Շնորհակալություն nature.com կայք այցելելու համար: Ձեր օգտագործած դիտարկիչի տարբերակն ունի CSS-ի սահմանափակ աջակցություն: Լավագույն փորձի համար խորհուրդ ենք տալիս օգտագործել դիտարկիչի վերջին տարբերակը (կամ անջատել համատեղելիության ռեժիմը Internet Explorer-ում): Բացի այդ, շարունակական աջակցությունն ապահովելու համար այս կայքը չի ներառի ոճեր կամ JavaScript:
Մելամինը ճանաչված սննդային աղտոտիչ է, որը կարող է առկա լինել որոշակի սննդամթերքի կատեգորիաներում՝ թե՛ պատահաբար, թե՛ դիտավորյալ: Այս ուսումնասիրության նպատակն էր ստուգել մելամինի հայտնաբերումը և քանակական որոշումը մանկական կաթնախառնուրդում և կաթի փոշում: Վերլուծվել են Իրանի տարբեր շրջաններից առևտրային առումով մատչելի 40 սննդի նմուշներ, այդ թվում՝ մանկական կաթնախառնուրդ և կաթի փոշի: Նմուշների մելամինի մոտավոր պարունակությունը որոշվել է բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատոգրաֆիայի-ուլտրամանուշակագույն (HPLC-UV) համակարգի միջոցով: Կառուցվել է տրամաչափման կոր (R2 = 0.9925) մելամինի հայտնաբերման համար 0.1–1.2 մկգ մլ−1 միջակայքում: Քանակական որոշման և հայտնաբերման սահմանները համապատասխանաբար 1 մկգ մլ−1 և 3 մկգ մլ−1 էին: Մելամինը ստուգվել է մանկական կաթնախառնուրդում և կաթի փոշում, և արդյունքները ցույց են տվել, որ մանկական կաթնախառնուրդում և կաթի փոշու նմուշներում մելամինի մակարդակը համապատասխանաբար 0.001–0.095 մգ կգ−1 և 0.001–0.004 մգ կգ−1 է: Այս արժեքները համապատասխանում են ԵՄ օրենսդրությանը և Codex Alimentarius-ին: Կարևոր է նշել, որ մելամինի պարունակությամբ այս կաթնամթերքի օգտագործումը էական ռիսկ չի ներկայացնում սպառողների առողջության համար: Սա հաստատվում է նաև ռիսկի գնահատման արդյունքներով:
Մելամինը օրգանական միացություն է՝ C3H6N6 մոլեկուլային բանաձևով, որը ստացվում է ցիանամիդից: Այն շատ ցածր լուծելիություն ունի ջրում և մոտավորապես 66% ազոտ է պարունակում: Մելամինը լայնորեն օգտագործվող արդյունաբերական միացություն է՝ պլաստմասսայի, պարարտանյութերի և սննդի վերամշակման սարքավորումների (ներառյալ սննդի փաթեթավորումը և խոհանոցային պարագաները) արտադրության լայն շրջանակի օրինական կիրառություններով1,2: Մելամինը նաև օգտագործվում է որպես դեղամիջոցների կրող՝ հիվանդությունների բուժման համար: Մելամինի մեջ ազոտի բարձր համամասնությունը կարող է հանգեցնել միացության չարաշահման և սննդի բաղադրիչներին սպիտակուցային մոլեկուլների հատկություններ հաղորդելու3,4: Հետևաբար, սննդամթերքին, այդ թվում՝ կաթնամթերքին մելամին ավելացնելը մեծացնում է ազոտի պարունակությունը: Այսպիսով, սխալմամբ եզրակացվել է, որ կաթի սպիտակուցի պարունակությունն ավելի բարձր է, քան իրականում էր:
Ավելացված մելամինի յուրաքանչյուր գրամի համար սննդի սպիտակուցի պարունակությունը կաճի 0.4%-ով: Այնուամենայնիվ, մելամինը լավ լուծվում է ջրում և կարող է ավելի լուրջ վնաս հասցնել: Հեղուկ մթերքներին, ինչպիսին է կաթը, 1.3 գրամ մելամին ավելացնելը կարող է կաթի սպիտակուցի պարունակությունը մեծացնել 30%-ով5,6: Չնայած մելամինն ավելացվում է կենդանիների և նույնիսկ մարդկանց սննդին՝ սպիտակուցի պարունակությունը մեծացնելու համար7, Codex Alimentarius Commission (CAC) և ազգային մարմինները չեն հաստատել մելամինը որպես սննդային հավելանյութ և այն ներառել են վտանգավոր ցանկում կուլ տալու, շնչելու կամ մաշկի միջոցով կլանելու դեպքում: 2012 թվականին Առողջապահության համաշխարհային կազմակերպության (ԱՀԿ) քաղցկեղի հետազոտությունների միջազգային գործակալությունը մելամինը ներառել է 2B դասի քաղցկեղածինների ցանկում, քանի որ այն կարող է վնասակար լինել մարդու առողջության համար8: Մելամինի երկարատև ազդեցությունը կարող է առաջացնել քաղցկեղ կամ երիկամների վնաս2: Սննդի մեջ պարունակվող մելամինը կարող է կոմպլեքսավորվել ցիանուրաթթվի հետ՝ առաջացնելով ջրում չլուծվող դեղին բյուրեղներ, որոնք կարող են վնասել երիկամների և միզապարկի հյուսվածքը, ինչպես նաև առաջացնել միզուղիների քաղցկեղ և քաշի կորուստ9,10: Այն կարող է առաջացնել սուր սննդային թունավորում և բարձր կոնցենտրացիաների դեպքում՝ մահ, հատկապես նորածինների և փոքր երեխաների մոտ։11 Առողջապահության համաշխարհային կազմակերպությունը (ԱՀԿ) նաև մելամինի թույլատրելի օրական ընդունումը (TDI) սահմանել է մարդկանց համար օրական 0.2 