Շնորհակալություն Nature.com կայք այցելելու համար: Ձեր օգտագործած դիտարկիչի տարբերակն ունի CSS-ի սահմանափակ աջակցություն: Լավագույն արդյունքի հասնելու համար խորհուրդ ենք տալիս օգտագործել ձեր դիտարկիչի ավելի նոր տարբերակը (կամ անջատել համատեղելիության ռեժիմը Internet Explorer-ում): Մինչ այդ, շարունակական աջակցությունն ապահովելու համար, մենք կայքը ցուցադրում ենք առանց ոճավորման կամ JavaScript-ի:
Էսենցիալ դողի (ԷԴ) վաղ ախտորոշումը կարող է դժվար լինել, հատկապես, երբ այն տարբերակվում է առողջ վերահսկող խմբից (ՀԿ) և Պարկինսոնի հիվանդությամբ (ՊՀ): Վերջերս, կղանքի նմուշների աղիքային միկրոբիոտայի և դրա մետաբոլիտների վերլուծությունը նոր մեթոդներ է տրամադրել նեյրոդեգեներատիվ հիվանդությունների նոր բիոմարկերների հայտնաբերման համար: Կարճ շղթայով ճարպաթթուները (ԿՃՃԹ), որպես աղիքային միկրոֆլորայի հիմնական մետաբոլիտ, նվազում են կղանքում ՊՀ-ի դեպքում: Այնուամենայնիվ, կղանքի ԿՃՃԹ-ները երբեք չեն ուսումնասիրվել ԷԴ-ի դեպքում: Մեր նպատակն էր ուսումնասիրել ԿՃՃԹ-ների կղանքի մակարդակը ԷԴ-ի դեպքում, գնահատել դրանց կապը կլինիկական ախտանիշների և աղիքային միկրոբիոտայի հետ և որոշել դրանց հնարավոր ախտորոշիչ կարողությունը: Կղանքի ԿՃՃԹ-ն և աղիքային միկրոբիոտան չափվել են 37 ԷԴ-ի, 37 նոր ՊՀ-ի և 35 ՀԿ-ի մոտ: Փորկապությունը, ինքնավար դիսֆունկցիան և դողի ծանրությունը գնահատվել են սանդղակների միջոցով: Պրոպիոնատի, բուտիրատի և իզոբուտիրատի կղանքի մակարդակները ԷԴ-ի դեպքում ավելի ցածր էին, քան ՀԿ-ի դեպքում: Պրոպիոնիկ, կարագաթթու և իզոբարագաթթուների համադրությունը տարբերակում է էթիլային թթուն (ԷԹ) HC-ից՝ 0.751 AUC (95% CI: 0.634–0.867): Իզովալերաթթուների և իզոբարագաթթուների կղանքի մակարդակները ԷԹ-ի դեպքում ավելի ցածր էին, քան Պարկինսոնի հիվանդության դեպքում: Իզովալերաթթուն և իզոբարագաթթուն տարբերակում են ԷԹ-ն և Պարկինսոնի հիվանդությունը՝ 0.743 AUC (95% CI: 0.629–0.857) արժեքով: Կղանքի պրոպիոնատը հակադարձ համեմատական ​​է փորկապության և ինքնավար նյարդային համակարգի դիսֆունկցիայի հետ: Իզոբարագաթթուն և իզովալերաթթուն հակադարձ համեմատական ​​են դողի ծանրության հետ: Կղանքի մեջ SCFA պարունակության նվազումը կապված էր ԷԹ-ում Faecalibacterium և Streptobacterium առատության նվազման հետ: Այսպիսով, կղանքի մեջ SCFA պարունակությունը նվազում է ԷԹ-ի դեպքում և կապված է կլինիկական պատկերի ծանրության և աղիքային միկրոբիոտայի փոփոխությունների հետ: Կղանքի մեջ պրոպիոնաթթուն, կարագաթթուն, իզոբարագաթթուն և իզովալերաթթուն կարող են լինել էթոզի ախտորոշիչ և դիֆերենցիալ ախտորոշիչ բիոմարկերներ։
Էսենցիալ դողը (ԷԴ) պրոգրեսիվող, քրոնիկ նեյրոդեգեներատիվ խանգարում է, որը բնութագրվում է հիմնականում վերին վերջույթների դողով, որը կարող է ազդել նաև մարմնի այլ մասերի վրա, ինչպիսիք են գլուխը, ձայնալարերը և ստորին վերջույթները։1 ԷԴ-ի կլինիկական առանձնահատկությունները ներառում են ոչ միայն շարժիչ ախտանիշներ, այլև որոշ ոչ շարժիչ նշաններ, այդ թվում՝ ստամոքս-աղիքային հիվանդություն։2 Բազմաթիվ ուսումնասիրություններ են անցկացվել էսենցիալ դողի ախտաբանական և ֆիզիոլոգիական բնութագրերը ուսումնասիրելու համար, սակայն հստակ պաթոֆիզիոլոգիական մեխանիզմներ չեն հայտնաբերվել։3,4 Վերջին ուսումնասիրությունները ենթադրում են, որ միկրոբիոտա-աղիք-ուղեղ առանցքի դիսֆունկցիան կարող է նպաստել նեյրոդեգեներատիվ հիվանդություններին, և աճում են ապացույցները աղիքային միկրոբիոտայի և նեյրոդեգեներատիվ հիվանդությունների միջև հնարավոր երկկողմանի կապի մասին։5,6 Հատկանշական է, որ մեկ դեպքի զեկույցում կղանքի միկրոբիոտայի փոխպատվաստումը բարելավել է ինչպես էսենցիալ դողը, այնպես էլ գրգռված աղիքի համախտանիշը հիվանդի մոտ, ինչը կարող է վկայել աղիքային միկրոբիոտայի և էսենցիալ դողի միջև սերտ կապի մասին։ Բացի այդ, մենք նաև հայտնաբերել ենք աղիքային միկրոբիոտայի հատուկ փոփոխություններ ԷԴ-ով հիվանդների մոտ, ինչը հաստատում է աղիքային դիսբիոզի կարևոր դերը ԷԴ-ում։8
Նեյրոդեգեներատիվ հիվանդությունների դեպքում աղիքային դիսբիոզի վերաբերյալ Պարկինսոնի հիվանդությունը (ՊԴ) ամենատարածված ուսումնասիրությունն է5: Անհավասարակշիռ միկրոբիոտան կարող է մեծացնել աղիքային թափանցելիությունը և ակտիվացնել աղիքային գլիան, ինչը հանգեցնում է ալֆա-սինուկլեինոպաթիաների9,10,11: ՊԴ-ն և էթիլենային տրեմորը (ԷԹ) ունեն որոշակի համընկնող բնութագրեր, ինչպիսիք են ԷԹ-ով և ՊԴ-ով հիվանդների մոտ դողի նման հաճախականությունը, համընկնող հանգստի դողը (ՊԴ-ի բնորոշ դողը) և դիրքային դողը (հիմնականում հանդիպում է ԷԹ-ով հիվանդների մոտ), ինչը դժվարացնում է դրանց միջև տարբերակումը: 12. Հետևաբար, մենք շտապ պետք է բացենք օգտակար պատուհան՝ ԷԹ-ն և ՊԴ-ն տարբերակելու համար: Այս համատեքստում, ԷԹ-ում աղիքային դիսբիոզի և դրա հետ կապված մետաբոլիտների փոփոխությունների ուսումնասիրությունը և ՊԴ-ից դրանց տարբերությունների բացահայտումը կարող են դառնալ ԷԹ-ի ախտորոշման և դիֆերենցիալ ախտորոշման պոտենցիալ բիոմարկերներ:
