվազում էր կրի և թրթնջուկային թթվի կիրառման արագության ավելացման հետ մեկտեղ: Panax notoginseng-ի պրոլինի պարունակության մեջ էական տարբերություն չկար կրի բացակայության դեպքում: Թրթնջուկային թթվով ցողման կոնցենտրացիայի ավելացման և 750, 2250 կգ հմ-2 կրի կիրառման արագության ավելացման հետ մեկտեղ պրոլինի պարունակությունը նախ նվազում էր, ապա աճում: 0.2 մոլ լ-1 թրթնջուկային թթվով ցողման դեպքում պրոլինի պարունակությունը զգալիորեն ավելի բարձր էր, քան 0.1 մոլ լ-1 թրթնջուկային թթվով ցողման դեպքում պրոլինի պարունակությունը, որը համապատասխանաբար աճել էր 19.52%-ով և 44.33%-ով: 3750 կգ·հմ-2 կիր կիրառելիս պրոլինի պարունակությունը զգալիորեն նվազում էր թրթնջուկային թթվով ցողման կոնցենտրացիայի ավելացման հետ մեկտեղ: 0.2 մոլ լ-1 թրթնջուկային թթվով ցողելուց հետո պրոլինի պարունակությունը 54.68%-ով ցածր էր, քան առանց թրթնջուկային թթվի: Պրոլինի պարունակությունը ամենացածրն էր և կազմում էր 11.37 մկգ/գ 0.2 մոլ/լ թրթնջկաթթվով մշակման դեպքում (Նկ. 4):
Panax notoginseng-ում ընդհանուր սապոնինների պարունակությունը կազմել է Rg1>Rb1>R1: Երեք սապոնինների պարունակության մեջ էական տարբերություն չի եղել թրթնջկաթթվի ցողման կոնցենտրացիայի աճին և կրի բացակայությանը զուգընթաց (աղյուսակ 4):
0.2 մոլ լ-1 թրթնջուկային թթվի ցողման դեպքում R1-ի պարունակությունը զգալիորեն ցածր էր, քան թրթնջուկային թթվի ցողման բացակայության և 750 կամ 3750 կգ·ժ·մ-2 կիր օգտագործելու դեպքում: Թրթնջուկային թթվի ցողման 0 կամ 0.1 մոլ լ-1 կոնցենտրացիայի դեպքում կրի կիրառման արագության աճի հետ մեկտեղ R1 պարունակության մեջ էական տարբերություն չի եղել: Թրթնջուկային թթվի 0.2 մոլ լ-1 ցողման կոնցենտրացիայի դեպքում 3750 կգ հմ-2 կրի R1 պարունակությունը զգալիորեն ցածր էր, քան 43.84% առանց կրի (աղյուսակ 4):
Rg1-ի պարունակությունը սկզբում մեծացել է, ապա նվազել թրթնջուկային թթվով ցողման կոնցենտրացիայի և 750 կգ·ժ·մ−2 կրի կիրառման արագության աճին զուգընթաց: 2250 կամ 3750 կգ·ժ·մ−2 կրի կիրառման արագության դեպքում Rg1-ի պարունակությունը նվազել է թրթնջուկային թթվի ցողման կոնցենտրացիայի աճին զուգընթաց: Թրթնջուկային թթվի նույն ցողման կոնցենտրացիայի դեպքում Rg1-ի պարունակությունը սկզբում մեծացել է, ապա նվազել կրի կիրառման արագության աճին զուգընթաց: Վերահսկիչ խմբի համեմատ, բացառությամբ թրթնջուկային թթվի երեք ցողման կոնցենտրացիաների և 750 կգ·ժ·մ−2-ի, Rg1-ի պարունակությունը ավելի բարձր էր, քան վերահսկիչինը, այլ մշակումների դեպքում արմատներում Rg1-ի պարունակությունը ավելի ցածր էր, քան վերահսկիչինը: Rg1-ի պարունակությունն ամենաբարձրն էր, երբ ցողվել էր 750 կգ գմ−2 կրով և 0.1 մոլ լ−1 թրթնջուկային թթվով, որը 11.54%-ով ավելի բարձր էր, քան վերահսկիչինը (տե՛ս աղյուսակ 4):