մգ/կգ մարմնի քաշի համար՝ հիմնվելով CAC ուղեցույցների վրա։12 ԱՄՆ Սննդի և դեղերի վարչությունը (US FDA) մելամինի մնացորդային առավելագույն մակարդակը սահմանել է 1 մգ/կգ մանկական կաթնախառնուրդում և 2.5 մգ/կգ այլ սննդամթերքներում։2,7 2008 թվականի սեպտեմբերին հաղորդվել էր, որ մի քանի տեղական մանկական կաթնախառնուրդ արտադրողներ մելամին են ավելացրել կաթի փոշուն՝ իրենց արտադրանքի սպիտակուցային պարունակությունը բարձրացնելու համար, ինչը հանգեցրել է կաթի փոշու թունավորման և մելամինի թունավորման համազգային դեպքի, որը հիվանդացրել է ավելի քան 294,000 երեխայի և հոսպիտալացրել ավելի քան 50,000-ի։13
Կրծքով կերակրումը միշտ չէ, որ հնարավոր է՝ տարբեր գործոնների պատճառով, ինչպիսիք են քաղաքային կյանքի դժվարությունները, մոր կամ երեխայի հիվանդությունը, ինչը հանգեցնում է նորածինների կերակրման համար մանկական կաթնախառնուրդ օգտագործելուն: Արդյունքում, ստեղծվել են գործարաններ՝ մանկական կաթնախառնուրդ արտադրելու համար, որը բաղադրությամբ հնարավորինս մոտ է կրծքի կաթին14: Շուկայում վաճառվող մանկական կաթնախառնուրդը սովորաբար պատրաստվում է կովի կաթից և սովորաբար պատրաստվում է ճարպերի, սպիտակուցների, ածխաջրերի, վիտամինների, հանքանյութերի և այլ միացությունների հատուկ խառնուրդից: Մայրական կաթին մոտ լինելու համար կաթնախառնուրդում սպիտակուցի և ճարպի պարունակությունը տարբեր է, և կախված կաթի տեսակից՝ դրանք հարստացվում են այնպիսի միացություններով, ինչպիսիք են վիտամինները և հանքանյութերը, ինչպիսին է երկաթը15: Քանի որ նորածինները զգայուն խումբ են, և կա թունավորման վտանգ, կաթի փոշու օգտագործման անվտանգությունը կենսական նշանակություն ունի առողջության համար: Չինացի նորածինների շրջանում մելամինի թունավորման դեպքից հետո աշխարհի երկրները մեծ ուշադրություն են դարձրել այս հարցին, և այս ոլորտի զգայունությունը նույնպես մեծացել է: Հետևաբար, հատկապես կարևոր է ուժեղացնել մանկական կաթնախառնուրդների արտադրության վերահսկողությունը՝ նորածինների առողջությունը պաշտպանելու համար: Սննդամթերքում մելամինի հայտնաբերման տարբեր մեթոդներ կան, այդ թվում՝ բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատոգրաֆիա (HPLC), էլեկտրոֆորեզ, զգայական մեթոդ, սպեկտրոֆոտոմետրիա և հակածին-հակամարմին ֆերմենտային իմունոսորբենտային փորձարկում16: 2007 թվականին ԱՄՆ Սննդի և դեղերի վարչությունը (FDA) մշակեց և հրապարակեց սննդամթերքում մելամինի և ցիանուրաթթվի որոշման HPLC մեթոդ, որը մելամինի պարունակությունը որոշելու ամենաարդյունավետ մեթոդն է17:
Մանկական կաթնախառնուրդում մելամինի կոնցենտրացիաները, որոնք չափվել են նոր ինֆրակարմիր սպեկտրոսկոպիայի տեխնիկայի միջոցով, տատանվում էին 0.33-ից մինչև 0.96 միլիգրամ մեկ կիլոգրամի համար (մգ կգ-1):18 Շրի Լանկայում անցկացված ուսումնասիրությունը պարզել է, որ ամբողջական կաթի փոշու մեջ մելամինի մակարդակը տատանվում է 0.39-ից մինչև 0.84 մգ կգ-1: Բացի այդ, ներմուծված մանկական կաթնախառնուրդների նմուշներում մելամինի ամենաբարձր մակարդակներն են եղել՝ համապատասխանաբար 0.96 և 0.94 մգ/կգ: Այս մակարդակները ցածր են կանոնակարգային սահմանից (1 մգ/կգ), սակայն սպառողների անվտանգության համար անհրաժեշտ է մոնիթորինգի ծրագիր:19
Մի շարք ուսումնասիրություններ ուսումնասիրել են մելամինի մակարդակը իրանական մանկական կաթնախառնուրդներում: Նմուշների մոտ 65%-ը պարունակում էր մելամին՝ միջինը 0.73 մգ/կգ և առավելագույնը՝ 3.63 մգ/կգ: Մեկ այլ ուսումնասիրություն ցույց է տվել, որ մանկական կաթնախառնուրդում մելամինի մակարդակը տատանվում է 0.35-ից մինչև 3.40 մկգ/կգ՝ միջինը 1.38 մկգ/կգ: Ընդհանուր առմամբ, իրանական մանկական կաթնախառնուրդներում մելամինի առկայությունը և մակարդակը գնահատվել են տարբեր ուսումնասիրություններում, որոշ նմուշներում մելամին պարունակվում էր կարգավորող մարմինների կողմից սահմանված առավելագույն սահմանաչափից (2.5 մգ/կգ/կեր):
Հաշվի առնելով սննդի արդյունաբերության մեջ կաթի փոշու ուղղակի և անուղղակի հսկայական սպառումը և մանկական կաթնախառնուրդի հատուկ կարևորությունը երեխաների կերակրման մեջ, այս ուսումնասիրության նպատակն էր ստուգել կաթի փոշու և մանկական կաթնախառնուրդի մեջ մելամինի հայտնաբերման մեթոդը: Փաստորեն, այս ուսումնասիրության առաջին նպատակն էր մշակել մանկական կաթնախառնուրդում և կաթի փոշու մեջ մելամինի կեղծումը հայտնաբերելու արագ, պարզ և ճշգրիտ քանակական մեթոդ՝ օգտագործելով բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատոգրաֆիա (HPLC) և ուլտրամանուշակագույն (UV) հայտնաբերում: Երկրորդ, այս ուսումնասիրության նպատակն էր որոշել մելամինի պարունակությունը իրանական շուկայում վաճառվող մանկական կաթնախառնուրդում և կաթի փոշու մեջ:
Մելամինի վերլուծության համար օգտագործվող գործիքները տարբերվում են՝ կախված սննդի արտադրության վայրից: Կաթի և մանկական կաթնախառնուրդում մելամինի մնացորդները չափելու համար օգտագործվել է զգայուն և հուսալի HPLC-UV վերլուծության մեթոդ: Կաթնամթերքը պարունակում է տարբեր սպիտակուցներ և ճարպեր, որոնք կարող են խանգարել մելամինի չափմանը: Հետևաբար, ինչպես նշել են Սանը և այլք 22, գործիքային վերլուծությունից առաջ անհրաժեշտ է համապատասխան և արդյունավետ մաքրման ռազմավարություն: Այս ուսումնասիրության մեջ մենք օգտագործել ենք միանգամյա օգտագործման ներարկիչ-ֆիլտրեր: Այս ուսումնասիրության մեջ մենք օգտագործել ենք C18 սյուն՝ մանկական կաթնախառնուրդում և կաթի փոշում մելամինը առանձնացնելու համար: Նկար 1-ը ցույց է տալիս մելամինի հայտնաբերման քրոմատոգրամը: Բացի այդ, 0.1–1.2 մգ/կգ մելամին պարունակող նմուշների վերականգնումը տատանվել է 95%-ից մինչև 109%, ռեգրեսիայի հավասարումը կազմել է y = 1.2487x − 0.005 (r = 0.9925), իսկ հարաբերական ստանդարտ շեղման (RSD) արժեքները տատանվել են 0.8-ից մինչև 2%: Հասանելի տվյալները ցույց են տալիս, որ մեթոդը հուսալի է ուսումնասիրված կոնցենտրացիայի միջակայքում (աղյուսակ 1): Մելամինի գործիքային հայտնաբերման սահմանը (LOD) և քանակական որոշման սահմանը (LOQ) համապատասխանաբար կազմել են 1 մկգ մլ−1 և 3 մկգ մլ−1: Բացի այդ, մելամինի ուլտրամանուշակագույն սպեկտրը ցուցաբերել է կլանման գոտի 242 նմ-ում: Հայտնաբերման մեթոդը զգայուն է, հուսալի և ճշգրիտ: Այս մեթոդը կարող է օգտագործվել մելամինի մակարդակի ռուտինային որոշման համար:
Նմանատիպ արդյունքներ հրապարակվել են մի քանի հեղինակների կողմից: Կաթնամթերքում մելամինի վերլուծության համար մշակվել է բարձր արդյունավետությամբ հեղուկ քրոմատոգրաֆիայի-ֆոտոդիոդային զանգվածի (HPLC) մեթոդ: Քանակական որոշման ստորին սահմանները կազմել են 340 մկգ կգ−1 կաթի փոշու համար և 280 մկգ կգ−1 մանկական կաթնախառնուրդների համար 240 նմ-ում: Ֆիլացին և այլք (2012) հայտնել են, որ HPLC-ի միջոցով մանկական կաթնախառնուրդում մելամին չի հայտնաբերվել: Այնուամենայնիվ, կաթի փոշու նմուշների 8%-ը պարունակում էր մելամին 0.505–0.86 մգ/կգ մակարդակով: Թիթլմիետը և այլք23 անցկացրել են նմանատիպ ուսումնասիրություն և բարձր արդյունավետությամբ հեղուկ քրոմատոգրաֆիայի-զանգվածային սպեկտրոմետրիայի/MS (HPLC-MS/MS) միջոցով որոշել են մանկական կաթնախառնուրդում (նմուշի համար՝ 72) մելամինի պարունակությունը մոտավորապես 0.0431–0.346 մգ կգ−1: Վենկատասամիի և այլոց կողմից անցկացված ուսումնասիրության մեջ... (2010)-ում, մանկական կաթում և կաթում մելամինի պարունակությունը գնահատելու համար օգտագործվել են կանաչ քիմիայի մոտեցում (առանց ացետոնիտրիլի) և հակադարձ փուլային բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատոգրաֆիա (RP-HPLC): Նմուշի կոնցենտրացիայի միջակայքը 1.0-ից մինչև 80 գ/մլ էր, իսկ արձագանքը գծային էր (r > 0.999): Մեթոդը ցույց է տվել 97.2–101.2 վերականգնումներ 5–40 գ/մլ կոնցենտրացիայի միջակայքում, և վերարտադրելիությունը 1.0%-ից պակաս էր հարաբերական ստանդարտ շեղումից: Ավելին, դիտարկված LOD-ը և LOQ-ը համապատասխանաբար կազմել են 0.1 գ մլ−1 և 0.2 գ մլ−124: Լուտերը և այլք (2011) որոշել են կովի կաթում և կաթի վրա հիմնված մանկական կաթնախառնուրդում մելամինի աղտոտվածությունը՝ օգտագործելով HPLC-UV: Մելամինի կոնցենտրացիաները տատանվել են < 0.2-ից մինչև 2.52 մգ կգ−1: HPLC-UV մեթոդի գծային դինամիկ տիրույթը կովի կաթի համար կազմել է 0.05-ից մինչև 2.5 մգ կգ−1, <15% սպիտակուցի զանգվածային մասնաբաժնով մանկական կաթնախառնուրդների համար՝ 0.13-ից մինչև 6.25 մգ կգ−1, և 0.25-ից մինչև 12.5 մգ կգ−1՝ 15% սպիտակուցի զանգվածային մասնաբաժնով մանկական կաթնախառնուրդների համար։ LOD-ի (և LOQ-ի) արդյունքները կազմել են 0.03 մգ կգ−1 (0.09 մգ կգ−1) կովի կաթի համար, 0.06 մգ կգ−1 (0.18 մգ կգ−1) <15% սպիտակուց պարունակող մանկական կաթնախառնուրդների համար և 0.12 մգ կգ−1 (0.36 մգ կգ−1) 15% սպիտակուց պարունակող մանկական կաթնախառնուրդների համար՝ համապատասխանաբար 3 և 1025 ազդանշան-աղմուկ հարաբերակցությամբ LOD-ի և LOQ-ի համար։ Դիբեսը և այլք (2012) ուսումնասիրել են մելամինի մակարդակները մանկական կաթնախառնուրդների և կաթի փոշու նմուշներում՝ օգտագործելով HPLC/DMD։ Մանկական կաթնախառնուրդում ամենացածր և ամենաբարձր մակարդակները համապատասխանաբար կազմել են 9.49 մգ/կգ և 258 մգ/կգ: Հայտնաբերման սահմանը (LOD) կազմել է 0.05 մգ/կգ:
Ջավաիդը և այլք հայտնել են, որ մանկական կաթնախառնուրդում մելամինի մնացորդները Ֆուրիեի ձևափոխության ինֆրակարմիր սպեկտրոսկոպիայի (FT-MIR) միջոցով գտնվում են 0.002–2 մգ կգ−1 միջակայքում (LOD = 1 մգ կգ−1; LOQ = 3.5 մգ կգ−1): Ռեզաին և այլք27 առաջարկել են HPLC-DDA (λ = 220 նմ) ​​մեթոդ՝ մելամինը գնահատելու համար և կաթի փոշու համար ստացել են 0.08 մկգ մլ−1 LOQ, որը ցածր էր այս ուսումնասիրության մեջ ստացված մակարդակից: Սանը և այլք մշակել են RP-HPLC-DAD՝ հեղուկ կաթում մելամինի հայտնաբերման համար՝ պինդ փուլի արդյունահանման (SPE) միջոցով: Նրանք ստացել են համապատասխանաբար 18 և 60 մկգ կգ−128 LOD և LOQ, որոնք ավելի զգայուն են, քան ներկայիս ուսումնասիրությունը: Մոնտեսանոն և այլք: հաստատեց HPLC-DMD մեթոդի արդյունավետությունը սպիտակուցային հավելումներում մելամինի պարունակության գնահատման համար՝ 0.05–3 մգ/կգ քանակական որոշման սահմանաչափով, որը պակաս զգայուն էր, քան այս ուսումնասիրության մեջ օգտագործված մեթոդը29:
Անկասկած, վերլուծական լաբորատորիաները կարևոր դեր են խաղում շրջակա միջավայրի պաշտպանության գործում՝ տարբեր նմուշներում աղտոտիչների մոնիթորինգի միջոցով: Այնուամենայնիվ, վերլուծության ընթացքում մեծ թվով ռեակտիվների և լուծիչների օգտագործումը կարող է հանգեցնել վտանգավոր մնացորդների առաջացման: Հետևաբար, կանաչ վերլուծական քիմիան (ԿԱՆՔ) մշակվել է 2000 թվականին՝ օպերատորների և շրջակա միջավայրի վրա վերլուծական ընթացակարգերի անբարենպաստ ազդեցությունը նվազեցնելու կամ վերացնելու համար26: Մելամինը հայտնաբերելու համար օգտագործվել են մելամինի հայտնաբերման ավանդական մեթոդներ, ներառյալ քրոմատոգրաֆիան, էլեկտրոֆորեզը, մազանոթային էլեկտրոֆորեզը և ֆերմենտային իմունոսորբենտային փորձարկումը (ELISA): Այնուամենայնիվ, բազմաթիվ հայտնաբերման մեթոդների շարքում էլեկտրաքիմիական սենսորները մեծ ուշադրություն են գրավել իրենց գերազանց զգայունության, ընտրողականության, արագ վերլուծության ժամանակի և օգտագործողին հարմար բնութագրերի շնորհիվ30,31: Կանաչ նանոտեխնոլոգիան օգտագործում է կենսաբանական ուղիներ՝ նանոմատերիալներ սինթեզելու համար, որոնք կարող են նվազեցնել վտանգավոր թափոնների առաջացումը և էներգիայի սպառումը, դրանով իսկ խթանելով կայուն գործելակերպի ներդրումը: Օրինակ՝ էկոլոգիապես մաքուր նյութերից պատրաստված նանոկոմպոզիտները կարող են օգտագործվել կենսասենսորներում՝ մելամին նման նյութեր հայտնաբերելու համար32,33,34:
Ուսումնասիրությունը ցույց է տալիս, որ պինդ փուլային միկրոարդյունահանումը (SPME) արդյունավետորեն օգտագործվում է ավանդական արդյունահանման մեթոդների համեմատ ավելի բարձր էներգաարդյունավետության և կայունության շնորհիվ: SPME-ի շրջակա միջավայրի համար անվտանգությունը և էներգաարդյունավետությունը այն դարձնում են անալիտիկ քիմիայի մեջ ավանդական արդյունահանման մեթոդների գերազանց այլընտրանք և ապահովում են նմուշների պատրաստման ավելի կայուն և արդյունավետ մեթոդ35:
2013 թվականին Վուն և իր գործընկերները մշակեցին բարձր զգայուն և ընտրողական մակերեսային պլազմոնային ռեզոնանսի (մինի-SPR) կենսազգայիչ, որն օգտագործում է մելամինի և հակամելամինային հակամարմինների միջև կապը՝ մանկական կաթնախառնուրդում մելամինը արագորեն հայտնաբերելու համար՝ օգտագործելով իմունավերլուծություն: SPR կենսազգայիչը, որը զուգորդվում է իմունավերլուծության հետ (օգտագործելով մելամին-կոնյուգացված խոշոր եղջերավոր անասունների շիճուկային ալբումին), հեշտ օգտագործվող և ցածր գնով տեխնոլոգիա է՝ ընդամենը 0.02 մկգ մլ-136 հայտնաբերման սահմանով:
Նասիրին և Աբբասյանը օգտագործել են բարձր պոտենցիալով շարժական սենսոր՝ գրաֆենի օքսիդ-քիտոզան կոմպոզիտների (GOCS) հետ համատեղ՝ առևտրային նմուշներում մելամինը հայտնաբերելու համար37: Այս մեթոդը ցույց է տվել գերբարձր ընտրողականություն, ճշգրտություն և արձագանք: GOCS սենսորը ցուցաբերել է ուշագրավ զգայունություն (239.1 μM−1), 0.01-ից մինչև 200 μM գծային միջակայք, 1.73 × 104 կապակցության հաստատուն և մինչև 10 նՄ LOD: Ավելին, Չանդրասեկարի և այլոց կողմից 2024 թվականին անցկացված ուսումնասիրությունը ընդունել է էկոլոգիապես մաքուր և ծախսարդյունավետ մոտեցում: Նրանք պապայայի կեղևի քաղվածքն օգտագործել են որպես վերականգնող նյութ՝ էկոլոգիապես մաքուր մեթոդով ցինկի օքսիդի նանոմասնիկներ (ZnO-NPs) սինթեզելու համար: Հետագայում մշակվել է եզակի միկրո-Ռամանի սպեկտրոսկոպիայի տեխնիկա՝ մանկական կաթնախառնուրդում մելամինի որոշման համար: Գյուղատնտեսական թափոններից ստացված ZnO-NPs-ները ցույց են տվել իրենց ներուժը որպես արժեքավոր ախտորոշիչ գործիք և հուսալի, ցածր գնով տեխնոլոգիա մելամինը մոնիթորինգի և հայտնաբերման համար38:
Ալիզադեն և այլք (2024) օգտագործել են բարձր զգայուն մետաղ-օրգանական շրջանակի (MOF) ֆլուորեսցենցիայի հարթակ՝ կաթի փոշու մեջ մելամինը որոշելու համար: Սենսորի գծային տիրույթը և ստորին հայտնաբերման սահմանը, որոնք որոշվել են 3σ/S-ի միջոցով, համապատասխանաբար կազմել են 40-ից մինչև 396.45 նՄ (համարժեք է 25 մկգ կգ-1-ից մինչև 0.25 մգ կգ-1) և 40 նՄ (համարժեք է 25 մկգ կգ-1): Այս տիրույթը զգալիորեն ցածր է մանկական կաթնախառնուրդում (1 մգ կգ-1) և այլ սննդի/կերերի նմուշներում (2.5 մգ կգ-1) մելամինի նույնականացման համար սահմանված առավելագույն մնացորդային մակարդակներից (MRL): Ֆլուորեսցենտային սենսորը (տերբիում (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) ցուցաբերել է ավելի բարձր ճշգրտություն և ավելի ճշգրիտ չափման հնարավորություն, քան HPLC39-ը՝ կաթի փոշու մեջ մելամինը հայտնաբերելու հարցում: Կանաչ քիմիայի կենսասենսորներն ու նանոկոմպոզիտները ոչ միայն բարելավում են հայտնաբերման հնարավորությունները, այլև նվազագույնի են հասցնում շրջակա միջավայրի վտանգները՝ համաձայն կայուն զարգացման սկզբունքների:
Կանաչ քիմիայի սկզբունքները կիրառվել են մելամինի որոշման տարբեր մեթոդներում: Մեկ մոտեցումը կանաչ դիսպերսիոն պինդ փուլային միկրոարդյունահանման մեթոդի մշակումն է՝ օգտագործելով β-ցիկլոդեքստրին բնական բևեռային պոլիմերը, որը խաչաձև կապված է կիտրոնաթթվի հետ՝ մելամինի արդյունավետ արդյունահանման համար 40 այնպիսի նմուշներից, ինչպիսիք են մանկական կաթնախառնուրդը և տաք ջուրը: Մեկ այլ մեթոդ օգտագործում է Մաննիչի ռեակցիան կաթի նմուշներում մելամինի որոշման համար: Այս մեթոդը էժան է, էկոլոգիապես մաքուր և բարձր ճշգրտությամբ՝ 0.1–2.5 ppm գծային միջակայքով և ցածր հայտնաբերման սահմանով 41: Ավելին, մշակվել է հեղուկ կաթում և մանկական կաթնախառնուրդում մելամինի քանակական որոշման համար ծախսարդյունավետ և էկոլոգիապես մաքուր մեթոդ՝ օգտագործելով Ֆուրիեի ձևափոխության ինֆրակարմիր փոխանցման սպեկտրոսկոպիա՝ բարձր ճշգրտությամբ և համապատասխանաբար 1 ppm և 3.5 ppm հայտնաբերման սահմաններով 42: Այս մեթոդները ցույց են տալիս կանաչ քիմիայի սկզբունքների կիրառումը մելամինի որոշման արդյունավետ և կայուն մեթոդների մշակման գործում:
Մի շարք ուսումնասիրություններ առաջարկել են մելամինի հայտնաբերման նորարարական մեթոդներ, ինչպիսիք են պինդ փուլային արդյունահանման և բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատոգրաֆիայի (HPLC)43 կիրառումը, ինչպես նաև արագ բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատոգրաֆիայի (HPLC) կիրառումը, որը չի պահանջում բարդ նախնական մշակում կամ իոնային զույգերի ռեակտիվներ, դրանով իսկ նվազեցնելով քիմիական թափոնների քանակը44: Այս մեթոդները ոչ միայն ճշգրիտ արդյունքներ են տալիս կաթնամթերքում մելամինի որոշման համար, այլև համապատասխանում են կանաչ քիմիայի սկզբունքներին՝ նվազագույնի հասցնելով վտանգավոր քիմիական նյութերի օգտագործումը և նվազեցնելով վերլուծական գործընթացի ընդհանուր շրջակա միջավայրի վրա ազդեցությունը:
Տարբեր ապրանքանիշերի քառասուն նմուշներ փորձարկվել են եռակի, և արդյունքները ներկայացված են աղյուսակ 2-ում: Մանկական կաթնախառնուրդի և կաթի փոշու նմուշներում մելամինի մակարդակը համապատասխանաբար տատանվել է 0.001-ից մինչև 0.004 մգ/կգ և 0.001-ից մինչև 0.095 մգ/կգ: Մանկական կաթնախառնուրդի երեք տարիքային խմբերի միջև էական փոփոխություններ չեն նկատվել: Բացի այդ, մելամին հայտնաբերվել է կաթի փոշու 80%-ում, սակայն մանկական կաթնախառնուրդների 65%-ը աղտոտված է եղել մելամինով:
Արդյունաբերական կաթի փոշու մեջ մելամինի պարունակությունն ավելի բարձր էր, քան մանկական կաթնախառնուրդում, և տարբերությունը նշանակալի էր (p<0.05) (Նկար 2):
Ստացված արդյունքները ցածր էին FDA-ի կողմից սահմանված սահմաններից (1 և 2.5 մգ/կգ-ից ցածր): Բացի այդ, արդյունքները համապատասխանում են CAC (2010) և EU45,46-ի կողմից սահմանված սահմաններին, այսինքն՝ մանկական կաթնախառնուրդի համար առավելագույն թույլատրելի սահմանը 1 մգ կգ-1 է, իսկ կաթնամթերքի համար՝ 2.5 մգ կգ-1:
Գհանատիի և այլոց 2023 թվականին անցկացված ուսումնասիրության համաձայն՝ Իրանում տարբեր տեսակի փաթեթավորված կաթում մելամինի պարունակությունը տատանվում էր 50.7-ից մինչև 790 մկգ/կգ: Նրանց արդյունքները ցածր էին FDA-ի թույլատրելի սահմանից: Մեր արդյունքները ցածր են Շոդերի և այլոց48 և Ռիմայի և այլոց49 արդյունքներից: Շոդերը և այլք (2010) պարզել են, որ ELISA-ով որոշված ​​կաթի փոշու մեջ (n=49) մելամինի մակարդակը տատանվում էր 0.5-ից մինչև 5.5 մգ/կգ: Ռիման և այլք վերլուծել են կաթի փոշու մեջ մելամինի մնացորդները ֆլուորեսցենտային սպեկտրոֆոտոմետրիայի միջոցով և պարզել, որ կաթի փոշու մեջ մելամինի պարունակությունը կազմում է 0.72–5.76 մգ/կգ: 2011 թվականին Կանադայում անցկացվել է ուսումնասիրություն՝ մանկական կաթնախառնուրդում (n=94) մելամինի մակարդակը վերահսկելու համար՝ հեղուկ քրոմատոգրաֆիայի (LC/MS) միջոցով: Մելամինի կոնցենտրացիաները գտնվել են ընդունելի սահմանից ցածր (նախնական ստանդարտ՝ 0.5 մգ/կգ): Անհավանական է, որ հայտնաբերված մելամինի խարդախ մակարդակները սպիտակուցի պարունակությունը մեծացնելու համար կիրառված մարտավարություն լինեն։ Սակայն դա չի կարող բացատրվել պարարտանյութերի օգտագործմամբ, տարայի պարունակության տեղափոխմամբ կամ նմանատիպ գործոններով։ Ավելին, Կանադա ներմուծված կաթի փոշու մեջ մելամինի աղբյուրը չի բացահայտվել50։
Հասանին և այլք 2013 թվականին իրանական շուկայում չափել են մելամինի պարունակությունը կաթի փոշու և հեղուկ կաթի մեջ և նմանատիպ արդյունքներ են ստացել։ Արդյունքները ցույց են տվել, որ բացառությամբ կաթի փոշու և հեղուկ կաթի մեկ ապրանքանիշի, մյուս բոլոր նմուշները աղտոտված էին մելամինով՝ կաթի փոշու մեջ դրա մակարդակը տատանվել է 1.50-ից մինչև 30.32 մկգ գ−1, իսկ կաթում՝ 0.11-ից մինչև 1.48 մկգ մլ−1։ Հատկանշական է, որ ցիանուրաթթու չի հայտնաբերվել որևէ նմուշում, ինչը նվազեցնում է սպառողների մոտ մելամինի թունավորման հավանականությունը։51 Նախորդ ուսումնասիրությունները գնահատել են մելամինի կոնցենտրացիան կաթի փոշի պարունակող շոկոլադե արտադրանքներում։ Ներմուծված նմուշների մոտ 94%-ը և իրանական նմուշների 77%-ը պարունակում էին մելամին։ Ներմուծված նմուշներում մելամինի մակարդակը տատանվել է 0.032-ից մինչև 2.692 մգ/կգ, մինչդեռ իրանական նմուշներում՝ 0.013-ից մինչև 2.600 մգ/կգ։ Ընդհանուր առմամբ, մելամին հայտնաբերվել է նմուշների 85%-ում, սակայն միայն մեկ կոնկրետ ապրանքանիշի մոտ էր թույլատրելի սահմանից բարձր մակարդակը։44 Թիթլմիերը և այլք հայտնել են, որ կաթի փոշու մեջ մելամինի մակարդակը տատանվում է 0.00528-ից մինչև 0.0122 մգ/կգ։
Աղյուսակ 3-ում ամփոփված են երեք տարիքային խմբերի ռիսկի գնահատման արդյունքները: Բոլոր տարիքային խմբերում ռիսկը 1-ից պակաս էր: Այսպիսով, մանկական կաթնախառնուրդում մելամինից առողջության համար ոչ քաղցկեղածին ռիսկ չկա:
Կաթնամթերքի աղտոտման ցածր մակարդակը կարող է պայմանավորված լինել պատրաստման ընթացքում ոչ միտումնավոր աղտոտմամբ, մինչդեռ ավելի բարձր մակարդակը կարող է պայմանավորված լինել միտումնավոր ավելացումներով: Ավելին, մելամինի ցածր մակարդակ ունեցող կաթնամթերքի սպառումից մարդու առողջության համար ընդհանուր ռիսկը համարվում է ցածր: Կարելի է եզրակացնել, որ մելամինի նման ցածր մակարդակ պարունակող արտադրանքի սպառումը որևէ վտանգ չի ներկայացնում սպառողների առողջության համար52:
Հաշվի առնելով կաթնամթերքի արդյունաբերության մեջ սննդի անվտանգության կառավարման կարևորությունը, մասնավորապես հանրային առողջության պաշտպանության առումով, չափազանց կարևոր է մշակել և վավերացնել կաթի փոշու և մանկական կաթնախառնուրդում մելամինի մակարդակների և մնացորդների գնահատման և համեմատման մեթոդ: Մշակվել է պարզ և ճշգրիտ HPLC-UV սպեկտրոֆոտոմետրիկ մեթոդ՝ մանկական կաթնախառնուրդում և կաթի փոշու մեջ մելամինի որոշման համար: Մեթոդը վավերացվել է՝ դրա հուսալիությունն ու ճշգրտությունն ապահովելու համար: Մեթոդի հայտնաբերման և քանակական որոշման սահմանները բավականաչափ զգայուն են եղել մանկական կաթնախառնուրդում և կաթի փոշու մեջ մելամինի մակարդակը չափելու համար: Մեր տվյալների համաձայն՝ մելամին հայտնաբերվել է իրանական նմուշների մեծ մասում: Բոլոր հայտնաբերված մելամինի մակարդակները ցածր էին CAC-ի կողմից սահմանված առավելագույն թույլատրելի սահմաններից, ինչը ցույց է տալիս, որ այս տեսակի կաթնամթերքի օգտագործումը վտանգ չի ներկայացնում մարդու առողջության համար:
Օգտագործված բոլոր քիմիական ռեակտիվները վերլուծական որակի էին՝ մելամին (2,4,6-տրիամինո-1,3,5-տրիազին) 99% մաքրությամբ (Sigma-Aldrich, Սենթ Լուիս, Միսսուրի), HPLC որակի ացետոնիտրիլ (Merck, Դարմշտադտ, Գերմանիա), գերմաքուր ջուր (Millipore, Մորֆհայմ, Ֆրանսիա), միանգամյա օգտագործման ներարկիչ-ֆիլտրեր (Chromafil Xtra PVDF-45/25, ծակոտիների չափսը՝ 0.45 մկմ, թաղանթի տրամագիծը՝ 25 մմ) (Macherey-Nagel, Դյուրեն, Գերմանիա):
Նմուշները պատրաստելու համար օգտագործվել են ուլտրաձայնային լոգարան (Elma, Գերմանիա), ցենտրիֆուգ (Beckman Coulter, Krefeld, Գերմանիա) և HPLC (KNAUER, Գերմանիա):
Օգտագործվել է բարձր արդյունավետությամբ հեղուկ քրոմատոգրաֆ (KNAUER, Գերմանիա), որը հագեցած է ուլտրամանուշակագույն ճառագայթման դետեկտորով: HPLC վերլուծության պայմանները հետևյալն էին. օգտագործվել է UHPLC Ultimate համակարգ, որը հագեցած է ODS-3 C18 վերլուծական սյունակով (4.6 մմ × 250 մմ, մասնիկի չափսը՝ 5 մկմ) (MZ, Գերմանիա): HPLC էլյուենտը (շարժական փուլ) TFA/մեթանոլ խառնուրդ էր (450:50 մլ)՝ 1 մլ րոպե-1 հոսքի արագությամբ: Հայտնաբերման ալիքի երկարությունը 242 նմ էր: Ներարկման ծավալը 100 մկլ էր, սյունակի ջերմաստիճանը՝ 20 °C: Քանի որ դեղամիջոցի պահպանման ժամանակը երկար է (15 րոպե), հաջորդ ներարկումը պետք է կատարվի 25 րոպե անց: Մելամինը նույնականացվել է մելամինի ստանդարտների պահպանման ժամանակը և ուլտրամանուշակագույն սպեկտրի գագաթնակետը համեմատելով:
Մելամինի ստանդարտ լուծույթը (10 մկգ/մլ) պատրաստվել է ջրի միջոցով և պահվել սառնարանում (4°C) լույսից հեռու։ Հիմնական լուծույթը նոսրացնել շարժական ֆազով և պատրաստել աշխատանքային ստանդարտ լուծույթներ։ Յուրաքանչյուր ստանդարտ լուծույթ ներարկվել է HPLC 7 անգամ։ Կալիբրացման հավասարումը 10 հաշվարկվել է որոշված ​​գագաթնակետային մակերեսի և որոշված ​​կոնցենտրացիայի ռեգրեսիոն վերլուծության միջոցով։
Իրանի տեղական սուպերմարկետներից և դեղատներից գնվել են առևտրային առումով մատչելի կովի կաթի փոշի (20 նմուշ) և կովի կաթի հիման վրա պատրաստված մանկական կաթնախառնուրդի տարբեր ապրանքանիշերի նմուշներ (20 նմուշ)՝ տարբեր տարիքային խմբերի (0–6 ամիս, 6–12 ամիս և >12 ամիս) նորածիններին կերակրելու համար, և մինչև վերլուծությունը պահվել են սառնարանային ջերմաստիճանում (4°C): Այնուհետև կշռվել է 1 ± 0.01 գ համասեռացված կաթի փոշի և խառնվել ացետոնիտրիլ:ջուր (50:50, v/v; 5 մլ) հետ: Խառնուրդը խառնվել է 1 րոպե, այնուհետև ուլտրաձայնային լոգարանում ենթարկվել է ուլտրաձայնային մշակման 30 րոպե և վերջապես թափահարվել 1 րոպե: Այնուհետև խառնուրդը ցենտրիֆուգացվել է 9000 × g-ով 10 րոպե սենյակային ջերմաստիճանում, և վերին շերտը զտվել է 2 մլ ավտոնմուշառման սրվակի մեջ՝ օգտագործելով 0.45 մկմ ներարկիչ ֆիլտր: Այնուհետև ֆիլտրատը (250 մկլ) խառնվել է ջրի (750 մկլ) հետ և ներարկվել է HPLC համակարգի մեջ10,42:
Մեթոդը վավերացնելու համար մենք որոշեցինք վերականգնումը, ճշգրտությունը, հայտնաբերման սահմանը (LOD), քանակական որոշման սահմանը (LOQ) և ճշգրտությունը օպտիմալ պայմաններում: LOD-ը սահմանվեց որպես նմուշի պարունակություն, որի գագաթնակետի բարձրությունը բազային աղմուկի մակարդակից երեք անգամ մեծ է: Մյուս կողմից, նմուշի պարունակությունը, որի գագաթնակետի բարձրությունը ազդանշան-աղմուկ հարաբերակցությունից 10 անգամ մեծ է, սահմանվեց որպես LOQ:
Սարքի արձագանքը որոշվել է յոթ տվյալների կետերից բաղկացած տրամաչափման կորի միջոցով: Օգտագործվել են մելամինի տարբեր պարունակություններ (0, 0.2, 0.3, 0.5, 0.8, 1 և 1.2): Որոշվել է մելամինի հաշվարկման ընթացակարգի գծայինությունը: Բացի այդ, դատարկ նմուշներին ավելացվել են մելամինի մի քանի տարբեր մակարդակներ: Տամաչափման կորը կառուցվել է մանկական կաթնախառնուրդի և կաթի փոշու նմուշների մեջ մելամինի ստանդարտ լուծույթի 0.1–1.2 մկգ մլ−1 անընդհատ ներարկելով, և դրա R2 = 0.9925 է: Ճշգրտությունը գնահատվել է ընթացակարգի կրկնելիությամբ և վերարտադրելիությամբ և ձեռք է բերվել առաջին և հաջորդ երեք օրերին նմուշներ ներարկելով (եռակի): Մեթոդի կրկնելիությունը գնահատվել է ավելացված մելամինի երեք տարբեր կոնցենտրացիաների համար RSD տոկոսը հաշվարկելով: Վերականգնման ուսումնասիրություններ են իրականացվել ճշգրտությունը որոշելու համար: Մանկական կաթնախառնուրդի և չոր կաթի նմուշներում մելամինի կոնցենտրացիայի երեք մակարդակներում (0.1, 1.2, 2) հաշվարկվել է վերականգնման աստիճանը արդյունահանման մեթոդով9,11,15:
Օրական մոտավոր ընդունումը (ՕՕԸ) ​​որոշվել է հետևյալ բանաձևով՝ ՕՕԸ = Ci × Cc/BW:
Որտեղ Ci-ն մելամինի միջին պարունակությունն է, Cc-ն՝ կաթի սպառումը, իսկ BW-ն՝ երեխաների միջին քաշը։
Տվյալների վերլուծությունը կատարվել է SPSS 24 ծրագրի միջոցով: Նորմալությունը ստուգվել է Կոլմոգորով-Սմիրնովի թեստի միջոցով. բոլոր տվյալները ոչ պարամետրիկ թեստեր էին (p = 0): Հետևաբար, խմբերի միջև նշանակալի տարբերությունները որոշելու համար օգտագործվել են Կրուսկալ-Ուոլիսի թեստը և Մանն-Ուիթնիի թեստը:
Ինգելֆինգեր կրտսեր։ Մելամինը և դրա ազդեցությունը սննդի գլոբալ աղտոտման վրա։ New England Journal of Medicine 359(26), 2745–2748 (2008)։
Լինչ, Ռ.Ա. և այլք։ pH-ի ազդեցությունը մելամինի միգրացիայի վրա մանկական ամաններում։ Սննդի աղտոտման միջազգային հանդես, 2, 1–8 (2015)։
Բարեթ, Մ.Պ. և Գիլբերտ, Ի.Հ. Թունավոր միացությունների թիրախավորումը տրիպանոսոմների ներքին շերտերում: Progress in Parasitology 63, 125–183 (2006):
Նիրման, Մ.Ֆ. և այլք։ Մելամինի դենդրիմերի՝ որպես դեղերի առաքման միջոցների in vitro և in vivo գնահատում։ Դեղագործության միջազգային հանդես, 281(1–2), 129–132(2004)։
Առողջապահության համաշխարհային կազմակերպություն։ Մասնագիտական ​​հանդիպումներ 1–4՝ մելամինի և ցիանուրաթթվի տոքսիկոլոգիական ասպեկտները վերանայելու համար (2008)։
Հոու, ԱԿ-Ս., Կվան, ԹՀ և Լի, ՊԿ-Տ. Մելամինի թունավորությունը և երիկամը։ Ամերիկյան նեֆրոլոգիայի ընկերության հանդես 20(2), 245–250 (2009)։
Օզթուրք, Ս. և Դեմիր, Ն. Բարձր արդյունավետությամբ հեղուկ քրոմատոգրաֆիայի (HPLC) միջոցով կաթնամթերքում մելամինի նույնականացման համար նոր IMAC ադսորբենտի մշակում: Սննդի սինթեզի և վերլուծության հանդես 100, 103931 (2021):
Չանսուվարն, Վ., Փանիկ, Ս. և Իմիմ, Ա. Մելամինի պարզ սպեկտրոֆոտոմետրիկ որոշումը հեղուկ կաթում՝ հիմնվելով Մաննիչի կանաչի ռեակցիայի վրա: Spectrochem. Acta Part A Mol. Biomol. Spectrosc. 113, 154–158 (2013):
Դիբս, Մ. և Էլ-Հաբիբ, Ռ. Մելամինի որոշումը մանկական կաթնախառնուրդում, կաթի փոշում և պանգասիուսի նմուշներում HPLC/դիոդային զանգվածային քրոմատոգրաֆիայի միջոցով: Շրջակա միջավայրի անալիտիկ տոքսիկոլոգիայի հանդես, 2(137), 2161–0525.1000137 (2012):
Սկիններ, Կ.Գ., Թոմաս, Ջ.Դ. և Օստերլոհ, Ջ.Դ. Մելամինի թունավորությունը։ Բժշկական տոքսիկոլոգիայի հանդես, 6, 50–55 (2010)։
Առողջապահության համաշխարհային կազմակերպություն (ԱՀԿ), Մելամինի և ցիանուրաթթվի տոքսիկոլոգիան և առողջապահական ասպեկտները. Առողջապահության Կանադայի առողջապահության կողմից աջակցվող ԱՀԿ/ՊԳԿ համագործակցային փորձագիտական ​​հանդիպման զեկույց, Օտտավա, Կանադա, 2008 թվականի դեկտեմբերի 1-4 (2009):
Կորմա, Ս.Ա. և այլք։ Նոր ֆունկցիոնալ կառուցվածքային լիպիդներ պարունակող մանկական կաթնախառնուրդի փոշու և առևտրային մանկական կաթնախառնուրդի լիպիդային կազմի և որակի համեմատական ​​ուսումնասիրություն։ Եվրոպական սննդի հետազոտություն և տեխնոլոգիա 246, 2569–2586 (2020)։
Էլ-Վասիֆ, Մ. և Հաշեմ, Հ. Մանկական կաթնախառնուրդի սննդային արժեքի, որակական հատկանիշների և պահպանման ժամկետի բարձրացում՝ օգտագործելով արմավենու յուղ: Մերձավոր Արևելքի գյուղատնտեսական հետազոտությունների հանդես 6, 274–281 (2017):
Յին, Վ. և այլք։ Մելամինի դեմ մոնոկլոնալ հակամարմինների արտադրություն և անուղղակի մրցակցային ELISA մեթոդի մշակում՝ մելամինի հայտնաբերման համար հում կաթում, չոր կաթում և կենդանիների կերում։ Գյուղատնտեսական և սննդի քիմիայի հանդես 58(14), 8152–8157 (2010)։