Կարճ շղթայով ճարպաթթուները (ԿՃՃԹ) սննդային մանրաթելերի աղիքային բակտերիալ խմորման արդյունքում առաջացող հիմնական մետաբոլիտներն են և համարվում են, որ կարևոր դեր են խաղում աղիք-ուղեղ փոխազդեցություններում13,14: ԿՃՃԹ-ները կլանվում են հաստ աղիքի բջիջների կողմից և տեղափոխվում լյարդ՝ դարպասային երակային համակարգի միջոցով, և որոշ ԿՃՃԹ-ներ մտնում են համակարգային շրջանառության մեջ: ԿՃՃԹ-ները տեղային ազդեցություն ունեն աղիքային պատնեշի ամբողջականության պահպանման և աղիքային լորձաթաղանթի բնածին իմունիտետի խթանման վրա15: Դրանք նաև երկարատև ազդեցություն ունեն արյուն-ուղեղային պատնեշի (ՀՈւՊ) վրա՝ խթանելով ամուր միացման սպիտակուցները և ակտիվացնելով նեյրոնները՝ խթանելով G սպիտակուցին միացված ընկալիչները (ԳՊՌ)՝ ՀՈՒՊ-ը հատելու համար16: Ացետատը, պրոպիոնատը և բուտիրատը հաստ աղիքի ամենատարածված ԿՃՃԹ-ներն են: Նախորդ ուսումնասիրությունները ցույց են տվել քացախաթթուների, պրոպիոնաթթուների և բուտիրաթթուների կղանքային մակարդակի նվազում Պարկինսոնի հիվանդությամբ հիվանդների մոտ17: Այնուամենայնիվ, ԿՂԱԿԱՅԻՆ ԿՃՃԹ-ների մակարդակը երբեք չի ուսումնասիրվել ԷԹ-ով հիվանդների մոտ:
Այսպիսով, մեր ուսումնասիրությունը նպատակ ուներ բացահայտել կղանքի SCFA-ի կոնկրետ փոփոխությունները էթիլային անբավարարությամբ (ԷԹ) հիվանդների մոտ և դրանց տարբերությունները Պարկինսոնի հիվանդությամբ (ՊՀ) հիվանդների համեմատ, գնահատել կղանքի SCFA-ի կապը SCFA-ի և աղիքային միկրոբիոտայի կլինիկական ախտանիշների հետ, ինչպես նաև բացահայտել կղանքի նմուշների ախտորոշիչ և դիֆերենցիալ ախտորոշիչ պոտենցիալ հնարավորությունները: ԿԺՀԿ: ՊՀ-ի դեմ դեղամիջոցների հետ կապված շփոթեցնող գործոնները լուծելու համար մենք որպես հիվանդության վերահսկիչ խումբ ընտրել ենք նոր սկսվող Պարկինսոնի հիվանդությամբ հիվանդներին:
37 էթնոսաբույժների, 37 հիվանդ-հիվանդների և 35 առողջական խնդիրներ ունեցողների ժողովրդագրական և կլինիկական բնութագրերը ամփոփված են աղյուսակ 1-ում: Էթնոսաբույժները, հիվանդ-հիվանդները և առողջական խնդիրներ ունեցողները համապատասխանել են ըստ տարիքի, սեռի և մարմնի զանգվածի ինդեքսի: Երեք խմբերում ծխելու, ալկոհոլ օգտագործելու, սուրճ ու թեյ խմելու համանման համամասնություններ են եղել: Հիվանդության խմբում Վեքսների միավորը (P = 0.004) և HAMD-17 միավորը (P = 0.001) ավելի բարձր էին, քան առողջական խնդիրներ ունեցողների խմբինը, իսկ Էթնոսաբույժների խմբի HAMA միավորը (P = 0.011) և HAMD-17 միավորը (P = 0.011) ավելի բարձր էին, քան առողջական խնդիրներ ունեցողների խմբինը: Հիվանդության ընթացքը Էթնոսաբույժների խմբում զգալիորեն ավելի երկար էր, քան Հիվանդ-հիվանդների խմբում (P<0.001):
Կղանքի մեջ պրոպիոնաթթվի (P = 0.023), քացախաթթվի (P = 0.039), կարագաթթվի (P = 0.020), իզովալերաթթվի (P = 0.045) և իզոբուտիրաթթվի (P = 0.015) մակարդակների միջև նշանակալի տարբերություններ կային։ Հետագա հետազննման վերլուծության արդյունքում, էթիլային թերապիայի խմբում պրոպիոնաթթվի (P = 0.023), կարագաթթվի (P = 0.007) և իզոբուտիրաթթվի (P = 0.040) մակարդակները էթիլային թերապիայի խմբում զգալիորեն ցածր էին, քան ՀԿ խմբում։ Էթիլային թերապիայով հիվանդների մոտ իզովալերատի (P = 0.014) և իզոբուտիրատի (P = 0.005) մակարդակները ավելի ցածր էին, քան Պարկինսոնի հիվանդությամբ հիվանդների մոտ։ Բացի այդ, կղանքի մեջ պրոպիոնաթթվի (P = 0.013), քացախաթթվի (P = 0.016) և յուղաթթվի (P = 0.041) մակարդակները Պարկինսոնի հիվանդություն ունեցող հիվանդների մոտ ավելի ցածր էին, քան ՔԿ ունեցող հիվանդների մոտ (Նկար 1 և Լրացուցիչ աղյուսակ 1):
ag-ն ներկայացնում է համապատասխանաբար պրոպիոնաթթվի, քացախաթթվի, յուղաթթվի, իզովալերաթթվի, վալերաթթվի, կապրոաթթվի և իզոբարաթթվի խմբային համեմատություն: Երեք խմբերի միջև կղանքի մեջ պրոպիոնաթթվի, քացախաթթվի, յուղաթթվի, իզովալերաթթվի և իզոբարաթթվի մակարդակներում նշանակալի տարբերություններ կային: ԷԹ էսենցիալ դող, Պարկինսոնի հիվանդություն, առողջ HC վերահսկիչ, SCFA: Նշանակալի տարբերությունները նշված են *P < 0.05 և **P < 0.01 արժեքներով:
Հաշվի առնելով հիվանդության ընթացքի տարբերությունը էթիլային դիսֆունկցիայի (ԷԴ) և Պարկինսոնի հիվանդություն (ՊՀ) խմբերի միջև, մենք հետագա համեմատության համար թեստավորեցինք 33 վաղ ՊՀ ունեցող և 16 էթիլային դիսֆունկցիայով (ՀԻ) հիվանդների (հիվանդության ընթացքը ≤3 տարի) հիվանդների (Լրացուցիչ աղյուսակ 2): Արդյունքները ցույց տվեցին, որ ԷԴ-ի կղանքի մեջ պրոպիոնաթթվի պարունակությունը զգալիորեն ցածր էր, քան ՀԱ-ինը (P=0.015): Բութիրաթթվի և իզոբութիրաթթվի ԷԴ-ի և ՀԿ-ի միջև տարբերությունը նշանակալի չէր, բայց միտումը դեռևս նկատվում էր (P = 0.082): Էդիլային դիսբուտիրատի մակարդակը էդիլային դիսֆունկցիայով հիվանդների մոտ էդիլային դիսֆունկցիայով հիվանդների մոտ էդիլային դիսֆունկցիայով հիվանդների համեմատ (P = 0.030): Իզովալերաթթվի ԷԴ-ի և ՊՀ-ի միջև տարբերությունը նշանակալի չէր, բայց միտումը դեռևս նկատվում էր (P = 0.084): Պրոպիոնաթթվի (P = 0.023), քացախաթթվի (P = 0.020) և բութիրաթթվի (P = 0.044) մակարդակը զգալիորեն ցածր էր ՊՀ-ով հիվանդների մոտ, քան ՀԿ-ով հիվանդների մոտ: Այս արդյունքները (Լրացուցիչ նկար 1) ընդհանուր առմամբ համապատասխանում են հիմնական արդյունքներին: Ընդհանուր նմուշի և վաղ հիվանդների ենթախմբի միջև արդյունքների տարբերությունը կարող է պայմանավորված լինել ենթախմբի փոքր նմուշի չափսով, ինչը հանգեցնում է տվյալների ավելի ցածր վիճակագրական հզորության:
Հաջորդը մենք ուսումնասիրեցինք, թե արդյոք կղանքի մեջ SCFA մակարդակները կարող են տարբերակել էթիլային թթվով (ԷԹ) հիվանդներին CU կամ PD հիվանդներից: ROC վերլուծության համաձայն, պրոպիոնատի մակարդակների AUC տարբերությունը կազմել է 0.668 (95% CI: 0.538-0.797), ինչը հնարավորություն է տվել տարբերակել ԷԹ-ով հիվանդներին HC-ից: ԷԹ-ով և GC-ով հիվանդներին կարելի էր տարբերակել բուտիրատի մակարդակով՝ 0.685 AUC-ով (95% CI: 0.556–0.814): Իզոբութիրաթթվի մակարդակների տարբերությունները կարող են տարբերակել ԷԹ-ով հիվանդներին HC-ից՝ 0.655 AUC-ով (95% CI: 0.525–0.786): Պրոպիոնատի, բուտիրատի և իզոբուտիրատի մակարդակները համատեղելիս ստացվել է ավելի բարձր AUC՝ 0.751 (95% CI: 0.634–0.867), 74.3% զգայունությամբ և 72.9% յուրահատկությամբ (Նկար 2ա): ԷԹ-ով և Պարկինսոնի հիվանդությամբ հիվանդներին տարբերակելու համար իզովալերաթթվի մակարդակի AUC-ն կազմել է 0.700 (95% CI: 0.579–0.822), իսկ իզոբուտիրաթթվի մակարդակը՝ 0.718 (95% CI: 0.599–0.836): Իզովալերաթթվի և իզոբուտիրաթթվի մակարդակների համադրությունն ունեցել է ավելի բարձր AUC՝ 0.743 (95% CI: 0.629–0.857), զգայունություն՝ 74.3% և յուրահատկություն՝ 62.9% (Նկար 2բ): Բացի այդ, մենք ուսումնասիրեցինք, թե արդյոք Պարկինսոնի հիվանդությամբ հիվանդների կղանքում SCFA մակարդակները տարբերվում են վերահսկիչ խմբից: ROC վերլուծության համաձայն, Պարկինսոնի հիվանդությամբ հիվանդներին նույնականացնելու AUC-ն՝ հիմնված պրոպիոնաթթվի մակարդակի տարբերությունների վրա, կազմել է 0.687 (95% վստահության միջակայք՝ 0.559-0.814), 68.6% զգայունությամբ և 68.7% յուրահատկությամբ: Ացետատի մակարդակի տարբերությունները կարող են տարբերակել Պարկինսոնի հիվանդությամբ հիվանդներին քրոնիկ հիվանդներից՝ 0.674 AUC-ով (95% վստահության միջակայք՝ 0.542–0.805): Պարկինսոնի հիվանդությամբ հիվանդներին կարելի է տարբերակել կուտիկուլյոզից միայն բուտիրատի մակարդակով՝ 0.651 AUC-ով (95% վստահության միջակայք՝ 0.515–0.787): Պրոպիոնատի, ացետատի և բուտիրատի մակարդակները համատեղելիս ստացվել է 0.682 AUC (95% վստահության միջակայք՝ 0.553–0.811) (Նկար 2գ):
Ռուս Ուղղափառ Եկեղեցու խտրականությունը ԷԹ-ի և ՀԿ-ի նկատմամբ։ բ Ռուս Ուղղափառ Եկեղեցու խտրականությունը ԷԹ-ի և ՊՀ-ի նկատմամբ։ գ Ռուս Ուղղափառ Եկեղեցու խտրականությունը ՊՀ-ի և ՀԿ-ի նկատմամբ։ ԷԹ էսենցիալ դող, Պարկինսոնի հիվանդություն, առողջ ՀԿ-ի վերահսկում, SCFA։
ԷԹ-ով հիվանդների մոտ կղանքի մեջ իզոբուրիկ թթվի մակարդակը բացասաբար էր կապված FTM միավորի հետ (r = -0.349, P = 0.034), իսկ կղանքի մեջ իզովալերիկ թթվի մակարդակը բացասաբար էր կապված FTM միավորի հետ (r = -0.421, P = 0.001) և TETRAS միավորի հետ (r = -0.382, P = 0.020): ԷԹ-ով և Պարկինսոնի հիվանդությամբ հիվանդների մոտ կղանքի մեջ պրոպիոնատի մակարդակը բացասաբար էր կապված SCOPA-AUT միավորների հետ (r = -0.236, P = 0.043) (Նկար 3 և լրացուցիչ աղյուսակ 3): Հիվանդության ընթացքի և SCFA-ի միջև նշանակալի կապ չի հայտնաբերվել ո՛չ ԷԹ խմբում (P ≥ 0.161), ո՛չ էլ Պարկինսոնի հիվանդությամբ խմբում (P ≥ 0.246) (Լրացուցիչ աղյուսակ 4): Պարկինսոնի հիվանդությամբ (ՊՀ) հիվանդների մոտ կղանքի մեջ կապրոիկ թթվի մակարդակը դրականորեն կապված էր MDS-UPDRS միավորների հետ (r = 0.335, P = 0.042): Բոլոր մասնակիցների մոտ կղանքի մեջ պրոպիոնատի (r = −0.230, P = 0.016) և ացետատի (r = −0.210, P = 0.029) մակարդակները բացասականորեն կապված էին Վեքսների միավորների հետ (Նկար 3 և Լրացուցիչ աղյուսակ 3):
Կղանքի իզոբուտիրաթթվի մակարդակը բացասաբար էր կապված FTM միավորների հետ, իզովալերաթթուն՝ FTM և TETRAS միավորների հետ, պրոպիոնաթթուն՝ SCOPA-AUT միավորների հետ, կապրոիկ թթուն՝ դրականորեն էր կապված MDS-UPDRS միավորների հետ, իսկ պրոպիոնաթթուն՝ FTM և TETRAS միավորների հետ։ TETRAS-ը և քացախաթթուն բացասաբար էին կապված Վեքսների միավորի հետ։ MDS-UPDRS ասոցիացիայի կողմից հովանավորվող Պարկինսոնի հիվանդության միասնական գնահատման սանդղակի տարբերակը, Mini-Mental State Examination MMSE, Համիլթոնի դեպրեսիայի գնահատման սանդղակ HAMD-17, 17 կետ, Համիլթոնի անհանգստության գնահատման սանդղակ HAMA, HY Hoehn and Yahr փուլեր, SCFA, SCOPA – AUT Պարկինսոնի հիվանդության ինքնավար ախտանիշների արդյունքի սանդղակ, FTM Fana-Tolosa-Marin կլինիկական դողի գնահատման սանդղակ, TETRAS հետազոտական ​​խմբի (TRG) էական դողի գնահատման սանդղակ։ Նշանակալի տարբերությունները նշված են *P < 0.05 և **P < 0.01 սանդղակներով։
Մենք հետագայում ուսումնասիրեցինք աղիքային միկրոբիոտայի խտրական բնույթը՝ օգտագործելով LEfSE վերլուծությունը և ընտրեցինք սեռի հարաբերական առատության տվյալների մակարդակը հետագա վերլուծության համար: Համեմատություններ կատարվեցին ET-ի և HC-ի, ինչպես նաև ET-ի և PD-ի միջև: Այնուհետև Սփիրմանի կորելյացիոն վերլուծությունը կատարվեց երկու համեմատական ​​խմբերում աղիքային միկրոբիոտայի հարաբերական առատության և կղանքի SCFA մակարդակների վերաբերյալ:
Faecalibacterium (կապված է կարագաթթվի հետ, r = 0.408, P < 0.001), Lactobacillus (կապված է կարագաթթվի հետ, r = 0.283, P = 0.016), Streptobacterium (կապված է պրոպիոնաթթվի հետ, r = 0.327) առկա էին ET-ի և CA-ի վերլուծության մեջ, P = 0.005; կապված է կարագաթթվի հետ, r = 0.374, P = 0.001; կորելյացիա ունի իզոբուտիրաթթվի հետ, r = 0.329, P = 0.005), Howardella-ի (կորելյացիա ունի պրոպիոնաթթվի հետ, r = 0.242, P = 0.041), Raoultella-ի (կորելյացիա ունի պրոպիոնաթթվի հետ, r = 0.249, P = 0.035) և Candidatus Arthromitus-ի (կորելյացիա ունի իզոբուտիրաթթվի հետ, r = 0.302, P = 0.010) դեպքում ET-ում նկատվել է նվազում և դրականորեն կապված է եղել կղանքի մեջ SCFA-ների մակարդակի հետ: Այնուամենայնիվ, Stenotropomonas-ի առատությունը աճել է ET-ում և բացասականորեն կապված է եղել կղանքի մեջ իզոբուտիրատի մակարդակի հետ (r = -0.250, P = 0.034): FDR ճշգրտումից հետո միայն Faecalibacterium-ի, Catenibacter-ի և SCFA-ների միջև կորելյացիաները մնացել են նշանակալի (P ≤ 0.045) (Նկար 4 և Լրացուցիչ աղյուսակ 5):
ET-ի և HC-ի համակցված վերլուծություն: FDR ճշգրտումից հետո, Faecalibacterium-ի (դրականորեն կապված է բուտիրատի հետ) և Streptobacterium-ի (դրականորեն կապված է պրոպիոնատի, բուտիրատի և իզոբուտիրատի հետ) առատությունը նվազեցված էր ET-ում և դրականորեն կապված էր կղանքի մեջ SCFA-ների մակարդակի հետ: բ ET-ի և PD-ի համակցված վերլուծություն: FDR ճշգրտումից հետո, նշանակալի կապեր չեն հայտնաբերվել: ET էսենցիալ դող, Պարկինսոնի հիվանդություն, առողջ HC վերահսկիչ, SCFA: Նշանակալի տարբերությունները նշված են *P < 0.05 և **P < 0.01 թվերով:
Երբ վերլուծեցինք էթիլենային թթվի և Պարկինսոնի համադրությունը, պարզվեց, որ Clostridium trichophyton-ը բարձրացած է էթիլենային թթվի մեջ և կապված է կղանքի իզովալերաթթվի (r = -0.238, P = 0.041) և իզոբարագաթթվի (r = -0.257, P = 0.027) հետ։ FDR ճշգրտումից հետո երկուսն էլ մնացին նշանակալի (P≥0.295) (Նկար 4 և Լրացուցիչ աղյուսակ 5):
Այս ուսումնասիրությունը համապարփակ ուսումնասիրություն է, որն ուսումնասիրում է կղանքում կարճ շղթայով ճարպաթթուների (SCFA) մակարդակը և կապում այն ​​աղիքային միկրոբիոտայի փոփոխությունների և ախտանիշների ծանրության հետ՝ ԷԹ-ով հիվանդների մոտ՝ համեմատած ՔՀ և Պարկինսոնի հիվանդություն ունեցող հիվանդների հետ: Մենք պարզեցինք, որ կղանքում SCFA մակարդակը նվազել էր ԷԹ-ով հիվանդների մոտ և կապված էր կլինիկական ծանրության և աղիքային միկրոբիոտայի կոնկրետ փոփոխությունների հետ: Կարճ շղթայով ճարպաթթուների (SCFA) կուտակային մակարդակները տարբերակում են ԷԹ-ն ԳԿ-ից և Պարկինսոնի հիվանդությունից:
Համեմատած ԳԿ հիվանդների հետ, ԷԹ-ով հիվանդները ունեն պրոպիոնիկ, կարագաթթուների և իզոկարագաթթուների ավելի ցածր մակարդակներ կղանքում: Պրոպիոնիկ, կարագաթթուների և իզոկարագաթթուների համադրությունը կարող է տարբերակել ԷԹ-ն և ՀԿ-ն՝ AUC 0.751-ի (95% վստահության միջակայք՝ 0.634–0.867), զգայունության 74.3% և յուրահատկության 72.9% միջոցով, ինչը ցույց է տալիս դրանց օգտագործումը որպես ԷԹ-ի ախտորոշիչ բիոմարկերների պոտենցիալ դեր: Հետագա վերլուծությունը ցույց տվեց, որ կղանքում պրոպիոնիկ թթվի մակարդակը բացասական կապ ունի Վեքսների և SCOPA-AUT միավորների հետ: Կղանքում իզոկարագաթթուների մակարդակը հակադարձ համեմատական ​​է FTM միավորների հետ: Մյուս կողմից, ԷԹ-ում բուտիրատի մակարդակի նվազումը կապված էր SCFA արտադրող միկրոբիոտայի՝ Faecalibacterium-ի և Categorybacter-ի առատության նվազման հետ: Բացի այդ, ԷԹ-ում Catenibacter առատության նվազումը կապված էր նաև կղանքում պրոպիոնիկ և իզոկարագաթթուների մակարդակի նվազման հետ:
Հաստ աղիքում արտադրվող SCFA-ների մեծ մասը կլանվում է հաստ աղիքի բջիջների կողմից հիմնականում H+-կախյալ կամ նատրիում-կախյալ մոնոկարբօքսիլատային փոխադրիչների միջոցով: Կլանված կարճ շղթայով ճարպաթթուները օգտագործվում են որպես էներգիայի աղբյուր հաստ աղիքի բջիջների համար, մինչդեռ նրանք, որոնք չեն մետաբոլիզացվում հաստ աղիքի բջիջներում, տեղափոխվում են դարպասային շրջանառության մեջ 18: SCFA-ները կարող են ազդել աղիքային շարժունակության վրա, բարելավել աղիքային պատնեշի գործառույթը և ազդել տիրոջ նյութափոխանակության և իմունիտետի վրա 19: Նախկինում պարզվել է, որ բուտիրատի, ացետատի և պրոպիոնատի կղանքի կոնցենտրացիաները նվազել են ՊՀ հիվանդների մոտ՝ համեմատած ՀԿ-ների հետ 17, ինչը համապատասխանում է մեր արդյունքներին: Մեր ուսումնասիրությունը ցույց է տվել SCFA-ի նվազում էթիլային էթիլային դիսֆունկցիայով հիվանդների մոտ, սակայն քիչ բան է հայտնի SCFA-ի դերի մասին թիթեղային էթիլային դիսֆունկցիայի պաթոլոգիայում: Բուտիրատը և պրոպիոնատը կարող են կապվել GPCR-ների հետ և ազդել GPCR-կախյալ ազդանշանային ուղու վրա, ինչպիսիք են MAPK և NF-κB20 ազդանշանային ուղու վրա: Աղիք-ուղեղ առանցքի հիմնական հայեցակարգն այն է, որ աղիքային միկրոօրգանիզմների կողմից արտազատվող SCFA-ները կարող են ազդել տիրոջ ազդանշանային ուղու վրա, դրանով իսկ ազդելով աղիների և ուղեղի ֆունկցիայի վրա: Քանի որ բուտիրատը և պրոպիոնատը հզոր արգելակող ազդեցություն ունեն հիստոն դեացետիլազի (HDAC) ակտիվության վրա21, իսկ բուտիրատը կարող է նաև հանդես գալ որպես տրանսկրիպցիոն գործոնների լիգանդ, դրանք լայն ազդեցություն ունեն տիրոջ նյութափոխանակության, դիֆերենցիացիայի և բազմացման վրա, հիմնականում գեների կարգավորման վրա ունեցած իրենց ազդեցության շնորհիվ22: Հիմնվելով SCFA-ի և նեյրոդեգեներատիվ հիվանդությունների ապացույցների վրա, բուտիրատը համարվում է թերապևտիկ թեկնածու՝ HDAC ակտիվության խանգարումը շտկելու իր ունակության շնորհիվ, որը կարող է միջնորդել դոպամիներգիկ նեյրոնների մահը PD-ի դեպքում23,24,25: Կենդանիների վրա կատարված ուսումնասիրությունները նաև ցույց են տվել բութիրաթթվի ունակությունը՝ կանխելու դոպամիներգիկ նեյրոնների դեգեներացիան և բարելավելու շարժողական խանգարումները PD մոդելներում26,27: Պարզվել է, որ պրոպիոնաթթուն սահմանափակում է բորբոքային պատասխանները և պաշտպանում է BBB-ի ամբողջականությունը28,29: Ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ պրոպիոնաթթուն նպաստում է դոպամիներգիկ նեյրոնների գոյատևմանը՝ ի պատասխան ռոտենոնի թունավորման PD մոդելներում30, և որ պրոպիոնաթթվի բանավոր ընդունումը փրկում է դոպամիներգիկ նեյրոնների կորստից և շարժողական դեֆիցիտներից PD-ով մկների մոտ31: Իզոբութիրաթթվի ֆունկցիայի մասին քիչ բան է հայտնի: Այնուամենայնիվ, վերջերս կատարված ուսումնասիրությունը ցույց է տվել, որ մկների B. ovale-ով գաղութացումը մեծացրել է աղիքային SCFA-ի պարունակությունը (ներառյալ ացետատը, պրոպիոնատը, իզոբուտիրատը և իզովալերատը) և աղիքային GABA-ի կոնցենտրացիան, ընդգծելով, որ կապ է հաստատվել աղիքային միկրոբիոտայի և աղիքային SCFA-ի կոնցենտրացիաների միջև: 32. ET-ի դեպքում ուղեղիկի աննորմալ պաթոլոգիական փոփոխությունները ներառում են Պուրկինյեի բջիջների աքսոնների և դենդրիտների փոփոխություններ, Պուրկինյեի բջիջների տեղաշարժ և կորուստ, զամբյուղային բջիջների աքսոնների փոփոխություններ և Պուրկինյեի բջիջների կորիզների հետ վերելքի մանրաթելային կապերի աննորմալություններ, ինչը հանգեցնում է ուղեղիկից GABAերգիկ արտադրանքի նվազմանը3,4,33: Մնում է անհասկանալի, թե արդյոք SCFA-ները կապված են Պուրկինյեի բջիջների նեյրոդեգեներացիայի և ուղեղիկի GABA արտադրության նվազման հետ: Մեր արդյունքները ենթադրում են SCFA-ի և ET-ի միջև սերտ կապ. սակայն, լայնական հատույթի ուսումնասիրության դիզայնը թույլ չի տալիս որևէ եզրակացություն անել SCFA-ի և ET հիվանդության գործընթացի միջև պատճառահետևանքային կապի վերաբերյալ: Անհրաժեշտ են հետագա երկայնական հետևողական ուսումնասիրություններ, այդ թվում՝ կղանքի մեջ SCFA-ների սերիական չափումներ, ինչպես նաև մեխանիզմները ուսումնասիրող կենդանիների վրա կատարված ուսումնասիրություններ։
Ենթադրվում է, որ SCFA-ները խթանում են հաստ աղիքի հարթ մկանների կծկվողականությունը34: SCFA-ի պակասը կվատթարացնի փորկապության ախտանիշները, իսկ SCFA-ի հավելումը կարող է բարելավել փորկապության PD ախտանիշները35: Մեր արդյունքները նաև ցույց են տալիս նշանակալի կապ կղանքի SCFA-ի պարունակության նվազման և փորկապության աճի ու ինքնավար նյարդային համակարգի դիսֆունկցիայի միջև էթիլային դիսֆունկցիայով հիվանդների մոտ: Մեկ դեպքի զեկույցում պարզվել է, որ միկրոբիոտայի փոխպատվաստումը բարելավել է ինչպես էսենցիալ դողը, այնպես էլ գրգռված աղիքի համախտանիշը 7-րդ հիվանդի մոտ, ինչը լրացուցիչ ենթադրում է աղիքային միկրոբիոտայի և էթիլային դիսֆունկցիայի միջև սերտ կապ: Հետևաբար, մենք կարծում ենք, որ կղանքի SCFA/միկրոբիոտան կարող է ազդել տիրոջ աղիքային շարժունակության և ինքնավար նյարդային համակարգի գործառույթի վրա:
Ուսումնասիրությունը պարզել է, որ էթիլային թթուներում կղանքի մեջ SCFA-ների մակարդակի նվազումը կապված էր Faecalibacterium-ի (կապված բուտիրատի հետ) և Streptobacterium-ի (կապված պրոպիոնատի, բուտիրատի և իզոբուտիրատի հետ) առատության նվազման հետ: FDR շտկումից հետո այս կապը մնում է նշանակալի: Faecalibacterium-ը և Streptobacterium-ը SCFA արտադրող միկրոօրգանիզմներ են: Faecalibacterium-ը հայտնի է որպես բուտիրատ արտադրող միկրոօրգանիզմ36, մինչդեռ Catenibacter խմորման հիմնական արգասիքներն են ացետատը, բուտիրատը և կաթնաթթուն37: Faecalibacterium-ը հայտնաբերվել է և՛ ET, և՛ HC խմբերի 100%-ում. ET խմբի միջին հարաբերական առատությունը կազմել է 2.06%, իսկ HC խմբինը՝ 3.28% (LDA 3.870): Այս կատեգորիայի մանրէները հայտնաբերվել են HC խմբի 21.6%-ում (8/37) և ET խմբի միայն 1 նմուշում (1/35): Ստրեպտոբակտերիաների նվազումը և չհայտնաբերվելը էթիլային թթուներում կարող է նաև վկայել հիվանդության պաթոգենության հետ կապի մասին: Catenibacter տեսակների միջին հարաբերական առատությունը HC խմբում կազմել է 0.07% (LDA 2.129): Բացի այդ, կաթնաթթվային մանրէները կապված են եղել կղանքի բուտիրատի փոփոխությունների հետ (P=0.016, P=0.096 FDR ճշգրտումից հետո), իսկ արթրիտի թեկնածուն կապված է եղել իզոբուտիրատի փոփոխությունների հետ (P=0.016, P=0.072 FDR ճշգրտումից հետո): FDR ճշգրտումից հետո մնում է միայն կոռելյացիայի միտումը, որը վիճակագրորեն նշանակալի չէ: Լակտոբասիլները հայտնի են նաև որպես SCFA (քացախաթթու, պրոպիոնաթթու, իզոբութիրաթթու, բութիրաթթու) արտադրողներ 38, իսկ Candidatus Arthromitus-ը T helper 17 (Th17) բջիջների դիֆերենցիացիայի յուրահատուկ ինդուկտոր է, որտեղ Th1/2-ը և Treg-ները կապված են իմունային հավասարակշռության /Th1739 հետ: Վերջերս կատարված ուսումնասիրությունը ենթադրում է, որ կղանքի պսևդոարթրիտի բարձր մակարդակը կարող է նպաստել հաստ աղիքի բորբոքմանը, աղիքային պատնեշի դիսֆունկցիային և համակարգային բորբոքմանը։40 Clostridium trichophyton-ի մակարդակը բարձրացել է էթիլային անբավարարության (ԷԹ) դեպքում՝ համեմատած Պարկինսոնի հիվանդության (ՊՀ) հետ։ Պարզվել է, որ Clostridium trichoides-ի առատությունը բացասական կապ ունի իզովալերաթթվի և իզոբութիրաթթվի հետ։ FDR ճշգրտումից հետո երկուսն էլ մնացել են նշանակալի (P≥0.295)։ Clostridium pilosum-ը մանրէ է, որը հայտնի է, որ կապված է բորբոքման հետ և կարող է նպաստել աղիքային պատնեշի դիսֆունկցիային։41 Մեր նախորդ ուսումնասիրությունը հայտնել է ԷԹ-ով հիվանդների աղիքային միկրոբիոտայի փոփոխությունների մասին։ Այստեղ մենք նաև ներկայացնում ենք ԷԹ-ի դեպքում SCFA-ների փոփոխությունները և բացահայտում ենք աղիքային դիսբիոզի և SCFA-ների փոփոխությունների միջև կապը։ SCFA-ների մակարդակի նվազումը սերտորեն կապված է ԷԹ-ի դեպքում աղիքային դիսբիոզի և դողի ծանրության հետ։ Մեր արդյունքները ենթադրում են, որ աղիք-ուղեղ առանցքը կարող է կարևոր դեր խաղալ ԷԹ-ի ախտածագման մեջ, սակայն կենդանիների մոդելների վրա անհրաժեշտ են հետագա ուսումնասիրություններ։
Հիվանդների համեմատ, ովքեր տառապում են Պարկինսոնի հիվանդությամբ (ՊՀ), էթիլային կաթվածով (ԷԹ) հիվանդների կղանքում իզովալերիկ և իզոկարագաթթուների ավելի ցածր մակարդակներ կան: Իզովալերիկ թթվի և իզոկարագաթթվի համադրությունը ՊՀ-ում ԷԹ-ն նույնականացրել է 0.743 AUC-ով (95% վստահության միջակայք՝ 0.629–0.857), զգայունությամբ՝ 74.3% և յուրահատկությամբ՝ 62.9%, ինչը ենթադրում է դրանց հնարավոր դերը որպես բիոմարկերներ ԷԹ-ի դիֆերենցիալ ախտորոշման մեջ: Կղանքի իզովալերիկ թթվի մակարդակը հակադարձ համեմատական ​​էր FTM և TETRAS միավորների հետ: Կղանքի իզովալերիկ թթվի մակարդակը հակադարձ համեմատական ​​էր FTM միավորների հետ: Իզովալերիկ թթվի մակարդակի նվազումը կապված էր կատուբակտերիաների առատության նվազման հետ: Իզովալերիկ թթվի և իզոկարագաթթվի գործառույթների մասին քիչ բան է հայտնի: Նախորդ ուսումնասիրությունը ցույց է տվել, որ մկների Bacteroides ovale-ով գաղութացումը մեծացրել է աղիքային SCFA-ի (ներառյալ ացետատը, պրոպիոնատը, իզոբուտիրատը և իզովալերատը) պարունակությունը և աղիքային GABA-ի կոնցենտրացիաները, ընդգծելով միկրոբիոտայի և աղիքային SCFA/նեյրոհաղորդիչների կոնցենտրացիաների միջև աղիքային կապը32: Հետաքրքիր է, որ դիտարկված իզոբուտիրաթթվի մակարդակները նման էին PD և HC խմբերի միջև, բայց տարբերվում էին ET և PD (կամ HC) խմբերի միջև: Իզոբուտիրաթթվը կարող էր տարբերակել ET-ն և PD-ն AUC-ով 0.718 (95% CI: 0.599–0.836) և նույնականացնել ET-ն և NC-ն AUC-ով 0.655 (95% CI: 0.525–0.786): Բացի այդ, իզոբուտիրաթթվի մակարդակը կապված է դողի ծանրության հետ, ինչը հետագայում ամրապնդում է դրա կապը ET-ի հետ: Այն հարցը, թե արդյոք բանավոր ընդունվող իզոբուտիրաթթվը կարող է նվազեցնել դողի ծանրությունը ET-ով հիվանդների մոտ, արժանի է հետագա ուսումնասիրության:
Այսպիսով, կղանքի մեջ SCFA-ների պարունակությունը նվազում է էթիլային թթվով հիվանդների մոտ և կապված է էթիլային թթվի կլինիկական ծանրության և աղիքային միկրոբիոտայի յուրահատուկ փոփոխությունների հետ: Կղանքի պրոպիոնատը, բուտիրատը և իզոբուտիրատը կարող են լինել էթիլային թթվի ախտորոշիչ բիոմարկերներ, մինչդեռ իզոբուտիրատը և իզովալերատը կարող են լինել էթիլային թթվի դիֆերենցիալ ախտորոշիչ բիոմարկերներ: Կղանքի մեջ իզոբուտիրատի փոփոխությունները կարող են ավելի յուրահատուկ լինել էթիլային թթվի համար, քան մյուս SCFA-ների փոփոխությունները:
Մեր ուսումնասիրությունն ունի մի քանի սահմանափակումներ: Նախ, սննդակարգը և սննդի նախասիրությունները կարող են ազդել միկրոբիոտայի արտահայտման վրա, անհրաժեշտ են ուսումնասիրության ավելի մեծ նմուշներ տարբեր պոպուլյացիաներում, և ապագա ուսումնասիրությունները պետք է ներդնեն համապարփակ և համակարգված սննդային հարցումներ, ինչպիսիք են սննդի հաճախականության հարցաթերթիկները: Երկրորդ, լայնական հատվածային ուսումնասիրության դիզայնը բացառում է որևէ եզրակացություն SCFA-ների և էթիլային ճարպի զարգացման միջև պատճառահետևանքային կապի վերաբերյալ: Անհրաժեշտ են հետագա երկարաժամկետ հետևողական ուսումնասիրություններ՝ կղանքի SCFA-ների շարքային չափումներով: Երրորդ, կղանքի SCFA մակարդակների ախտորոշիչ և դիֆերենցիալ ախտորոշիչ հնարավորությունները պետք է վավերացվեն էթիլային ճարպից, քրոնիկ հիվանդից և պարանոցի հիվանդներից անկախ նմուշների միջոցով: Ապագայում պետք է ստուգվեն ավելի շատ անկախ կղանքի նմուշներ: Վերջապես, մեր խմբում ՊՀ ունեցող հիվանդներն ունեին հիվանդության զգալիորեն ավելի կարճ տևողություն, քան էթիլային ճարպով հիվանդները: Մենք հիմնականում համապատասխանեցրինք էթիլային ճարպը, ՊՀ-ն և քրոնիկ հիվանդները ըստ տարիքի, սեռի և մարմնի զանգվածի ինդեքսի: Հաշվի առնելով էթիլային ճարպի և պարանոցի հիվանդությամբ խմբի միջև հիվանդության ընթացքի տարբերությունը, մենք նաև ուսումնասիրեցինք վաղ ՊՀ ունեցող 33 հիվանդի և էթիլային ճարպով (հիվանդության տևողությունը ≤3 տարի) 16 հիվանդի՝ հետագա համեմատության համար: Խմբերի միջև SCFA-ի տարբերությունները ընդհանուր առմամբ համապատասխանում էին մեր առաջնային տվյալներին: Բացի այդ, մենք որևէ կապ չենք հայտնաբերել հիվանդության տևողության և SCFA-ի փոփոխությունների միջև: Այնուամենայնիվ, ապագայում լավագույնը կլինի ներգրավել ՊՀ և ԷԹ ունեցող հիվանդներին վաղ փուլում՝ հիվանդության ավելի կարճ տևողությամբ՝ ավելի մեծ նմուշում վավերացումն ավարտելու համար:
Ուսումնասիրության արձանագրությունը հաստատվել է Շանհայի Ջիաո Տուն համալսարանի բժշկական դպրոցի հետ կապված Ռուիջին հիվանդանոցի էթիկայի կոմիտեի կողմից (RHEC2018-243): Բոլոր մասնակիցներից ստացվել է գրավոր տեղեկացված համաձայնություն:
2019 թվականի հունվարից մինչև 2022 թվականի դեկտեմբերը այս ուսումնասիրությանը մասնակցել է Շանհայի Ջիաո Տուն համալսարանի բժշկական դպրոցի Ռուիջին հիվանդանոցի շարժողական խանգարումների կենտրոնի կլինիկայի 109 մասնակից (37 թոքային խանգարումներով, 37 հիվանդությամբ և 35 հիվանդությամբ): Չափանիշներն էին՝ (1) տարիքը՝ 25-85 տարեկան, (2) թոքային խանգարումներով հիվանդների մոտ ախտորոշվել է ՄԴՍ աշխատանքային խմբի չափանիշների 42 համաձայն, իսկ հիվանդի մոտ ախտորոշվել է ՄԴՍ չափանիշների 43 համաձայն, (3) բոլոր հիվանդները չեն ընդունել հակաթոքային դեղամիջոցներ նախքան նմուշների հավաքումը: (4) թոքային խանգարումներով խումբը կղանքի նմուշներ հավաքելուց առաջ ընդունել է միայն β-ադրենոբլոկատորներ կամ ոչ մի կապակցված դեղամիջոց: Ընտրվել են նաև տարիքին, սեռին և մարմնի զանգվածի ինդեքսին (BMI) համապատասխանող հիվանդներ: Բացառման չափանիշներն էին՝ (1) բուսակերներ, (2) վատ սնուցում, (3) ստամոքս-աղիքային համակարգի քրոնիկ հիվանդություններ (ներառյալ բորբոքային աղիքային հիվանդությունները, ստամոքսի կամ տասներկումատնյա աղիքի խոցը), (4) ծանր քրոնիկ հիվանդություններ (ներառյալ չարորակ ուռուցքները), սրտի անբավարարություն, երիկամային անբավարարություն, արյունաբանական հիվանդություններ (5) ստամոքս-աղիքային համակարգի լուրջ վիրահատությունների պատմություն, (6) մածունի քրոնիկ կամ կանոնավոր օգտագործում, (7) ցանկացած պրոբիոտիկի կամ հակաբիոտիկի օգտագործում 1 ամսվա ընթացքում, (8) կորտիկոստերոիդների, պրոտոնային պոմպի ինհիբիտորների, ստատինների, մետֆորմինի, իմունաճնշիչների կամ հակաքաղցկեղային դեղամիջոցների քրոնիկ օգտագործում և (9) ծանր ճանաչողական խանգարում, որը խանգարում է կլինիկական փորձարկումներին:
Բոլոր մասնակիցները տրամադրել են բժշկական պատմություն, քաշի և հասակի մասին տեղեկություններ՝ մարմնի զանգվածի ինդեքսը (ՄԶԻ) հաշվարկելու համար, և ենթարկվել են նյարդաբանական հետազոտության և կլինիկական գնահատման, ինչպիսիք են Համիլթոնի անհանգստության գնահատման սանդղակը (HAMA)44 անհանգստության միավորը, Համիլթոնի դեպրեսիայի գնահատման սանդղակ-17 միավորը (HAMD-17)45, դեպրեսիան, փորկապության ծանրությունը՝ օգտագործելով Վեքսների փորկապության սանդղակը46 և Բրիստոլի կղանքի սանդղակը47, և ճանաչողական կատարողականը՝ օգտագործելով մինի-մտավոր վիճակի հետազոտությունը (MMSE)48: Պարկինսոնի հիվանդության ինքնավար ախտանիշների գնահատման սանդղակը (SCOPA-AUT)49 ուսումնասիրել է ինքնավար նյարդային համակարգի դիսֆունկցիան էթինեֆրինով և Պարկինսոնի հիվանդության (PD) հիվանդների մոտ: Էթինեֆրինով հիվանդների մոտ ուսումնասիրվել են Ֆան-Տոլոս-Մարինի կլինիկական դողի գնահատման սանդղակը (FTM) և էական դողի գնահատման սանդղակը (TETRAS)50: Դողի ուսումնասիրության խումբը (TRG)50: Ուսումնասիրվել են Միացյալ Պարկինսոնի հիվանդության ասոցիացիայի կողմից հովանավորվող Քինսոնի հիվանդության գնահատման սանդղակը (MDS-UPDRS) 51 տարբերակով և Հոեն և Յահր (HY) 52 աստիճանով:
Յուրաքանչյուր մասնակցի խնդրվել է առավոտյան կղանքի նմուշ հավաքել՝ օգտագործելով կղանքի հավաքման տարա։ Մշակելուց առաջ տարաները տեղափոխել սառույցի մեջ և պահել -80°C ջերմաստիճանում։ SCFA վերլուծությունը կատարվել է Tiangene Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.-ի սովորական գործողությունների համաձայն։ Յուրաքանչյուր մասնակցից հավաքվել է 400 մգ թարմ կղանքի նմուշ և վերլուծվել է SCFA-ների միջոցով՝ մանրացումից և նախնական ուլտրաձայնային մշակումից հետո։ Կղանքի մեջ ընտրված SCFA-ները վերլուծվել են գազային քրոմատոգրաֆիա-զանգվածային սպեկտրոմետրիա (GC-MS) և հեղուկ քրոմատոգրաֆիա-տանդեմ MS (LC-MS/MS) միջոցով։
ԴՆԹ-ն 200 մգ նմուշներից արդյունահանվել է QIAamp® Fast DNA Stool Mini Kit-ի (QIAGEN, Հիլդեն, Գերմանիա) միջոցով՝ համաձայն արտադրողի հրահանգների: Մանրէային կազմը որոշվել է կղանքից մեկուսացված ԴՆԹ-ի վրա 16 S rRNA գենի հաջորդականացման միջոցով՝ V3-V4 շրջանը ամպլիֆիկացնելով: ԴՆԹ-ն փորձարկվել է՝ նմուշը գործարկելով 1.2% ագարոզային գելի վրա: 16S rRNA գենի պոլիմերազային շղթայական ռեակցիայի (PCR) ամպլիֆիկացիան իրականացվել է ունիվերսալ բակտերիալ պրայմերների (357 F և 806 R) և Novaseq հարթակի վրա կառուցված երկփուլ ամպլիկոնային գրադարանի միջոցով:
Անընդհատ փոփոխականները արտահայտվում են որպես միջին ± ստանդարտ շեղում, իսկ կատեգորիկ փոփոխականները՝ որպես թվեր և տոկոսներ: Մենք օգտագործել ենք Լևենի թեստը՝ դիսպերսիաների միատարրությունը ստուգելու համար: Համեմատությունները կատարվել են երկկողմանի t թեստերի կամ դիսպերսիայի վերլուծության (ANOVA) միջոցով, եթե փոփոխականները նորմալ բաշխված էին, և ոչ պարամետրիկ Մանն-Ուիթնիի U թեստերի միջոցով, եթե խախտվել են նորմալության կամ հոմոսկեդաստիկության ենթադրությունները: Մենք օգտագործել ենք ընդունիչի գործող բնութագրի (ROC) կորի տակ գտնվող մակերեսը (AUC)՝ մոդելի ախտորոշիչ կատարողականությունը քանակականացնելու և SCFA-ի՝ էթինեֆիցիտով հիվանդներին HC կամ PD-ով հիվանդներին տարբերակելու ունակությունը ուսումնասիրելու համար: SCFA-ի և կլինիկական ծանրության միջև կապը ուսումնասիրելու համար մենք օգտագործել ենք Սփիրմանի կորելյացիոն վերլուծությունը: Վիճակագրական վերլուծությունը կատարվել է SPSS ծրագրաշարի միջոցով (տարբերակ 22.0; SPSS Inc., Չիկագո, Իլինոյս)՝ նշանակալիության մակարդակով (ներառյալ P արժեքը և FDR-P-ն) սահմանված 0.05 (երկկողմանի):