Rb1-ի պարունակությունը սկզբում մեծացել է, ապա նվազել՝ թրթնջկաթթվով ցողման կոնցենտրացիայի աճին և 2250 կգ հմ-2 կրի կիրառման արագությանը զուգընթաց: 0.1 մոլ լ-1 թրթնջկաթթվով ցողելուց հետո Rb1-ի պարունակությունը հասել է առավելագույնը՝ 3.46%, որը 74.75%-ով ավելի է, քան առանց թրթնջկաթթվի ցողման: Կրի այլ մշակումների դեպքում թրթնջկաթթվի տարբեր կոնցենտրացիաների միջև էական տարբերություն չի եղել: 0.1 և 0.2 մոլ լ-1 թրթնջկաթով ցողելիս Rb1-ի պարունակությունը սկզբում նվազել է, ապա նվազել՝ ավելացված կրի քանակի աճին զուգընթաց (աղյուսակ 4):
Ցողված թրթնջուկաթթվի նույն կոնցենտրացիայի դեպքում ֆլավոնոիդների պարունակությունը սկզբում աճել է, ապա նվազել կրի կիրառման արագության ավելացման հետ մեկտեղ: Ոչ մի կիր կամ թրթնջուկաթթվի տարբեր կոնցենտրացիաներով ցողված 3750 կգ հմ-2 կրի դեպքում ֆլավոնոիդների պարունակությունը զգալիորեն տարբերվել է: Երբ կիրը կիրառվել է 750 և 2250 կգ հմ-2 արագությամբ, ֆլավոնոիդների պարունակությունը սկզբում աճել է, ապա նվազել թրթնջուկաթթվով ցողման կոնցենտրացիայի ավելացման հետ մեկտեղ: Երբ կիրը կիրառվել է 750 կգ հմ-2 արագությամբ և ցողվել է 0.1 մոլ լ-1 թրթնջուկաթթվով, ֆլավոնոիդների պարունակությունը եղել է ամենաբարձրը՝ կազմելով 4.38 մգ գ-1, ինչը 18.38%-ով ավելի է, քան նույն կիրառման արագությամբ կրի դեպքում՝ առանց թրթնջուկաթթվով ցողման: Թրթնջուկային թթվով 0.1 մոլ լ-1 ցողման ժամանակ ֆլավոնոիդների պարունակությունը աճել է 21.74%-ով՝ համեմատած առանց թրթնջուկային թթվով ցողման և 2250 կգ հմ-2 կրով մշակման հետ (Նկար 5):
Օքսալատի տերևային ցողման ազդեցությունը Panax notoginseng արմատներում ֆլավոնոիդների պարունակության վրա կադմիումային սթրեսի պայմաններում [J]:
Երկփուլային վերլուծությունը ցույց տվեց, որ Panax notoginseng-ի լուծվող շաքարի պարունակությունը զգալիորեն համընկնում էր կիրառվող կրի քանակի և ցողված թրթնջուկային թթվի կոնցենտրացիայի հետ։ Արմատային մշակաբույսերում լուծվող սպիտակուցի պարունակությունը զգալիորեն համընկնում էր կրի կիրառման արագության, ինչպես կրի, այնպես էլ թրթնջուկային թթվի կիրառման արագության հետ։ Արմատներում ազատ ամինաթթուների և պրոլինի պարունակությունը զգալիորեն համընկնում էր կրի կիրառման արագության, թրթնջուկային թթվով, կրով և թրթնջուկային թթվով ցողման կոնցենտրացիայի հետ (տե՛ս աղյուսակ 5):
Panax notoginseng-ի արմատներում R1-ի պարունակությունը զգալիորեն համընկնում էր թրթնջուկային թթվի ցողման կոնցենտրացիայի, օգտագործված կրի, կիրի և թրթնջուկային թթվի քանակի հետ։ Ֆլավոնոիդների պարունակությունը զգալիորեն համընկնում էր ցողված թրթնջուկային թթվի կոնցենտրացիայի և օգտագործված կրի քանակի հետ։