16 S հաջորդականությունները վերլուծվել են Trimmomatic (տարբերակ 0.35), Flash (տարբերակ 1.2.11), UPARSE (տարբերակ v8.1.1756), mothur (տարբերակ 1.33.3) և R (տարբերակ 3.6.3) ծրագրերի համադրությամբ: 16S rRNA գեների հում տվյալները մշակվել են UPARSE-ի միջոցով՝ 97% նույնականությամբ օպերացիոն տաքսոնոմիկ միավորներ (OTU) ստեղծելու համար: Տաքսոնոմիաները նշվել են՝ օգտագործելով Silva 128-ը որպես հղման տվյալների բազա: Հետագա վերլուծության համար ընտրվել է հարաբերական առատության տվյալների ընդհանուր մակարդակը: Գծային դիսկրիմինանտ վերլուծության (LDA) էֆեկտի չափի վերլուծությունը (LEfSE) օգտագործվել է խմբերի միջև համեմատությունների համար (ET vs. HC, ET vs. PD)՝ 0.05 α շեմով և 2.0 էֆեկտի չափի շեմով: LEfSE վերլուծությամբ նույնականացված դիսկրիմինանտ սեռերը հետագայում օգտագործվել են SCFA-ի Սփիրմանի կոռելյացիոն վերլուծության համար:
Ուսումնասիրության դիզայնի վերաբերյալ լրացուցիչ տեղեկությունների համար տե՛ս այս հոդվածին կից «Բնական հետազոտությունների զեկույցի ամփոփագիրը»։
16S հաջորդականության հում տվյալները պահվում են Կենսատեխնոլոգիական տեղեկատվության ազգային կենտրոնի (NCBI) BioProject տվյալների բազայում (SRP438900: PRJNA974928), URL: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Traces/study/?acc= SRP438900&o. =acc_s% 3Aa: Այլ համապատասխան տվյալներ հասանելի են համապատասխան հեղինակին ողջամիտ պահանջի դեպքում, ինչպիսիք են գիտական ​​համագործակցությունները և ակադեմիական փոխանակումները լիարժեք հետազոտական ​​նախագծերի հետ: Տվյալների փոխանցումը երրորդ կողմերին առանց մեր համաձայնության թույլատրված չէ:
Բաց կոդ միայն Trimmomatic-ի (տարբերակ 0.35), Flash-ի (տարբերակ 1.2.11), UPARSE-ի (տարբերակ v8.1.1756), mothur-ի (տարբերակ 1.33.3) և R-ի (տարբերակ 3.6.3) համադրությամբ՝ օգտագործելով լռելյայն կարգավորումները կամ «Մեթոդ» բաժինը։ Լրացուցիչ պարզաբանող տեղեկություններ կարող են տրամադրվել համապատասխան հեղինակին՝ համապատասխան պահանջի դեպքում։
Պրադիպ Ս. և Մեհաննա Ռ. Ստամոքս-աղիքային խանգարումներ հիպերկինետիկ շարժողական խանգարումների և ատաքսիայի դեպքում: Կապված Պարկինսոնի հիվանդության հետ: Շփոթվածություն: 90, 125–133 (2021):
Լուիս, Է.Դ. և Ֆաուստ, Պ.Լ. Էսենցիալ դողի ախտաբանություն. նեյրոդեգեներացիա և նեյրոնային կապերի վերակազմակերպում: Nat. Pastor Nirol. 16, 69–83 (2020):
Ջիրոնել, Ա. Էսենցիալ դողը ԳԱԿԱ դիսֆունկցիայի առաջնային խանգարում է՞: Այո: միջազգայինություն: Rev. Neuroscience. 163, 259–284 (2022):
Դոգրա Ն., Մանի ՌՋ և Կատարա ԴՊ Աղիք-ուղեղ առանցքը. Պարկինսոնի հիվանդության դեպքում ազդանշանային երկու եղանակներ: Բջջային մոլեկուլներ: Նեյրոկենսաբանություն: 42, 315–332 (2022):
Քուիգլի, EMM: Միկրոբիոտա-ուղեղ-աղիք առանցքը և նեյրոդեգեներատիվ հիվանդությունները: current: Նելլոր: Նեյրոգիտություն: Հաշվետվություններ 17, 94 (2017):
Լյու, Շ.Ջ., Վու, Լ.Հ., Շիե, Վ.Ռ. և Հե, XX։ Կղանքի միկրոբիոտայի փոխպատվաստումը միաժամանակ բարելավում է էսենցիալ դողը և գրգռված աղիքի համախտանիշը հիվանդների մոտ։ Geriatric Psychology 20, 796–798 (2020)։
Չժան Պ. և այլք։ Աղիքային միկրոբիոտայի յուրահատուկ փոփոխություններ էսենցիալ դողի ժամանակ և դրանց տարբերակումը Պարկինսոնի հիվանդությունից։ NPJ Parkinson's disease. 8, 98 (2022)։
Լուո Ս, Չժու Հ, Չժան Ջ և Վան Դ. Միկրոբիոտայի կարևոր դերը նեյրոնալ-գլիալ-էպիթելային միավորների կարգավորման մեջ: Վարակների նկատմամբ կայունություն: 14, 5613–5628 (2021):
Էմին Ա. և այլք։ Տասներկումատնյա աղիքի ալֆա-սինուկլեինի և աղիքային գլիոզի ախտաբանությունը պրոգրեսիվող Պարկինսոնի հիվանդության դեպքում։ շարժում։ շփոթություն։ https://doi.org/10.1002/mds.29358 (2023)։
Սկորվանեկ Մ. և այլք։ Ալֆա-սինուկլեին 5G4-ի դեմ հակամարմինները ճանաչում են բացահայտ Պարկինսոնի հիվանդությունը և պրոդրոմալ Պարկինսոնի հիվանդությունը հաստ աղիքի լորձաթաղանթում։ շարժվել։ շփոթություն։ 33, 1366–1368 (2018)։
Ալգարնի Մ. և Ֆասանո Ա. Էսենցիալ դողի և Պարկինսոնի հիվանդության համընկնում։ Կապված է Պարկինսոնի հիվանդության հետ։ Շփոթվածություն։ 46, С101–С104 (2018)։
Սամփսոն, Թ.Ռ. և այլք։ Աղիքային միկրոբիոտան մոդուլացնում է շարժողական դեֆիցիտը և նեյրոբորբոքումը Պարկինսոնի հիվանդության մոդելներում։ Cell 167, 1469–1480.e1412 (2016)։
Ունգեր, ՄՄ և այլք։ Կարճ շղթայով ճարպաթթուները և աղիքային միկրոբիոտան տարբերվում են Պարկինսոնի հիվանդությամբ հիվանդների և տարիքային համապատասխան խմբի վերահսկիչ խմբի միջև։ Կապված է Պարկինսոնի հիվանդության հետ։ Շփոթություն։ 32, 66–72 (2016)։
Բլիչեր Ե., Լևի Մ., Տատիրովսկի Ե. և Էլինավ Ե. Մետաբոլիտներ, որոնք կարգավորվում են միկրոբիոմի կողմից տիրոջ իմունային միջերեսում: J. Immunology. 198, 572–580 (2017):