Բույսերի կադմիումի պարունակությունը հողում անշարժացնելու միջոցով Cd-ի պարունակությունը նվազեցնելու համար օգտագործվել են բազմաթիվ լրացումներ, ինչպիսիք են կրը և թրթնջուկային թթուն30: Կրը լայնորեն օգտագործվում է որպես հողի հավելանյութ՝ մշակաբույսերում կադմիումի պարունակությունը նվազեցնելու համար31: Լիանգը և այլք32 հաղորդել են, որ թրթնջուկային թթուն կարող է օգտագործվել նաև ծանր մետաղներով աղտոտված հողերը վերականգնելու համար: Տարբեր կոնցենտրացիաների թրթնջուկային թթու աղտոտված հողին կիրառելուց հետո հողի օրգանական նյութը մեծացել է, կատիոնների փոխանակման ունակությունը նվազել է, և pH-ի արժեքը բարձրացել է 33-ով: Թրթնջուկային թթուն կարող է նաև ռեակցիայի մեջ մտնել հողի մետաղական իոնների հետ: Cd սթրեսի տակ Panax notoginseng-ում Cd-ի պարունակությունը զգալիորեն աճել է վերահսկիչ խմբի համեմատ: Սակայն, երբ օգտագործվել է կիր, այն զգալիորեն նվազել է: Այս ուսումնասիրության մեջ, 750 կգ hm-2 կիր կիրառելիս, արմատում Cd-ի պարունակությունը հասել է ազգային ստանդարտին (Cd սահմանաչափ՝ Cd≤0.5 մգ/կգ, AQSIQ, GB/T 19086-200834), և 2250 կգ hm−2 կիր կիրառելիս ազդեցությունը լավագույնս է ստացվում կրի հետ միասին: Կրի կիրառումը հողում ստեղծել է Ca2+ և Cd2+ միջև մրցակցության մեծ թվով օջախներ, և թրթնջուկային թթվի ավելացումը կարող է նվազեցնել Cd-ի պարունակությունը Panax notoginseng-ի արմատներում: Այնուամենայնիվ, Panax notoginseng-ի արմատներում Cd-ի պարունակությունը զգալիորեն նվազել է կրի և թրթնջուկային թթվի համադրությամբ՝ հասնելով ազգային ստանդարտին: Հողի մեջ Ca2+-ը զանգվածային հոսքի ընթացքում ադսորբվում է արմատի մակերեսին և կարող է կլանվել արմատային բջիջների կողմից կալցիումական անցուղիների (Ca2+-անցուղիներ), կալցիումական պոմպերի (Ca2+-AT-Pase) և Ca2+/H+ հակապորտերների միջոցով, ապա հորիզոնականորեն տեղափոխվել արմատային քսիլեմ 23: Արմատային Ca-ի պարունակությունը զգալիորեն բացասականորեն կապված էր Cd-ի պարունակության հետ (P<0.05): Cd-ի պարունակությունը նվազում էր Ca-ի պարունակության աճի հետ, ինչը համապատասխանում է Ca-ի և Cd-ի անտագոնիզմի մասին կարծիքին: Վարիացիայի վերլուծությունը ցույց տվեց, որ կրի քանակը զգալիորեն ազդել է Panax notoginseng-ի արմատներում Ca-ի պարունակության վրա: Pongrac-ը և այլք 35-ը հայտնել են, որ Cd-ն կապվում է կալցիումի օքսալատի բյուրեղներում օքսալատի հետ և մրցակցում է Ca-ի հետ: Այնուամենայնիվ, Ca-ի կարգավորումը օքսալատի կողմից նշանակալի չէր: Սա ցույց տվեց, որ թրթնջկաթթվի և Ca2+-ի կողմից առաջացած կալցիումի օքսալատի նստվածքը պարզ նստվածք չէր, և համատեղ նստվածքի գործընթացը կարող է կառավարվել տարբեր նյութափոխանակության ուղիներով: